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渗透胁迫下白花柽柳抑制性消减文库的构建及表达序列标签(EST)分析

1 第一章综述第1-21页
   ·引言第7页
   ·柽柳研究进展第7-10页
     ·柽柳分类和花粉形态学研究进展第8页
     ·柽柳生态学研究进展第8-9页
     ·柽柳生理学研究进展第9-10页
   ·抗渗透胁迫的分子机制及研究进展第10-18页
     ·渗透胁迫下第一大类基因功能第12页
     ·第一大类基因功能研究进展第12-14页
     ·渗透胁迫下第二大类基因功能第14-16页
     ·第二大类基因功能研究进展第16-17页
     ·存在的问题与解决方法第17-18页
   ·抑制性消减杂交第18-20页
     ·SSH 技术的优缺点第18-19页
     ·抑制性消减杂交技术的应用第19-20页
   ·本项研究的目的和意义第20页
   ·技术路线第20-21页
2 第二章材料和方法第21-32页
   ·实验材料第21-22页
     ·材料第21页
     ·酶及化学试剂第21页
     ·引物第21-22页
     ·细菌培养基配方第22页
     ·主要仪器设备第22页
   ·实验方法第22-30页
     ·SDS 法提取柽柳总RNA第22页
     ·柽柳mRNA 的分离第22-23页
     ·SSH 文库的构建第23页
     ·cDNA 第一链合成第23-24页
     ·cDNA 第二链合成及纯化处理第24页
     ·cDNA 的RsaⅠ酶切及纯化第24-25页
     ·加接头第25-26页
     ·第一次杂交第26页
     ·第二次杂交第26-27页
     ·PCR 扩增第27-28页
     ·PCR 扩增产物的纯化第28页
     ·连接载体第28-29页
     ·转化第29页
     ·插入片段长度的PCR 检测第29-30页
   ·测序反应第30-32页
     ·挑取单菌落摇菌第30页
     ·菌种保存第30页
     ·质粒提取第30-31页
     ·电泳检测第31页
     ·测序PCR 反应第31-32页
     ·文库克隆的测序第32页
3 第三章结果分析第32-42页
   ·检测电泳图第32-37页
     ·总RNA 质量检测第32-33页
     ·mRNA 质量检测第33页
     ·cDNA 检测第33页
     ·RsaⅠ酶切检测第33-34页
     ·加接头检测第34页
     ·SSH 文库消减效率检测第34-35页
     ·胶回收检测第35页
     ·SSH 文库的质量分析第35-36页
     ·DNA 序列测定第36-37页
   ·序列结果分析第37-42页
     ·EST 数据库的基本信息第37页
     ·网上序列比对及EST 序列同源性比较分析第37-38页
     ·渗透胁迫相关基因分析第38-42页
4 第四章结论第42-43页
5 参考文献第43-46页
6 致谢第46-47页
7 附录第47-52页
8 作者简介第52页

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