| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 论文 | 第9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一部分：红细胞膜钙镁ATP酶的分离、纯化和重建 | 第11-47页 |
| ·钙调素的分离纯化及生物活性鉴定 | 第11-18页 |
| ·材料与方法 | 第12-14页 |
| ·结果 | 第14-17页 |
| ·讨论 | 第17-18页 |
| ·Sepharose-CaM亲和层析柱的制备、检测及再生 | 第18-22页 |
| ·材料与方法 | 第18-20页 |
| ·结果 | 第20-21页 |
| ·讨论 | 第21-22页 |
| ·红细胞膜钙镁ATP酶的分离、纯化及水解活性鉴定 | 第22-43页 |
| ·材料与方法 | 第23-31页 |
| ·主要仪器及设备 | 第23页 |
| ·试剂及配制 | 第23-26页 |
| ·操作方法 | 第26-31页 |
| ·无钙调素的红细胞膜的制备方法 | 第26-27页 |
| ·溶膜方法 | 第27页 |
| ·亲和层析柱的准备 | 第27页 |
| ·亲和层析及洗脱收集方法 | 第27-28页 |
| ·蛋白浓度的测定方法 | 第28-29页 |
| ·钙镁ATP酶活性的测定方法 | 第29-30页 |
| ·SDS PAGE电泳方法 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-43页 |
| ·分离纯化条件的摸索及影响因素的分析 | 第31-39页 |
| ·蛋白测定条件的摸索及其改进 | 第31-32页 |
| ·钙泵活性的测定条件及其改进 | 第32-34页 |
| ·活性测定的原则和策略 | 第32页 |
| ·反应体系的简化 | 第32-34页 |
| ·采用简易的评价和判断指标 | 第34页 |
| ·对洗膜效果的检测和评价 | 第34-35页 |
| ·对内源性钙调素的检测和评价 | 第34-35页 |
| ·对外源性EDTA的检测和评价 | 第35页 |
| ·对制备液中钙离子浓度的检测和评价 | 第35页 |
| ·对反应体系的进一步优化 | 第35-37页 |
| ·酶促反应时间与产物量的关系的确定 | 第36页 |
| ·酶加入量的选择和确定 | 第36-37页 |
| ·酶的存放时间与温度对酶活性的影响 | 第37页 |
| ·纯化过程中各步骤酶活性的变化 | 第37-39页 |
| ·纯化结果的分析与鉴定 | 第39-43页 |
| ·纯化过程的分析 | 第39页 |
| ·酶活性的鉴定和分析 | 第39-40页 |
| ·分子量及纯度的鉴定和分析 | 第40-43页 |
| ·小结 | 第43页 |
| ·红细胞膜钙镁ATP酶的磷脂重建和转运活性鉴定 | 第43-46页 |
| ·材料与方法 | 第43-44页 |
| ·仪器及设备 | 第43-44页 |
| ·试剂及配制 | 第44页 |
| ·操作方法 | 第44页 |
| ·疏水亲和层析方法 | 第44页 |
| ·钙泵活性的酶联反应测定法 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-46页 |
| ·第一部分小结 | 第46-47页 |
| 第二部分：高血压状态下红细胞膜钙镁ATP酶的功能变化和机制研究 | 第47-86页 |
| ·离体膜状态下SHR钙镁ATP酶功能变化的研究 | 第48-68页 |
| ·材料与方法 | 第48-50页 |
| ·设备及仪器 | 第48页 |
| ·主要材料及试剂 | 第48页 |
| ·实验动物 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-50页 |
| ·RHR模型制备方法 | 第49页 |
| ·大鼠血压的测定方法 | 第49页 |
| ·膜状态下基础活性的研究方法 | 第49页 |
| ·血浆对质膜钙泵调节作用的研究方法 | 第49页 |
| ·溶血物对质膜钙泵调节的研究方法 | 第49页 |
| ·模拟在体环境下研究钙泵活性的方法 | 第49页 |
| ·研究钙离子浓度与酶活性的关系的方法 | 第49-50页 |
| ·激动剂和抑制剂对钙泵活性调节的研究方法 | 第50页 |
| ·膜上钙泵丰度的研究方法 | 第50页 |
| ·统计方法 | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-66页 |
| ·膜状态下基础活性的研究 | 第50-51页 |
| ·血浆物质(胞外综合因素)对钙泵的调节 | 第51-53页 |
| ·红细胞溶血物(胞内综合因素)对钙泵调节 | 第53-56页 |
| ·血浆及溶血物的共同调节作用(模拟在体条件) | 第56-57页 |
| ·SHR钙泵对Ca~(2+)浓度的反应(敏感性) | 第57-58页 |
| ·SHR钙泵对特异性激动剂(CaM)的反应 | 第58-59页 |
| ·SHR钙泵对特异性抑制剂(钒酸盐VO_4~-)的反应 | 第59-65页 |
| ·SHR钙泵在膜上的丰度(密度)比较 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| ·纯化后SHR钙镁ATP酶功能变化的研究 | 第68-80页 |
| ·材料与方法 | 第68页 |
| ·SHR红细胞膜钙泵的分离纯化方法 | 第68页 |
| ·酶促反应体系的调整 | 第68页 |
| ·对纯化的SHR钙泵功能进行研究的方法 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-78页 |
| ·纯化结果与讨论 | 第68-70页 |
| ·纯化过程分析 | 第68-69页 |
| ·酶活性、分子量及纯度的鉴定和分析 | 第69-70页 |
| ·功能研究的结果与讨论 | 第70-78页 |
| ·纯化后SHR钙泵基础活性的研究 | 第70-71页 |
| ·血浆对纯化后SHR钙泵影响 | 第71-73页 |
| ·红细胞溶血物对纯化后SHR钙泵影响 | 第73页 |
| ·血浆及溶血物对纯化后SHR钙泵的共同作用 | 第73页 |
| ·纯化后SHR钙泵对Ca~(2+)浓度的反应(敏感性) | 第73-77页 |
| ·纯化后SHR钙泵对激动剂(CaM)的反应 | 第77-78页 |
| ·纯化后SHR钙泵对抑制剂(钒酸盐VO_4~-)的反应 | 第78页 |
| ·小结 | 第78-80页 |
| ·重建后SHR钙镁ATP酶的功能研究 | 第80-82页 |
| ·材料与方法 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-82页 |
| ·SHR血管平滑肌细胞质膜钙镁ATP酶基因表达活性的研究 | 第82-85页 |
| ·材料与方法 | 第82-84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-85页 |
| ·第二部分小结 | 第85-86页 |
| 总结与讨论 | 第86-89页 |
| 文献综述 | 第89-102页 |
| 参考文献 | 第102-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 专业词表 | 第114-115页 |
