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传染性法氏囊病毒滨州地方株的分离鉴定及B87疫苗对其免疫效果

一、中文摘要第1-7页
二、英文摘要第7-8页
三、缩略语英汉对照表第8-9页
四、引言第9-19页
 1 概述第9-10页
 2 IBDV的病原学特性第10-11页
   ·病毒学分类与结构特性第10页
   ·理化特性第10-11页
   ·生物学特性第11页
 3 分子生物学研究进展第11-16页
   ·IBDV基因组结构第11-13页
   ·VP2病毒蛋白及其功能第13-14页
   ·病毒抗原变异的分子基础第14-15页
   ·IBDV毒力变异的分子基础第15-16页
 4 IBD的诊断第16页
 5 IBD的防制第16-19页
   ·防制措施第16-17页
   ·免疫疫苗第17-18页
   ·存在问题及防制前景第18-19页
五、研究内容第19-43页
 试验一 IBDV野毒株的分离鉴定第19-23页
  1 材料和方法第19-20页
   ·实验用鸡胚第19页
   ·实验用鸡第19页
   ·IBD的标准抗原和阳性血清第19页
   ·病料第19页
   ·病毒分离第19页
     ·病料处理第19页
     ·病毒纯化第19页
   ·Sdbz-0610株的鉴定第19-20页
     ·琼脂扩散试验第19-20页
     ·鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定第20页
     ·IBDV Sdbz-0610株的致病性测定第20页
  2 结果第20-21页
   ·发病鸡的临床症状及流行病学第20页
   ·病毒鉴定结果第20-21页
     ·琼扩试验结果第20页
     ·鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定结果第20-21页
     ·致病性试验结果第21页
  3 讨论第21-23页
 试验二 IBDV Sdbz0610 VP2基因高变区的克隆与序列分析第23-41页
  1 材料第23-24页
   ·试剂第23页
   ·菌种第23页
   ·病毒第23页
   ·溶液配制第23-24页
     ·DEPC-H_2O第23页
     ·100mg/mL氨苄青霉素第23页
     ·LB培养液(基)第23页
     ·SOB培养基第23-24页
     ·SOC培养基第24页
  2 方法第24-30页
   ·野毒株原代毒核酸RNA的提取第24页
   ·VP2高变区的扩增第24-26页
     ·引物的设计与合成第24-25页
     ·RT-PCR第25页
     ·进一步PCR第25页
     ·PCR扩增鉴定第25-26页
   ·PCR产物的回收第26页
   ·VP2高变区的克隆与鉴定第26-28页
     ·PCR产物与pMD18-T vector的连接第26-27页
     ·感受态细胞的制备——氯化钙法第27-28页
     ·连接产物的转化第28页
   ·重组质粒的提取与鉴定第28-30页
     ·SDS碱裂解法小量提取质粒第28-29页
     ·重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定第29-30页
     ·重组质粒的双酶切鉴定第30页
   ·阳性质粒测序与序列分析第30页
  3 结果第30-39页
   ·RT-PCR结果第30-31页
   ·目的基因的克隆和测序第31-39页
     ·重组质粒的酶切鉴定第31页
     ·序列分析第31-39页
  4 讨论第39-41页
 试验三 疫苗B87对IBDV Sdbz-0610攻毒的免疫保护试验第41-43页
  1 材料和方法第41页
   ·材料第41页
     ·IBD疫苗第41页
     ·试验用鸡第41页
     ·攻毒毒株第41页
   ·方法第41页
     ·免疫第41页
     ·攻毒第41页
  2 结果第41-42页
  3 讨论第42-43页
六、结论第43-44页
七、参考文献第44-51页
八、致谢第51-52页
九、攻读学位期间发表论文情况第52页

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