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猪肺炎支原体MY-99株P46基因的克隆测序及原核表达

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1. 前言第8-13页
   ·猪肺炎支原体病原学第8页
   ·猪肺炎支原体的致病性第8-9页
   ·Mhp的膜蛋白研究第9-12页
   ·猪肺炎支原体P46的研究背景第12-13页
   ·研究目的第13页
2. 试验材料第13-15页
   ·菌株、质粒和细胞第13-14页
   ·主要试剂及仪器第14-15页
     ·试剂、培养基及溶液第14页
     ·仪器第14-15页
   ·主要生物信息数据库和计算机软件第15页
3. 试验方法第15-20页
   ·猪肺炎支原体的培养第15页
   ·PCR第15-17页
     ·引物设计第15-16页
     ·PCR模板的制备第16页
     ·PCR反应第16-17页
     ·PCR扩增产物的电泳检查第17页
     ·PCR产物回收纯化(按照试剂盒使用说明操作)第17页
   ·P46基因的定点突变第17-19页
     ·T载体的克隆第18页
     ·P46基因的定点突变第18-19页
   ·P46基因的原核表达第19-20页
     ·原核表达第19-20页
     ·SDS-PAGE和WESTERN-BLOTTING第20页
4. 结果与分析第20-30页
   ·P46基因的PCR扩增第20页
   ·序列测定及同源性比对第20-23页
   ·定点突变第23-29页
     ·T载体克隆第23-24页
     ·克隆P46基因的序列测定及推导氨基酸序列第24-25页
     ·定点突变结果第25-27页
     ·亚克隆实验结果第27-29页
   ·SDS-PAGE和Western-blotting实验第29-30页
5. 实验结果分析讨论第30-33页
   ·猪肺炎支原体MY-99株P46基因的PCR扩增及序列分析第30-31页
   ·定点突变结果分析第31页
   ·P46的原核表达第31-33页
6. 结论第33-34页
主要参考文献第34-38页
致谢第38-39页
附录第39-49页

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