摘要 | 第1-14页 |
ABSTRACT | 第14-16页 |
1 引言 | 第16-26页 |
·AVM 的概况与毒性作用 | 第16-17页 |
·AVM 与神经细胞凋亡 | 第17-18页 |
·细胞凋亡的形态学与生物化学特征的改变 | 第18页 |
·细胞凋亡的线粒体调控机制的研究进展 | 第18-19页 |
·细胞凋亡的内质网调控机制的研究进展 | 第19-24页 |
·细胞凋亡途径中线粒体与内质网途径的关系 | 第21页 |
·Caspase-12 的活化与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第21-22页 |
·GRP78 与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第22页 |
·GADD153 与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第22-23页 |
·Bcl-2 家族成员与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第23-24页 |
·钙离子与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第24页 |
·细胞凋亡的死亡受体调控机制的研究进展 | 第24-25页 |
·氧化应激与内质网应激介导的细胞凋亡 | 第25页 |
·试验的目的与意义 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-34页 |
·主要仪器与材料 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26-27页 |
·试验材料 | 第27页 |
·王鸽脑神经细胞原代分离培养、纯化及处理 | 第27-28页 |
·神经细胞原代分离培养、纯化 | 第27页 |
·神经细胞的鉴定 | 第27-28页 |
·分离纯化的神经细胞的处理 | 第28页 |
·染AVM 细胞内质网超微结构的观察 | 第28页 |
·AVM 致神经细胞凋亡的检测 | 第28-29页 |
·MTT 法检测细胞活性 | 第28-29页 |
·AVM 对神经细胞凋亡指数的检测 | 第29页 |
·染AVM 细胞氧化还原指标的检测 | 第29-30页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的检测 | 第29页 |
·细胞内活性氧(ROS)水平的检测 | 第29页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性的检测 | 第29-30页 |
·半定量 RT-PCR 测定神经细胞 Bcl-2、GADD153、GRP78 和 Cyt-c mRNA 的表达 | 第30-31页 |
·引物的设计与合成 | 第30页 |
·神经细胞总RNA 的提取 | 第30页 |
·反转录反应 | 第30-31页 |
·基因的PCR 扩增及最佳PCR 反应条件的摸索及序列测定与分析 | 第31页 |
·PCR 产物的分析 | 第31页 |
·荧光定量 PCR 检测 Caspase-12mRNA 表达水平 | 第31-33页 |
·引物的设计与合成 | 第31-32页 |
·Real Time PCR 反应体系的优化 | 第32页 |
·标准曲线的构建及特异性检测 | 第32页 |
·Real Time PCR 检测 | 第32-33页 |
·试验数据分析与统计 | 第33-34页 |
3 试验结果分析 | 第34-63页 |
·培养不同时期的神经细胞的形态学观察结果 | 第34-35页 |
·神经细胞的鉴定结果 | 第35页 |
·神经细胞内质网结构的观察 | 第35-36页 |
·神经细胞凋亡的检测 | 第36-41页 |
·MTT 法检测细胞活性检测结果 | 第36-37页 |
·AVM 对神经细胞凋亡指数的影响结果 | 第37-41页 |
·染AVM 细胞氧化还原指标的检测结果 | 第41-45页 |
·谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的检测结果 | 第41-42页 |
·细胞内活性氧(ROS)水平的检测结果 | 第42-43页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性的检测结果 | 第43-45页 |
·半定量 RT-PCR 测定神经细胞 Bcl-2、GRP78、GADD153 和 Cyt-c mRNA 的表达 | 第45-56页 |
·神经细胞总RNA 的提取结果 | 第45页 |
·基因的 PCR 扩增及最佳 PCR 反应条件的摸索结果 | 第45-46页 |
·PCR 产物的分析 | 第46-56页 |
·荧光定量 PCR 检测 Caspase-12RNA 表达水平 | 第56-63页 |
4 讨论 | 第63-71页 |
·关于王鸽神经细胞分离、纯化培养技术的改进 | 第63-64页 |
·关于AVM 致细胞凋亡的检测结果 | 第64-66页 |
·神经细胞凋亡的形态学观察 | 第64-65页 |
·四唑盐比色法(MTT 法)检测细胞存活率 | 第65页 |
·原位末端标记法(TUNEL 法)检测细胞凋亡 | 第65-66页 |
·AVM 对神经细胞的内质网形态学影响 | 第66页 |
·氧化应激对AVM 致神经细胞凋亡的影响 | 第66-67页 |
·AVM 对神经细胞 GRP78mRNA 表达的影响 | 第67-68页 |
·AVM 对神经细胞 Cyt-c mRNA 表达的影响 | 第68页 |
·AVM 对神经细胞 Bcl-2 mRNA 表达的影响 | 第68-69页 |
·AVM 对神经细胞 GADD153 mRNA 表达的影响 | 第69-70页 |
·AVM 对神经细胞 Caspase-12 mRNA 表达的影响 | 第70-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第79页 |