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地克珠利抗鸡柔嫩艾美耳球虫第二代裂殖子作用机理研究

中文摘要第1-8页
Abstract第8-23页
第一章 绪论第23-47页
   ·鸡球虫概述第23-25页
     ·鸡球虫的分类第23页
     ·鸡球虫生活史第23-25页
   ·鸡球虫的基因组研究第25页
   ·球虫的滑行和入侵宿主细胞第25-29页
     ·保守的入侵模型第26页
     ·钙信号第26-28页
     ·入侵活力的激活第28页
     ·入侵复合体的解聚第28-29页
   ·鸡球虫病的防治第29-35页
     ·鸡球虫病的药物防治第29-32页
     ·疫苗第32-34页
     ·天然药物添加剂第34-35页
   ·抗球虫药物靶标筛选的研究进展第35-39页
     ·质体第35-36页
     ·能量代谢和线粒体第36-37页
     ·焦磷酸酯代谢和钙酸体第37页
     ·电子传递链以及嘧啶和嘌呤的合成第37-38页
     ·多胺代谢第38页
     ·抗氧化第38页
     ·双硝基苯硫和甘露醇循环第38-39页
     ·抗微管的试剂第39页
     ·叶酸第39页
     ·蛋白酶第39页
   ·地克珠利抗球虫作用机理研究第39-40页
     ·地克珠利概况第39-40页
     ·地克珠利作用机理研究进展第40页
   ·SSH技术的原理与应用第40-45页
     ·SSH技术的原理及步骤第41-43页
     ·SSH技术的应用第43-45页
   ·DNA微阵列技术的原理与应用第45-46页
     ·DNA芯片技术的基本原理第45页
     ·DNA芯片技术在药物学研究领域的应用第45-46页
   ·小结与展望第46-47页
第二章 地克珠利对E. tenella第二代裂殖子超微结构、凋亡及线粒体膜电位的影响第47-57页
   ·引言第47页
   ·材料与方法第47-51页
     ·试验虫株第47页
     ·试验分组及处理第47-49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要仪器第49页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第49-50页
     ·E. tenella 第二代裂殖子扫描电镜观察第50页
     ·E. tenella 第二代裂殖子数量的测定第50页
     ·E. tenella 第二代裂殖子透射电镜观察第50页
     ·E. tenella 第二代裂殖子凋亡检测第50页
     ·E. tenella 第二代裂殖子线粒体膜电位测定第50-51页
   ·结果第51-55页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第51页
     ·地克珠利对 E. tenella 第二代裂殖子数量的影响第51-52页
     ·地克珠利对 E. tenella 第二代裂殖子超微结构的影响第52-53页
     ·地克珠利对 E. tenella 第二代裂殖子凋亡率的影响第53-54页
     ·地克珠利对 E. tenella 第二代裂殖子线粒体膜电位的影响第54-55页
   ·讨论第55-57页
第三章 地克珠利作用E. tenella第二代裂殖子消减cDNA文库的构建第57-75页
   ·引言第57页
   ·材料与方法第57-70页
     ·试验虫株第57页
     ·试验动物及处理第57-58页
     ·主要试剂第58页
     ·主要仪器第58页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第58页
     ·E. tenella 第二代裂殖子总RNA的提取第58-59页
     ·E. tenella 第二代裂殖子mRNA的分离第59-60页
     ·地克珠利作用E. tenella 第二代裂殖子cDNA消减文库的构建第60-69页
     ·地克珠利作用E. tenella 第二代裂殖子cDNA消减文库插入片段长度及重组比率分析第69-70页
   ·结果第70-73页
     ·E. tenella 第二代裂殖子总RNA的提取第70-71页
     ·双链cDNA的合成和RasⅠ酶切效率的分析第71页
     ·接头连接效率的分析第71-72页
     ·消减cDNA文库重组率及插入片段长度分析第72-73页
   ·讨论第73-75页
第四章 cDNA微阵列技术筛选地克珠利作用E. tenella 第二代裂殖子差异表达基因第75-104页
   ·引言第75页
   ·材料与方法第75-86页
     ·试验虫株第75-76页
     ·试验动物及分组第76页
     ·主要试剂第76页
     ·主要仪器第76页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第76-77页
     ·表达谱芯片的制作第77-79页
     ·表达谱芯片的杂交第79-81页
     ·芯片的扫描及数据处理第81-82页
     ·差异表达基因数据的分析第82页
     ·差异表达基因的测序和分析第82页
     ·差异表达基因的实时定量PCR验证第82-86页
   ·结果第86-100页
     ·RNA质检结果第86-87页
     ·cDNA微阵列的制作第87-88页
     ·样品与芯片的杂交第88-95页
     ·芯片杂交数据的分析第95-97页
     ·差异表达基因的测序及生物信息学分析第97-99页
     ·差异表达基因的实时定量PCR验证第99-100页
   ·讨论第100-104页
第五章 地克珠利对E. tenella 第二代裂殖子入侵相关基因表达及感染鸡盲肠组织结构的影响第104-113页
   ·引言第104页
   ·材料与方法第104-107页
     ·试验动物与分组第104-105页
     ·试验虫株第105页
     ·主要试剂第105页
     ·主要仪器第105页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第105页
     ·E. tenella 第二代裂殖子微线基因mRNA表达量分析第105-107页
     ·E. tenella感染鸡盲肠组织扫描电镜观察第107页
   ·结果第107-112页
     ·E. tenella 第二代裂殖子总RNA的提取第107-108页
     ·E. tenella 第二代裂殖子微线基因定量分析标准曲线的建立第108页
     ·E. tenella 第二代裂殖子微线基因扩增表达的特异性分析第108-109页
     ·E. tenella 第二代裂殖子微线基因表达的定量分析第109-110页
     ·E. tenella感染鸡盲肠组织样品扫描电镜的观察第110-112页
   ·讨论第112-113页
第六章 E. tenella 第二代裂殖子肌动蛋白解聚因子的克隆及地克珠利对其mRNA表达的影响第113-125页
   ·引言第113页
   ·材料与方法第113-117页
     ·试验动物与分组第113-114页
     ·试验虫株第114页
     ·主要试剂第114页
     ·主要仪器第114-115页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第115页
     ·E. tenella 第二代裂殖子总RNA的提取和纯化第115页
     ·E. tenella 第二代裂殖子ADF基因的克隆第115-116页
     ·E. tenella 第二代裂殖子ADF基因的表达第116-117页
     ·地克珠利对E. tenella 第二代裂殖子ADF基因mRNA表达的影响第117页
   ·结果第117-123页
     ·E. tenella 第二代裂殖子ADF基因的克隆第117-120页
     ·E. tenella 第二代裂殖子ADF蛋白的表达及纯化第120-122页
     ·地克珠利对E. tenella 第二代裂殖子ADF基因mRNA表达的影响第122-123页
   ·讨论第123-125页
第七章 E. tenella第二代裂殖子激活蛋白激酶C受体基因的克隆和表达第125-141页
   ·引言第125-126页
   ·材料与方法第126-133页
     ·试验动物与分组第126页
     ·试验虫株第126页
     ·主要试剂第126页
     ·主要仪器第126-127页
     ·EST来源第127页
     ·RACE引物第127页
     ·E. tenella 第二代裂殖子的制备第127页
     ·E. tenella 第二代裂殖子总RNA的提取第127页
     ·E. tenella 第二代裂殖子EtRACK基因5′和3′的扩增第127-130页
     ·PCR产物的回收第130页
     ·回收产物与pMD19-T Vector的连接转化第130页
     ·阳性克隆的鉴定和测序第130-131页
     ·E. tenella 第二代裂殖子EtRACK基因全长序列的拼接第131页
     ·E. tenella 第二代裂殖子EtRACK基因全长cDNA的克隆和测序第131-132页
     ·E. tenella 第二代裂殖子 EtRACK 基因编码蛋白的生物信息学分析第132页
     ·E. tenella第二代裂殖子EtRACK基因编码蛋白的表达及纯化第132-133页
   ·结果第133-139页
     ·E. tenella 第二代裂殖子EtRACK基因的获得第133-134页
     ·E. tenella 第二代裂殖子EtRACK基因的生物信息学分析第134-138页
     ·E. tenella第二代裂殖子EtRACK蛋白在大肠杆菌中的表达及纯化第138-139页
   ·讨论第139-141页
结论第141-142页
参考文献第142-159页
致谢第159-160页
作者简历第160-161页

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