| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 IL-4结构特点 | 第9-10页 |
| 2 IL-4受体(IL-4R) | 第10-11页 |
| 3 IL-4激活的信号转导途径 | 第11页 |
| 4 IL-4的生物学功能 | 第11-13页 |
| 5 IL-4有关疾病的研究及应用 | 第13-16页 |
| ·哮喘 | 第13-14页 |
| ·与过敏性疾病 | 第14页 |
| ·自身免疫性疾病 | 第14-15页 |
| ·治疗肿瘤 | 第15页 |
| ·基因工程 | 第15-16页 |
| 6 实验目的和意义 | 第16-17页 |
| 论文试验 | 第17-36页 |
| 1 材料 | 第17-19页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·溶液配制 | 第17-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-28页 |
| ·长毛兔IL-4基因的克隆与序列分析 | 第19-24页 |
| ·长毛兔外周淋巴细胞的分离培养 | 第19-20页 |
| ·淋巴细胞总RNA提取 | 第20页 |
| ·PCR引物的设计 | 第20页 |
| ·长毛兔IL-4基因的RT-PCR扩增 | 第20-21页 |
| ·长毛兔白细胞介素-4基因的克隆 | 第21-22页 |
| ·重组质粒的提取和鉴定 | 第22-24页 |
| ·生物信息学分析 | 第24页 |
| ·克隆序列的GenBank登录 | 第24页 |
| ·长毛兔IL-4基因的真核表达 | 第24-28页 |
| ·pCDNA3.1(+)/IL-4真核表达载体的构建 | 第24-26页 |
| ·pCDNA3.1(+)/IL-4转染 | 第26页 |
| ·RT-PCR检测COS 7细胞中IL-4基因的转录水平的表达。 | 第26-27页 |
| ·IL-4活性检测 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-34页 |
| ·长毛兔IL-4基因的克隆 | 第28-30页 |
| ·总RNA提取 | 第28页 |
| ·长毛兔IL-4基因的RT-PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·重组PMDl8-T/IL-4质粒的菌落PCR | 第29页 |
| ·重组PMDl8-T/IL-4质粒的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的测序鉴定 | 第30页 |
| ·长毛兔IL-4基因生物信息学分析 | 第30-31页 |
| ·长毛兔IL-4基因的序列分析 | 第30-31页 |
| ·同源性分析 | 第31页 |
| ·多序列比对和进化树的构建 | 第31页 |
| ·重组真核表达质粒pCDNA3.1/IL-4的构建和鉴定 | 第31-33页 |
| ·重组真核表达质粒pCDNA3.1/IL-4的菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组真核表达质粒pCDNA3.1(+)/IL-4的双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组真核表达质粒pCDNA3.1(+)/IL-4的测序鉴定 | 第33页 |
| ·转染细胞的RT-PCR检测 | 第33页 |
| ·重组长毛兔IL-4的生物学活性检测结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42页 |
