缩写词(Abbreviation) | 第1-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
1 文献综述 | 第18-30页 |
·植物雄性不育与花粉发育 | 第18-21页 |
·植物雄性不育分类 | 第18-19页 |
·植物花粉发育过程 | 第19-20页 |
·植物花粉发育分子机理研究 | 第20-21页 |
·植物多聚半乳糖醛酸酶的研究 | 第21-24页 |
·PG的作用方式和组织定位 | 第21页 |
·PG基因家族的分类及序列的差异性 | 第21-22页 |
·PG功能的多样性 | 第22-24页 |
·PG与果实成熟 | 第22-23页 |
·PG与器官脱落 | 第23页 |
·PG与花粉发育 | 第23-24页 |
·PG与病害发生 | 第24页 |
·PG的其他功能 | 第24页 |
·植物基因工程及其转化方法的选择 | 第24-30页 |
·植物遗传转化方法 | 第25-28页 |
·载体介导法 | 第25-26页 |
·DNA直接导入法 | 第26-28页 |
·种质系统法 | 第28页 |
·转基因技术存在的问题 | 第28-30页 |
2 多聚半乳糖醛酸酶基因BcMF9的序列分析 | 第30-38页 |
·材料与方法 | 第30-31页 |
·BcMF9基因核苷酸序列分析及其预测蛋白质特征分析 | 第30页 |
·BcMF9与BcMF2和BcMF6的相似性比较 | 第30页 |
·同源比较与系统树构建 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-36页 |
·BcMF9基因核苷酸序列及其预测蛋白质特征分析 | 第31-33页 |
·BcMF9基因核苷酸特征分析 | 第31页 |
·BcMF9基因编码蛋白的特征分析 | 第31-32页 |
·BcMF9基因编码蛋白二级结构预测及疏水性分析 | 第32-33页 |
·BcMF9与BcMF2和BcMF6的相似性比较 | 第33页 |
·BcMF9与其他植物PG基因同源性比较及其系统树构建 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
3 反义BcMF9基因植物表达载体的构建 | 第38-48页 |
·材料与方法 | 第38-42页 |
·菌株和质粒 | 第38页 |
·反义BcMF9基因片段的获得 | 第38-40页 |
·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建 | 第40-41页 |
·双元载体pBI121的制备 | 第40页 |
·反义BcMF9基因片段的制备 | 第40页 |
·pBI35S-BcMF9A表达质粒的构建 | 第40-41页 |
·pBI35S-BcMF9A质粒直接转化农杆菌 | 第41页 |
·BcA9启动子组织特异型表达载体的构建 | 第41-42页 |
·BcA9启动子的获得 | 第41-42页 |
·双元载体pBI121制备 | 第42页 |
·反义BcMF9基因片段的制备 | 第42页 |
·pBIA9-BcMF9A表达质粒的构建过程 | 第42页 |
·pBI35S-BcMF9A质粒直接转化农杆菌 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·反义BcMF9基因片段的获得 | 第42-43页 |
·CaMV35S组成型启动子的表达载体构建 | 第43-45页 |
·BcA9启动子绒毡层组织特异型表达载体的构建 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
4 BcMF9转基因植株的获得和检测 | 第48-64页 |
·材料与方法 | 第48-55页 |
·pBI35S-BcMF9A和pBIA9-BcMF9A转基因植株的获得 | 第48-50页 |
·植物材料、菌株及抗生素 | 第48页 |
·培养基 | 第48-49页 |
·预培养 | 第49页 |
·共培养 | 第49-50页 |
·生根培养 | 第50页 |
·练苗、移栽 | 第50页 |
·转基因植株的分子检测和细胞学观察 | 第50-55页 |
·植物材料 | 第50页 |
·植物基因组DNA和总RNA的提取 | 第50-52页 |
·转化植株的PCR检测 | 第52页 |
·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第52页 |
·Southern印迹杂交检测 | 第52-54页 |
·Northern印迹杂交检测 | 第54-55页 |
·花粉的离体萌发检测 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-61页 |
·pBI35S-BcMF9A和pBIA9-BcMF9A转基因植株的获得 | 第55页 |
·植物基因组DNA提取 | 第55-57页 |
·转化植株的PCR检测 | 第57页 |
·转化植株的X-Gluc组织化学染色检测 | 第57-59页 |
·Southern印迹杂交检测 | 第59页 |
·Northern印迹杂交检测 | 第59-61页 |
·转基因植株花粉萌发检测 | 第61页 |
·讨论 | 第61-64页 |
5 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |