| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| ·水产饲用油脂发展及遇难到的问题 | 第15-16页 |
| ·水产饲料油脂作用 | 第15页 |
| ·油脂原料发展趋势 | 第15页 |
| ·劣质油脂对水产动物的影响 | 第15-16页 |
| ·脂肪酶在水产中潜在应用价值 | 第16页 |
| ·脂肪酶作用机理 | 第16-17页 |
| ·脂肪酶催化反应类型 | 第16页 |
| ·脂肪酶的催化机理 | 第16-17页 |
| ·微生物脂肪酶的研究进展 | 第17-22页 |
| ·微生物脂肪酶分类 | 第17-20页 |
| ·脂肪酶的性质 | 第20-22页 |
| ·低温脂肪酶研究进展 | 第22-24页 |
| ·低温脂肪酶产生菌来源 | 第22-23页 |
| ·低温脂肪酶结构特征 | 第23-24页 |
| ·低温脂肪酶研究意义 | 第24页 |
| ·嗜热脂肪酶研究进展 | 第24-25页 |
| ·地细菌菌属 | 第24-25页 |
| ·Gebacillus 菌属的生态分布 | 第25页 |
| ·Gebacillus 来源脂肪酶基因的克隆和表达 | 第25页 |
| ·本研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 产脂肪酶菌株的筛选 | 第26-34页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·引物合成及基因测序 | 第26页 |
| ·仪器与试剂 | 第26页 |
| ·溶液 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-30页 |
| ·产脂肪酶菌株初筛 | 第27页 |
| ·产脂肪酶菌株复筛 | 第27-28页 |
| ·产脂肪酶菌株酶活初测 | 第28-29页 |
| ·菌株的鉴定 | 第29-30页 |
| ·实验结果 | 第30-32页 |
| ·产脂肪酶菌株的筛选 | 第30-31页 |
| ·脂肪酶产生菌酶活初测 | 第31-32页 |
| ·菌株 16S r DNA 鉴定 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第三章 脂肪酶基因的克隆 | 第34-45页 |
| ·实验材料 | 第34页 |
| ·引物合成及基因测序 | 第34页 |
| ·引物合成及基因测序 | 第34页 |
| ·仪器与试剂 | 第34页 |
| ·溶液 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·常用溶液 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-39页 |
| ·细菌基因组 DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·脂肪菌基因同源克隆简并引物的设计 | 第35页 |
| ·脂肪酶相关基因部分序列的克隆 | 第35页 |
| ·脂肪酶相关基因全长序列的获得 | 第35-38页 |
| ·脂肪酶基因序列的拼接及分析 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·不动杆菌 G1 脂肪酶保守区确定 | 第39页 |
| ·脂肪酶部分序列获取简并引物 | 第39-40页 |
| ·部分序列获得及全基因获得 | 第40页 |
| ·脂肪酶序列分析 | 第40-43页 |
| ·讨论 | 第43页 |
| ·本章小结 | 第43-45页 |
| 第四章 重组脂肪酶 G1 的表达、纯化及酶学性质分析 | 第45-60页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·菌株与质料 | 第45页 |
| ·引物合成 | 第45页 |
| ·试剂盒、工具酶酶和生化试剂 | 第45页 |
| ·溶液 | 第45页 |
| ·培养基 | 第45页 |
| ·实验仪器 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-50页 |
| ·原核表达载体 pET-28a(+)-G1 的构建 | 第46-48页 |
| ·重组酶 G1 的分离纯化 | 第48-49页 |
| ·重组酶 G1 的性质测定 | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-58页 |
| ·重组表达载体 pET-28a-G1 的构建 | 第50-51页 |
| ·重组脂肪酶 G1 的诱导表达及检测 | 第51-52页 |
| ·G1 脂肪酶的表达与纯化 | 第52-53页 |
| ·重组脂肪酶 G1 酶学性质 | 第53-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 重组脂肪酶 B2 的表达、纯化及酶学性质分析 | 第60-71页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·菌株与质料 | 第60页 |
| ·引物合成 | 第60页 |
| ·试剂盒、工具酶酶和生化试剂 | 第60页 |
| ·溶液 | 第60页 |
| ·培养基 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·原核表达载体 pET-28a(+)-B2 的构建 | 第60-61页 |
| ·脂肪酶 B2 的表达及检测 | 第61-62页 |
| ·重组酶 G1 的分离纯化 | 第62页 |
| ·重组酶 B2 的性质测定 | 第62页 |
| ·实验结果 | 第62-69页 |
| ·重组表达载体 pET-28a-B2 的构建 | 第62-63页 |
| ·重组脂肪酶 B2 的诱导表达及检测 | 第63-64页 |
| ·B2 脂肪酶的表达与纯化 | 第64页 |
| ·重组脂肪酶 B2 酶学性质 | 第64-69页 |
| ·讨论 | 第69-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 第六章 全文结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简历 | 第78-80页 |
