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白菜多聚半乳糖醛酸酶基因BcMF9的功能分析

缩写词(Abbreviation)第1-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-16页
前言第16-18页
1 文献综述第18-30页
   ·植物雄性不育与花粉发育第18-21页
     ·植物雄性不育分类第18-19页
     ·植物花粉发育过程第19-20页
     ·植物花粉发育分子机理研究第20-21页
   ·植物多聚半乳糖醛酸酶的研究第21-24页
     ·PG的作用方式和组织定位第21页
     ·PG基因家族的分类及序列的差异性第21-22页
     ·PG功能的多样性第22-24页
       ·PG与果实成熟第22-23页
       ·PG与器官脱落第23页
       ·PG与花粉发育第23-24页
       ·PG与病害发生第24页
       ·PG的其他功能第24页
   ·植物基因工程及其转化方法的选择第24-30页
     ·植物遗传转化方法第25-28页
       ·载体介导法第25-26页
       ·DNA直接导入法第26-28页
       ·种质系统法第28页
     ·转基因技术存在的问题第28-30页
2 多聚半乳糖醛酸酶基因BcMF9的序列分析第30-38页
   ·材料与方法第30-31页
     ·BcMF9基因核苷酸序列分析及其预测蛋白质特征分析第30页
     ·BcMF9与BcMF2和BcMF6的相似性比较第30页
     ·同源比较与系统树构建第30-31页
   ·结果与分析第31-36页
     ·BcMF9基因核苷酸序列及其预测蛋白质特征分析第31-33页
       ·BcMF9基因核苷酸特征分析第31页
       ·BcMF9基因编码蛋白的特征分析第31-32页
       ·BcMF9基因编码蛋白二级结构预测及疏水性分析第32-33页
     ·BcMF9与BcMF2和BcMF6的相似性比较第33页
     ·BcMF9与其他植物PG基因同源性比较及其系统树构建第33-36页
   ·讨论第36-38页
3 反义BcMF9基因植物表达载体的构建第38-48页
   ·材料与方法第38-42页
     ·菌株和质粒第38页
     ·反义BcMF9基因片段的获得第38-40页
     ·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建第40-41页
       ·双元载体pBI121的制备第40页
       ·反义BcMF9基因片段的制备第40页
       ·pBI35S-BcMF9A表达质粒的构建第40-41页
       ·pBI35S-BcMF9A质粒直接转化农杆菌第41页
     ·BcA9启动子组织特异型表达载体的构建第41-42页
       ·BcA9启动子的获得第41-42页
       ·双元载体pBI121制备第42页
       ·反义BcMF9基因片段的制备第42页
       ·pBIA9-BcMF9A表达质粒的构建过程第42页
       ·pBI35S-BcMF9A质粒直接转化农杆菌第42页
   ·结果与分析第42-46页
     ·反义BcMF9基因片段的获得第42-43页
     ·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建第43-45页
     ·BcA9启动子绒毡层组织特异型表达载体的构建第45-46页
   ·讨论第46-48页
4 BcMF9转基因植株的获得和检测第48-64页
   ·材料与方法第48-55页
     ·pBI35S-BcMF9A和pBIA9-BcMF9A转基因植株的获得第48-50页
       ·植物材料、菌株及抗生素第48页
       ·培养基第48-49页
       ·预培养第49页
       ·共培养第49-50页
       ·生根培养第50页
       ·练苗、移栽第50页
     ·转基因植株的分子检测和细胞学观察第50-55页
       ·植物材料第50页
       ·植物基因组DNA和总RNA的提取第50-52页
       ·转化植株的PCR检测第52页
       ·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测第52页
       ·Southern印迹杂交检测第52-54页
       ·Northern印迹杂交检测第54-55页
       ·花粉的离体萌发检测第55页
   ·结果与分析第55-61页
     ·pBI35S-BcMF9A和pBIA9-BcMF9A转基因植株的获得第55页
     ·植物基因组DNA提取第55-57页
     ·转化植株的PCR检测第57页
     ·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测第57-59页
     ·Southern印迹杂交检测第59页
     ·Northern印迹杂交检测第59-61页
     ·转基因植株花粉萌发检测第61页
   ·讨论第61-64页
5 结论第64-66页
参考文献第66-71页

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