一、中文摘要 | 第1-7页 |
二、英文摘要 | 第7-8页 |
三、缩略语英汉对照表 | 第8-9页 |
四、引言 | 第9-19页 |
1 概述 | 第9-10页 |
2 IBDV的病原学特性 | 第10-11页 |
·病毒学分类与结构特性 | 第10页 |
·理化特性 | 第10-11页 |
·生物学特性 | 第11页 |
3 分子生物学研究进展 | 第11-16页 |
·IBDV基因组结构 | 第11-13页 |
·VP2病毒蛋白及其功能 | 第13-14页 |
·病毒抗原变异的分子基础 | 第14-15页 |
·IBDV毒力变异的分子基础 | 第15-16页 |
4 IBD的诊断 | 第16页 |
5 IBD的防制 | 第16-19页 |
·防制措施 | 第16-17页 |
·免疫疫苗 | 第17-18页 |
·存在问题及防制前景 | 第18-19页 |
五、研究内容 | 第19-43页 |
试验一 IBDV野毒株的分离鉴定 | 第19-23页 |
1 材料和方法 | 第19-20页 |
·实验用鸡胚 | 第19页 |
·实验用鸡 | 第19页 |
·IBD的标准抗原和阳性血清 | 第19页 |
·病料 | 第19页 |
·病毒分离 | 第19页 |
·病料处理 | 第19页 |
·病毒纯化 | 第19页 |
·Sdbz-0610株的鉴定 | 第19-20页 |
·琼脂扩散试验 | 第19-20页 |
·鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定 | 第20页 |
·IBDV Sdbz-0610株的致病性测定 | 第20页 |
2 结果 | 第20-21页 |
·发病鸡的临床症状及流行病学 | 第20页 |
·病毒鉴定结果 | 第20-21页 |
·琼扩试验结果 | 第20页 |
·鸡胚半数致死量(ELD_(50))测定结果 | 第20-21页 |
·致病性试验结果 | 第21页 |
3 讨论 | 第21-23页 |
试验二 IBDV Sdbz0610 VP2基因高变区的克隆与序列分析 | 第23-41页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·试剂 | 第23页 |
·菌种 | 第23页 |
·病毒 | 第23页 |
·溶液配制 | 第23-24页 |
·DEPC-H_2O | 第23页 |
·100mg/mL氨苄青霉素 | 第23页 |
·LB培养液(基) | 第23页 |
·SOB培养基 | 第23-24页 |
·SOC培养基 | 第24页 |
2 方法 | 第24-30页 |
·野毒株原代毒核酸RNA的提取 | 第24页 |
·VP2高变区的扩增 | 第24-26页 |
·引物的设计与合成 | 第24-25页 |
·RT-PCR | 第25页 |
·进一步PCR | 第25页 |
·PCR扩增鉴定 | 第25-26页 |
·PCR产物的回收 | 第26页 |
·VP2高变区的克隆与鉴定 | 第26-28页 |
·PCR产物与pMD18-T vector的连接 | 第26-27页 |
·感受态细胞的制备——氯化钙法 | 第27-28页 |
·连接产物的转化 | 第28页 |
·重组质粒的提取与鉴定 | 第28-30页 |
·SDS碱裂解法小量提取质粒 | 第28-29页 |
·重组质粒的琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第29-30页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第30页 |
·阳性质粒测序与序列分析 | 第30页 |
3 结果 | 第30-39页 |
·RT-PCR结果 | 第30-31页 |
·目的基因的克隆和测序 | 第31-39页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第31页 |
·序列分析 | 第31-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
试验三 疫苗B87对IBDV Sdbz-0610攻毒的免疫保护试验 | 第41-43页 |
1 材料和方法 | 第41页 |
·材料 | 第41页 |
·IBD疫苗 | 第41页 |
·试验用鸡 | 第41页 |
·攻毒毒株 | 第41页 |
·方法 | 第41页 |
·免疫 | 第41页 |
·攻毒 | 第41页 |
2 结果 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
六、结论 | 第43-44页 |
七、参考文献 | 第44-51页 |
八、致谢 | 第51-52页 |
九、攻读学位期间发表论文情况 | 第52页 |