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黑米花色苷对CCl4诱导小鼠肝损伤的保护作用及其抗氧化机制

摘要第1-16页
ABSTRACT第16-20页
缩略语表第20-21页
第一章 绪论第21-35页
 1 肝损伤第21-26页
   ·肝脏第21页
   ·肝损伤的机制第21-23页
     ·肝细胞损伤的化学机制第21-23页
       ·质膜的损害第21-22页
       ·氧自由基(Oxygen free radicals,OFR)的损害第22页
       ·肝细胞钙超载第22-23页
     ·肝细胞损伤的免疫学机制第23页
       ·细胞因子(Cytokine)第23页
       ·一氧化氮(Nitric oxide,NO)第23页
       ·肝细胞凋亡(HepatoC3Gte apoptosis)第23页
   ·化学性肝损伤模型第23-24页
     ·CCl_4肝损伤模型第24页
     ·酒精性肝损伤模型发病机制第24页
   ·抗肝细胞损伤药物第24-26页
     ·抗病毒药物第24-25页
       ·干扰素第25页
       ·膦甲酸钠(Trisodium phosphonoformate,PFA)第25页
     ·免疫调节药物第25页
       ·转移因子第25页
       ·胸腺素a1(Thymosin-a1)第25页
       ·白细胞介素-2(interleukin-2)第25页
     ·中草药第25-26页
       ·小柴胡汤第25-26页
       ·水飞蓟素第26页
     ·改善肝功能药物第26页
       ·联苯双酯第26页
       ·Ca~(2+)通道阻滞剂第26页
       ·NO抑制剂第26页
       ·抗氧自由基药物第26页
 2 天然抗氧化剂-花色苷类化合物的研究第26-31页
   ·花色苷类物质的结构、种类及性质第27-28页
   ·花色苷类化合物的提取分离第28-29页
   ·花色苷类物质抗氧化作用第29-30页
   ·花色苷类物质对肝损伤的保护作用研究进展第30-31页
 3 天然抗氧化资源-黑米的研究进展第31-33页
   ·黑米种质资源第31页
   ·黑米的功能特性及其相关研究第31-33页
     ·抗氧化作用第31-32页
     ·与抗氧化有关的其他生理活性第32-33页
       ·对心血管的保护作用第32页
       ·抗癌作用第32-33页
     ·其他第33页
 4 研究目的、意义第33-34页
 5 研究主要内容第34-35页
第二章 BRA的分离纯化及其成分鉴定第35-50页
 1 材料与方法第35-40页
   ·仪器设备第35页
   ·材料第35-36页
   ·试验方法第36-40页
     ·CBRA的制备第36页
     ·花色苷的定量第36页
     ·最佳树脂类型的筛选第36-37页
       ·树脂预处理第36页
       ·树脂吸附率和解吸率的测定第36-37页
     ·AB-8对CBRA静态吸附性能研究第37页
       ·CBRA在 AB-8上吸附平衡时间的测定第37页
       ·CBRA溶液pH值对吸附效果的影响第37页
       ·洗脱剂(乙醇)浓度对解吸效果的影响第37页
     ·大孔吸附树脂动态吸附性能研究第37-38页
       ·样品浓度对吸附效果的影响第37页
       ·吸附流速对吸附效果的影响第37页
       ·泄漏曲线的测定第37-38页
       ·解吸流速对 AB-8大孔树脂解吸效果的影响及洗脱曲线的测定第38页
     ·AB-8型大孔树脂重复使用次数对吸附效果的影响第38页
     ·大孔树脂 AB-8对 CBRA的纯化第38页
     ·BRA定性检验第38-39页
       ·盐酸—镁粉反应第38页
       ·中性醋酸铅反应第38页
       ·FeCl_3显色反应第38页
       ·莫立许反应第38-39页
       ·碘液反应第39页
     ·花色苷总抗氧化能力的测定第39页
     ·BRA的主成分鉴定第39-40页
       ·色谱条件的选择(Liu X M et al.,2004)第39页
       ·标准品溶液的制备及线性关系考察第39-40页
       ·精密度试验第40页
       ·样品提取物中花色苷成分及含量的测定第40页
 2 结果与分析第40-48页
   ·5种大孔树脂的吸附效果比较第40页
   ·AB-8对 CBRA的静态吸附性能第40-42页
     ·吸附平衡时间第40-41页
     ·CBRA溶液pH值第41页
     ·洗脱剂(乙醇)浓度第41-42页
   ·AB-8对 CBRA的动态吸附性能第42-44页
     ·样品浓度第42-43页
     ·吸附流速第43页
     ·泄漏曲线第43-44页
     ·解吸流速第44页
   ·AB-8大孔树脂重复使用次数对吸附效果的影响第44-45页
   ·AB-8大孔树脂对 BRA的吸附纯化效果第45-46页
     ·BRA定性检验第45-46页
       ·盐酸—镁粉反应第45页
       ·中性醋酸铅反应第45页
       ·FeCl_3显色反应第45页
       ·莫立许反应第45-46页
       ·碘液反应第46页
     ·BRA纯化前后抗氧化能力比较第46页
   ·BRA主成分鉴定第46-48页
     ·标准品溶液的制备及线性关系考察第46-47页
     ·精密度试验第47页
     ·样品提取物纯化前后花色苷成分及含量的测定第47-48页
 3 讨论第48-50页
   ·黑米花色苷的分离纯化工艺第48页
   ·黑米中花色苷主要种类及含量第48-50页
第三章 BRA对 CCL_4亚急性小鼠肝损伤的保护和抗氧化作用研究第50-62页
 1 材料与方法第50-54页
   ·材料第50-51页
     ·试剂及仪器第50-51页
     ·BRA制备第51页
     ·动物与分组第51页
   ·动物饲养及处理第51页
   ·检测指标及方法第51-54页
     ·肝组织匀浆液的制备与蛋白质含量测定第51页
     ·血清 ALT、AST、SOD活性及 MDA、8-OHdG含量测定第51-53页
       ·ALT、AST的测定第52页
       ·血清 SOD活力的测定第52页
       ·MDA的测定第52-53页
     ·肝脏 TAC、SOD、GSH-Px活性及 MDA、GSH含量测定第53页
       ·肝脏总抗氧化能力T-AOC的测定第53页
       ·肝组织 SOD活力的测定第53页
       ·肝组织 GSH-Px活性的测定第53页
       ·肝组织 MDA含量的测定第53页
       ·肝组织 GSH含量的测定第53页
     ·组织病理学形态观察第53-54页
   ·数据处理和统计分析第54页
 2 结果与分析第54-59页
   ·小鼠一般情况第54-55页
   ·BRA对小鼠血清 ALT、AST水平的影响第55-57页
   ·BRA对小鼠肝组织形态学变化的影响第57页
   ·BRA对小鼠血清氧化应激水平的影响第57-58页
   ·BRA对小鼠肝组织氧化应激水平的影响第58-59页
 3 讨论第59-62页
   ·BRA对小鼠血清肝酶水平和肝组织病理形态学的影响第60页
   ·BRA对小鼠氧化应激水平的影响第60-62页
第四章 BRA体外清除自由基抗氧化活性研究第62-70页
 1 材料与方法第62-63页
   ·实验材料和仪器设备第62-63页
     ·实验材料第62页
     ·试剂第62页
     ·仪器及设备第62-63页
   ·实验方法第63页
     ·各样品溶液的制备第63页
     ·普鲁土蓝法测定还原能力第63页
     ·铁离子还原法测定总抗氧化能力第63页
     ·花色苷清除 DPPH·自由基实验第63页
 2 结果与分析第63-66页
   ·还原能力第63-64页
   ·总抗氧化能力第64-66页
     ·BRA纯化前后总抗氧化能力第64页
     ·3种花色苷单体总抗氧化能力第64-66页
   ·DPPH自由基清除能力第66页
     ·BRA纯化前后清除自由基能力第66页
     ·3种花色苷单体清除自由基能力第66页
 3 讨论第66-70页
   ·BRA体外抗氧化作用第67页
   ·种单体抗氧化差异第67-70页
第五章 BRA对 CCL_4损伤 L-02肝细胞的保护及氧化应激的影响第70-94页
 1 材料与方法第70-75页
   ·主要仪器第70页
   ·主要试剂及其配制第70-71页
     ·主要试剂第70-71页
     ·主要试剂的配制第71页
   ·细胞株第71-72页
     ·细胞的传代第71-72页
     ·细胞的冻存第72页
     ·细胞的复苏第72页
     ·细胞活力检测第72页
   ·体外实验第72-75页
     ·细胞培养第72页
     ·CCl_4处理 L-02肝细胞损伤模型的建立第72-73页
       ·细胞分组及处理第72-73页
       ·CCl_4处理时间及浓度对细胞活力的影响第73页
       ·CCl_4处理时间及浓度对细胞肝酶活性的影响第73页
       ·CCl_4处理时间及浓度对细胞氧化还原体系 MDA含量的影响第73页
     ·BRA对 CCl_4损伤 L-02肝细胞的保护及氧化应激的影响第73-75页
       ·细胞分组及处理第73-74页
       ·细胞活力第74页
       ·肝酶活性第74页
       ·细胞氧化-抗氧化酶活性和细胞 MDA、NO含量第74页
       ·肝酶活性的测定第74页
       ·细胞氧化-抗氧化酶活性和细胞 MDA、NO含量的测定第74-75页
     ·3种花色苷单体对 CCl_4损伤 L-02肝细胞的保护及氧化应激的影响第75页
       ·细胞分组及处理第75页
       ·细胞活力第75页
       ·肝酶活性第75页
       ·细胞氧化-抗氧化酶活性和细胞 MDA、NO含量第75页
   ·统计分析第75页
 2 结果与分析第75-88页
   ·肝细胞的一般生长状态第75-77页
   ·CCl_4体外肝细胞损伤模型的建立第77-79页
     ·CCl_4处理时间及浓度对细胞活力的影响第77页
     ·CCl_4处理时间及浓度对细胞培养上清中肝酶活性的影响第77-79页
       ·CCl_4处理时间及浓度对 ALT释出的影响第77-79页
       ·CCl_4处理时间及浓度对 AST活性的影响第79页
     ·CCl_4处理时间及浓度对细胞细胞氧化还原体系 MDA含量的影响第79页
   ·BRA对 CCl_4损伤 L-02肝细胞的保护及氧化应激的影响第79-81页
     ·细胞活力第79页
     ·细胞肝酶活性第79页
     ·细胞 MDA、NO含量第79-80页
     ·细胞抗氧化水平第80-81页
   ·花色苷单体对 CCl_4损伤 L-02肝细胞的保护及氧化应激的影响第81-85页
     ·细胞活力第81页
     ·细胞肝酶活性第81-82页
     ·细胞 MDA和NO含量第82-83页
     ·细胞抗氧化水平第83-85页
   ·3种单体对肝损伤细胞的保护和抗氧化作用比较第85-88页
     ·细胞活力第85-86页
     ·细胞肝酶活性第86页
     ·细胞 MDA和NO含量第86-87页
     ·细胞抗氧化水平第87-88页
 3 讨论第88-94页
   ·肝细胞 CCl_4损伤模型的建立第89页
   ·BRA对细胞 L-02存活率的提高作用第89-90页
   ·BRA对肝细胞抗氧化防御系统的影响第90-92页
     ·对脂质过氧化产物 MDA产生的抑制作用第90-91页
     ·BRA对抗氧化物活性的提高作用第91-92页
   ·BRA对细胞膜完整性的保护作用第92页
   ·BRA对 NO产生的抑制作用第92-94页
第六章 结论第94-98页
 主要结论第94-97页
 创新点第97页
 展望第97-98页
参考文献第98-104页
致谢第104-105页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第105页

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