摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1. 前言 | 第8-13页 |
·猪肺炎支原体病原学 | 第8页 |
·猪肺炎支原体的致病性 | 第8-9页 |
·Mhp的膜蛋白研究 | 第9-12页 |
·猪肺炎支原体P46的研究背景 | 第12-13页 |
·研究目的 | 第13页 |
2. 试验材料 | 第13-15页 |
·菌株、质粒和细胞 | 第13-14页 |
·主要试剂及仪器 | 第14-15页 |
·试剂、培养基及溶液 | 第14页 |
·仪器 | 第14-15页 |
·主要生物信息数据库和计算机软件 | 第15页 |
3. 试验方法 | 第15-20页 |
·猪肺炎支原体的培养 | 第15页 |
·PCR | 第15-17页 |
·引物设计 | 第15-16页 |
·PCR模板的制备 | 第16页 |
·PCR反应 | 第16-17页 |
·PCR扩增产物的电泳检查 | 第17页 |
·PCR产物回收纯化(按照试剂盒使用说明操作) | 第17页 |
·P46基因的定点突变 | 第17-19页 |
·T载体的克隆 | 第18页 |
·P46基因的定点突变 | 第18-19页 |
·P46基因的原核表达 | 第19-20页 |
·原核表达 | 第19-20页 |
·SDS-PAGE和WESTERN-BLOTTING | 第20页 |
4. 结果与分析 | 第20-30页 |
·P46基因的PCR扩增 | 第20页 |
·序列测定及同源性比对 | 第20-23页 |
·定点突变 | 第23-29页 |
·T载体克隆 | 第23-24页 |
·克隆P46基因的序列测定及推导氨基酸序列 | 第24-25页 |
·定点突变结果 | 第25-27页 |
·亚克隆实验结果 | 第27-29页 |
·SDS-PAGE和Western-blotting实验 | 第29-30页 |
5. 实验结果分析讨论 | 第30-33页 |
·猪肺炎支原体MY-99株P46基因的PCR扩增及序列分析 | 第30-31页 |
·定点突变结果分析 | 第31页 |
·P46的原核表达 | 第31-33页 |
6. 结论 | 第33-34页 |
主要参考文献 | 第34-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
附录 | 第39-49页 |