| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| ·植物抗逆性研究进展 | 第8-10页 |
| ·植物抗逆性的分子基础及研究现状 | 第8页 |
| ·甘油的特点及其渗透压调解作用 | 第8-9页 |
| ·甘油的代谢及其关键酶研究 | 第9-10页 |
| ·抗逆性启动子的研究 | 第10-12页 |
| ·启动子的性质 | 第10页 |
| ·启动子的结构 | 第10-11页 |
| ·启动子的克隆方法 | 第11页 |
| ·3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子研究现状 | 第11-12页 |
| ·报告基因 | 第12-13页 |
| ·GFP 的来源及发光机制 | 第12页 |
| ·GFP 的应用与特点 | 第12-13页 |
| ·植物抗逆性基因工程育种 | 第13-14页 |
| ·植物抗逆育种研究现状 | 第13页 |
| ·农杆菌介导的植物基因转化技术 | 第13-14页 |
| ·立题背景和研究内容 | 第14-15页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第15-22页 |
| ·实验材料 | 第15-17页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·菌株与质粒 | 第15页 |
| ·植物材料 | 第15页 |
| ·工具酶与试剂 | 第15-16页 |
| ·培养基及培养条件 | 第16-17页 |
| ·实验方法 | 第17-22页 |
| ·PCR 引物 | 第17页 |
| ·产甘油假丝酵母染色体DNA 的制备 | 第17-18页 |
| ·PCR 扩增反应体系及反应条件 | 第18页 |
| ·PCR 产物与克隆载体的连接 | 第18页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第18页 |
| ·大肠杆菌的转化 | 第18页 |
| ·转化子的筛选鉴定 | 第18页 |
| ·酿酒酵母感受态的制备 | 第18-19页 |
| ·电击转化酿酒酵母 | 第19页 |
| ·稳定转化子的筛选 | 第19页 |
| ·绿色荧光蛋白的检测 | 第19页 |
| ·A. tumefaciens LBA4404 感受态的制备 | 第19页 |
| ·电击转化A. tumefaciens LBA4404 | 第19-20页 |
| ·烟草的遗传转化与再生 | 第20页 |
| ·转基因烟草的胁迫培养 | 第20-21页 |
| ·转基因烟草中绿色荧光蛋白的检测 | 第21页 |
| ·烟叶中甘油含量的测定 | 第21页 |
| ·转基因烟叶中GPDH 的测定 | 第21-22页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第22-42页 |
| ·GPD1 最佳长度启动子的选择研究 | 第22-28页 |
| ·不同长度启动子PCggpd 及基因gfp 的克隆 | 第23页 |
| ·启动子不同长度系列重组表达载体的构建 | 第23-25页 |
| ·酿酒酵母阳性转化子的获得及初步鉴定 | 第25页 |
| ·GFP 在系列重组酿酒酵母中的表达 | 第25-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| ·启动子PCGGPD(1000)在烟草中的调控功能研究 | 第28-33页 |
| ·pMD18-T-PCggpd(1000)的构建 | 第28页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第28-30页 |
| ·根癌农杆菌的电击转化 | 第30页 |
| ·转基因烟草的遗传转化与再生 | 第30-31页 |
| ·转基因烟草的验证 | 第31-33页 |
| ·小结 | 第33页 |
| ·产甘油假丝酵母甘油合成关键酶基因GPD1 在烟草中的表达 | 第33-40页 |
| ·3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD1 全长的克隆 | 第34-35页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌的电击转化 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草的遗传转化与再生 | 第36页 |
| ·转基因烟草的PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·烟叶中甘油含量的测定 | 第37页 |
| ·初始烟叶和转基因烟草中GPDH 的检测 | 第37-38页 |
| ·不同盐胁迫下烟叶中的甘油含量及GPDH 酶活 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-42页 |
| 结论与展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
