| 中文摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 文献综述 | 第15-29页 |
| 第一章 体细胞核移植受体卵母细胞去核方法研究进展 | 第15-22页 |
| 1 受体卵母细胞种类 | 第15-16页 |
| 2 受体卵母细胞去核方法 | 第16-22页 |
| ·化学诱导去核的发展历程 | 第17-18页 |
| ·Deme化学诱导去核原理 | 第18页 |
| ·Deme诱导去核后核移植程序 | 第18-19页 |
| ·Deme完全诱导去核的注核程序 | 第19页 |
| ·Deme不完全诱导法辅助去核注核程序 | 第19页 |
| ·影响Deme诱导去核因素 | 第19-20页 |
| ·卵母细胞种属特异性 | 第20页 |
| ·卵母细胞对Deme的耐受性 | 第20页 |
| ·卵母细胞时相差异性 | 第20页 |
| ·目前存在的问题 | 第20-21页 |
| ·展望 | 第21-22页 |
| 第二章 克隆胚胎重构方法的研究进展 | 第22-29页 |
| 1 重构胚胎构建方法 | 第22-24页 |
| ·透明带下注射-融合法 | 第22-23页 |
| ·胞质内注射法 | 第23页 |
| ·去透明带-辅助去核 | 第23页 |
| ·去透明带手工克隆 | 第23-24页 |
| 2 重构胚的激活 | 第24页 |
| ·钙离子主导作用 | 第24页 |
| ·激活剂激活作用 | 第24页 |
| 3 重构胚培养 | 第24-25页 |
| 4 克隆技术应用前景和存在的问题 | 第25-27页 |
| ·克隆动物应用前景 | 第25-27页 |
| ·转基因动物生产和医学领域中的应用 | 第25-26页 |
| ·在畜牧业生产和濒危野生动物保护方面的应用 | 第26-27页 |
| ·动物克隆存在的问题 | 第27页 |
| 5 本项目研究的内容、目的及意义 | 第27-29页 |
| ·研究内容 | 第27页 |
| ·目的及意义 | 第27-29页 |
| 试验研究 | 第29-52页 |
| 第三章 脱羧秋水仙素诱导牛MII卵母细胞去核效果研究 | 第29-38页 |
| 1 材料和方法 | 第29-32页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30页 |
| ·卵巢采集和卵母细胞体外培养 | 第30页 |
| ·诱导去核处理 | 第30页 |
| ·实验设计 | 第30-32页 |
| ·Deme浓度和处理时间对MII卵母细胞去核影响 | 第30-31页 |
| ·不同处理方式对MII卵母细胞去核影响 | 第31页 |
| ·Deme与不同试剂配伍对MII卵母细胞去核影响 | 第31页 |
| ·Deme诱导去核后染色质回复研究 | 第31-32页 |
| ·数据分析 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-35页 |
| ·Deme浓度和处理时间对MII卵母细胞去核效果的影响 | 第32-33页 |
| ·两种处理方式对MII卵母细胞去核效果影响 | 第33-34页 |
| ·Deme与不同试剂配伍对MII卵母细胞去核效果 | 第34页 |
| ·Deme诱导去核后染色质回复情况 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| 4 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 供体输卵管上皮细胞分离纯化及其相关特性研究 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·实验材料与试剂 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·原代细胞分离培养与纯化 | 第39页 |
| ·传代细胞培养与纯化 | 第39-40页 |
| ·上皮细胞免疫组化鉴定 | 第40页 |
| ·电镜样品制备与观察 | 第40-41页 |
| ·上皮细胞生长增殖能力观察 | 第41页 |
| ·EGF对上皮细胞细胞周期和凋亡的影响 | 第41页 |
| 2 实验结果与分析 | 第41-44页 |
| ·上皮细胞分离纯化后形态特征 | 第41-42页 |
| ·上皮细胞免疫组化和扫描电镜结果 | 第42-43页 |
| ·上皮细胞生长增殖能力分析 | 第43页 |
| ·EGF对牛输卵管上皮细胞周期和凋亡的情况 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| 4 小结 | 第46-47页 |
| 第五章 化学诱导去核联合全细胞胞质注射进行牛体细胞核移植研究 | 第47-52页 |
| 1 实验材料和方法 | 第47-48页 |
| ·卵巢采集和卵母细胞体外培养 | 第47页 |
| ·诱导去核处理 | 第47页 |
| ·供体细胞的准备 | 第47页 |
| ·核移植胚胎重构和培养 | 第47-48页 |
| ·实验设计 | 第48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 4 小结 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
