| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·研究的目的与意义 | 第11-12页 |
| ·环丙烷脂肪酸发现自然分布 | 第12-13页 |
| ·环丙烷脂肪酸的发现 | 第12-13页 |
| ·环丙烷脂肪酸在细菌中的分布 | 第13页 |
| ·环丙烷脂肪酸在真核生物中的分布 | 第13页 |
| ·环丙烷脂肪酸生物合成途径 | 第13-17页 |
| ·前体 | 第13-14页 |
| ·C1(甲基)供体 | 第14页 |
| ·C1受体 | 第14-15页 |
| ·反应机制 | 第15-17页 |
| ·环丙烷脂肪酸生理学功能 | 第17-18页 |
| ·环丙烷脂肪酸对膜流动性的影响 | 第17页 |
| ·环丙烷脂肪酸对化学稳定性的影响 | 第17-18页 |
| ·课题的研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·材料与设备 | 第19-24页 |
| ·菌株和质粒 | 第19-20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21-22页 |
| ·缓冲液与储备液 | 第22-23页 |
| ·试验仪器 | 第23-24页 |
| ·方法 | 第24-33页 |
| ·脂肪酸甲酯化方法的确定 | 第24-25页 |
| ·乳酸乳球菌MG1363脂肪酸气相色谱分析 | 第25页 |
| ·乳酸乳球菌基因组DNA的制备 | 第25-26页 |
| ·环丙烷脂肪酸合酶基因(cfa)的引物设计和PCR扩增 | 第26-28页 |
| ·cfa基因的克隆质粒的构建 | 第28-30页 |
| ·重组表达载体pGEX-6P-cfa的构建 | 第30-31页 |
| ·重组菌株的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·重组菌株环丙烷脂肪酸气相色谱分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-44页 |
| ·脂肪酸甲酯化方法效果的比较 | 第33-34页 |
| ·乳酸乳球菌MG1363脂肪酸气相色谱分析 | 第34-36页 |
| ·乳酸乳球菌cfa基因的克隆 | 第36-40页 |
| ·乳酸乳球菌MG1363基因组DNA提取 | 第36-37页 |
| ·乳酸乳球菌cfa基因的PCR扩增 | 第37-38页 |
| ·重组克隆菌株的筛选 | 第38-40页 |
| ·重组表达菌株的鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组表达质粒PCR鉴定 | 第40页 |
| ·重组表达质粒的双酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·cfa基因在大肠杆菌中的表达 | 第41-42页 |
| ·重组菌株脂肪酸气相色谱分析 | 第42-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| ·气相色谱样品甲酯化方法的确定 | 第44页 |
| ·出发菌株的选择 | 第44页 |
| ·克隆载体的选择 | 第44-45页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第45页 |
| ·表达量 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录：CFA基因测序结果 | 第52-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |