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酶法水解牡蛎制备血管紧张素转换酶抑制肽的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-20页
   ·立题背景及意义第10-11页
   ·血管紧张素转换酶及其抑制剂作用机制第11-13页
     ·ACE 对血压的调节作用第11-12页
     ·ACE 抑制剂作用机制第12-13页
   ·食源性ACE 抑制肽第13-14页
     ·食源性ACEIP 的优点第13-14页
     ·食源性ACEIP 的构效关系第14页
   ·酶法制备ACEIP第14-18页
     ·原料的选择第14-15页
     ·蛋白酶的选择第15-16页
     ·ACEIP 对ACE 抑制活性的评价第16-18页
   ·ACEIP 的分离纯化第18-19页
     ·分离纯化方法第18页
     ·分离过程中存在的几个问题第18-19页
   ·ACE 抑制肽的应用前景第19页
   ·本论文研究内容第19-20页
2 材料与方法第20-29页
   ·试验材料与仪器设备第20-21页
     ·试验材料第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器设备第20-21页
   ·HPLC 快速检测ACE 抑制活性方法的建立第21-22页
     ·ACE 粗酶的制备第21页
     ·ACE 抑制活性的测定第21页
     ·流动相的选择和色谱检测条件的确定第21页
     ·线性范围与最低检出限的确定第21-22页
     ·HPLC 法检测ACE 活性的精密度、重现性、稳定性和回收率的测定第22页
     ·HPLC 法测定ACE 抑制活性的实际验证第22页
   ·酶法制备牡蛎ACE 抑制肽条件的优化第22-25页
     ·蛋白酶酶活力的测定第22-23页
     ·水解度(DH)的测定第23-24页
     ·反应时间对ACE 酶促反应的影响第24页
     ·底物HGG 浓度对ACE 酶促反应的影响第24页
     ·ACE 浓度对ACE 酶促反应的影响第24页
     ·牡蛎蛋白酶解工艺第24页
     ·胃蛋白酶酶解液抑制剂类型的测定第24-25页
   ·ACE 抑制肽分离纯化第25-29页
     ·Sephadex G-75 凝胶过滤层析第25页
     ·Sephadex G-25 凝胶过滤层析第25-26页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第26-27页
     ·苯酚-硫酸法测定样品中的总糖第27页
     ·反相高效液相色谱C18 制备柱分离第27页
     ·牡蛎蛋白熔点测定第27页
     ·MALDI-TOF-MS 测定分子量第27-29页
3 结果与分析第29-44页
   ·HPLC 快速检测ACE 抑制活性方法的建立第29-32页
     ·流动相的选择第29页
     ·线性范围与最低检出限第29-30页
     ·精密度实验第30页
     ·重现性实验第30-31页
     ·稳定性实验第31页
     ·回收率实验第31页
     ·不同样品ACE 抑制活性的测定第31-32页
   ·酶法制备牡蛎ACE 抑制肽条件的优化第32-36页
     ·酶解时间对ACE 酶促反应的影响第32页
     ·底物HGG 的浓度对ACE 酶促反应的影响第32-33页
     ·ACE 的浓度对ACE 酶促反应的影响第33-34页
     ·不同蛋白酶对牡蛎蛋白的水解第34页
     ·不同蛋白酶水解产物的ACE 抑制活性的测定第34-35页
     ·胃蛋白酶酶解液抑制剂类型的测定第35-36页
   ·牡蛎ACE 抑制肽的分离纯化第36-44页
     ·凝胶过滤层析第36-38页
     ·SDS-PAGE 和苯酚-硫酸法测糖第38-39页
     ·流动相的选择第39页
     ·检测波长的选择第39-40页
     ·DSC 测定熔点第40-42页
     ·MALDI-TOF-MS 测定分子量第42-44页
4 讨论第44-48页
   ·关于ACE 抑制活性的测定方法的研究第44页
   ·关于酶法制备牡蛎ACE 抑制肽条件的优化的研究第44-46页
     ·制取ACE 抑制肽中酶制剂的选择第45页
     ·水解度与ACE 抑制活性的关系第45-46页
   ·关于ACE 抑制肽分离纯化的研究第46-48页
     ·凝胶过滤层析第46-47页
     ·SDS-PAGE第47页
     ·RP-HPLC第47-48页
5 结论第48-49页
6 参考文献第49-54页
在研期间发表的学术论文第54-55页
作者简历第55-56页
致谢第56-57页

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