大果西番莲(P.quadrangularis L.)的再生体系及转基因的研究
摘要 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第6-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
引言 | 第8-29页 |
1. 西番莲的生物学特性及开发利用 | 第8-13页 |
1.1 生物学特性 | 第8-10页 |
1.2 应用价值及发展前景 | 第10-11页 |
1.3 西番莲产业发展需要解决的问题 | 第11-13页 |
2. 基因工程育种研究现状 | 第13-21页 |
2.1 植物抗病基因工程 | 第14-18页 |
2.1.1 植物抗病毒基因工程 | 第14-16页 |
2.1.2 植物抗真菌和抗细菌基因工程 | 第16-18页 |
2.2 其它抗性育种 | 第18-20页 |
2.2.1 抗逆境胁迫基因工程 | 第18-19页 |
2.2.2 改良作物品质基因工程 | 第19-20页 |
2.3 分子农业与药用蛋白的表达 | 第20-21页 |
3. 植物的组织培养、植株的再生及转基因方法 | 第21-27页 |
3.1 植物的组织培养及植株的再生 | 第21-22页 |
3.2 植物转基因方法 | 第22-26页 |
3.2.1 载体转化系统 | 第22-24页 |
3.2.2 DNA直接导入法 | 第24-26页 |
3.3 西番莲的组织培养 | 第26-27页 |
4. 本论文研究的目的、意义及技术路线 | 第27-29页 |
材料与方法 | 第29-42页 |
1. 材料与试剂 | 第29页 |
1.1 植物材料 | 第29页 |
1.2 菌种和质粒 | 第29页 |
1.3 试剂 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-42页 |
2.1 大果西番莲遗传转化体系的建立 | 第29-30页 |
2.1.1 种子的发芽及无菌苗的获得 | 第29页 |
2.1.2 不定芽诱导培养基的筛选 | 第29-30页 |
2.1.3 生根培养基的筛选 | 第30页 |
2.2 抗生素浓度梯度筛选 | 第30页 |
2.3 植物表达载体pBICr的构建 | 第30-36页 |
2.3.1 引物的设计 | 第30页 |
2.3.2 PCR扩增反应 | 第30-31页 |
2.3.3 PCR产物的回收 | 第31-32页 |
2.3.4 克隆载体的构建及测序 | 第32-34页 |
2.3.5 表达载体pBICr的构建 | 第34-36页 |
2.4 pBICr导入农杆菌LBA4404 | 第36-39页 |
2.4.1 三亲交配法转化 | 第36-37页 |
2.4.2 DNA直接导入农杆菌 | 第37-38页 |
2.4.3 转化结果的检测 | 第38-39页 |
2.5 大果西番莲的转化 | 第39-42页 |
2.5.1 外植体的预培养 | 第39页 |
2.5.2 工程菌的制备 | 第39-40页 |
2.5.3 转化大果西番莲 | 第40页 |
2.5.4 转基因植株的初步检测 | 第40-42页 |
结果与分析 | 第42-49页 |
1. 大果西番莲遗传转化体系的建立 | 第42-47页 |
1.1 种子消毒的浓度与时间 | 第42-43页 |
1.2 不定芽诱导培养基的筛选 | 第43-45页 |
1.3 生根培养基的筛选 | 第45-47页 |
2. 抗生素浓度梯度筛选 | 第47-48页 |
3. 植物表达载体pBICr的构建 | 第48页 |
4. pBICr导入农杆菌LBA4404 | 第48页 |
5. 大果西番莲的转化及初步检测 | 第48-49页 |
结论 | 第49-50页 |
讨论 | 第50-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
图版 | 第61-70页 |
附录 | 第70-74页 |
致谢 | 第74页 |