中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
英文缩略词及中英文对照表 | 第12-14页 |
引言 | 第14-35页 |
1 核基质结合序列的研究现状 | 第14-22页 |
·细胞核内染色体的存在状态 | 第14-15页 |
·细胞核内核基质区域 | 第15-17页 |
·染色体Loop 结构 | 第17-18页 |
·核基质结合序列(MAR)的分离与鉴定 | 第18-19页 |
·核基质结合序列的结构特征 | 第19-20页 |
·核基质结合序列的分类 | 第20-21页 |
·MAR 结合蛋白 | 第21-22页 |
2 核基质结合序列(MAR)对外源基因表达的影响 | 第22-25页 |
·MAR 对外源基因表达强度和差异的影响 | 第23-24页 |
·MAR 对外源基因沉默的影响 | 第24页 |
·MAR 对外源基因转化频率的影响 | 第24-25页 |
3 在基因水平上MAR 介导的调控功能的多样性 | 第25-28页 |
·MAR 提供活跃整合位点 | 第25页 |
·MAR介导的转录水平调控 | 第25-28页 |
4 在表观水平上MAR介导的调控功能的多样性 | 第28-29页 |
·MAR介导的蛋白水平调控 | 第28页 |
·MAR介导的染色质改构 | 第28-29页 |
5 MAR 增强基因表达的作用机制 | 第29-31页 |
·MAR 介导的DNA 甲基化调控 | 第29-30页 |
·MAR介导的DNA loop效应 | 第30-31页 |
·MAR介导的DNA解旋作用 | 第31页 |
·MAR 介导的核小体开放 | 第31页 |
6 MAR 作用的分子机理 | 第31-34页 |
·染色质的开放模型 | 第32-33页 |
·提高外源基因整合的模型 | 第33页 |
·抑制配对作用的模型 | 第33-34页 |
7 研究目的与意义 | 第34-35页 |
1 材料与方法 | 第35-67页 |
·实验材料 | 第35-38页 |
·实验方法 | 第38-67页 |
2 结果与分析 | 第67-89页 |
·烟草TM6 序列分析 | 第67-68页 |
·TM6 在转基因烟草内对外源基因表达的影响 | 第68-72页 |
·TM6在转基因烟草植株中的功能 | 第68-70页 |
·在转基因烟草中TM6 对启动子的依赖性 | 第70-72页 |
·TM6 对外源基因转化效率的影响 | 第72-75页 |
·T0 代转基因烟草抗性统计 | 第72-73页 |
·T2 代转基因烟草种子萌发实验 | 第73-75页 |
·TM6 几个功能位点的突变分析 | 第75-76页 |
·酵母单杂交对烟草中 TM6 的结合蛋白的分离 | 第76-81页 |
·烟草 TM6 序列的分段克隆及其酵母诱饵载体的构建 | 第76-78页 |
·烟草 cDNA 文库的获得及其酵母单杂交分析 | 第78-79页 |
·阳性克隆序列分析 | 第79-81页 |
·酵母单杂交蛋白 NtMBP1 和 NtHMGB 与 TM6II 的互作分析 | 第81-87页 |
·NtMBP1 基因和 NtHMGB 基因的序列分析 | 第81-83页 |
·NtMBP1和NtHMGB蛋白的亚细胞定位分析 | 第83-84页 |
·NtMBP1 和NtHMGB 蛋白的原核表达及纯化 | 第84-85页 |
·烟草 NtMBP1 和 NtHMGB 蛋白与 TM6II?I 和 TM6II?II 片段的体外结合实验 | 第85-87页 |
·TM6 侧翼启动子区对微球菌核酸酶敏感性分析 | 第87-89页 |
3 讨论 | 第89-95页 |
·TM6在单子叶植物和双子叶植物中都能提高外源基因表达 | 第89-90页 |
·TM6的作用依赖于启动子类型,但不能改变启动子的作用模式 | 第90-91页 |
·TM6能提高外源基因转化频率 | 第91-92页 |
·TM6的核心作用序列分析结果 | 第92-93页 |
·MAR结合蛋白的多样性 | 第93-94页 |
·酵母单杂交系统在MAR 功能研究中的应用 | 第94页 |
·MAR 序列作用模式的探讨 | 第94-95页 |
4 结论 | 第95-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
附录 | 第112-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第120页 |