| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-13页 |
| 2 材料与方法 | 第13-26页 |
| ·试验材料 | 第13-15页 |
| ·植物与真菌 | 第13页 |
| ·供试小麦幼苗的培养与接种 | 第13页 |
| ·质粒和菌株 | 第13页 |
| ·主要试剂 | 第13-14页 |
| ·仪器与设备 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·Western blotting 涉及的试剂 | 第14页 |
| ·免疫金标记涉及的试剂 | 第14-15页 |
| ·叶锈菌侵染过程中小麦叶肉细胞钙调素定位 | 第15-16页 |
| ·电镜样品的制备 | 第15页 |
| ·钙调素的免疫金标记 | 第15-16页 |
| ·图像的后处理与打印 | 第16页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM4-1 基因的PCR 扩增与表达载体的构建 | 第16-21页 |
| ·总RNA 提取和mRNA 反转录 | 第16-17页 |
| ·引物设计 | 第17-18页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM-4-1 基因的PCR 扩增与表达载体的构建 | 第18-21页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM4-1 的原核表达 | 第21-23页 |
| ·TaCaM2-3 在大肠杆菌BL21 中的诱导表达 | 第21-22页 |
| ·TaCaM4-1 在大肠杆菌BL21 中的诱导表达 | 第22-23页 |
| ·Western blotting 检测 | 第23页 |
| ·小麦钙调素特异性的抗体制备与鉴定 | 第23-25页 |
| ·TaCaM2-3 表达蛋白质的纯化及浓度检测 | 第23-24页 |
| ·小麦钙调素抗血清的制备 | 第24页 |
| ·抗血清中抗体效价的检测 | 第24-25页 |
| ·抗血清鉴定 | 第25页 |
| ·小麦样品中总的可溶性蛋白的提取 | 第25页 |
| ·免疫金标记检测钙调素 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-45页 |
| ·叶锈菌侵染过程中小麦叶肉细胞内钙调素定位 | 第26-32页 |
| ·模拟接种后小麦叶肉细胞钙调素的免疫金标记 | 第26-27页 |
| ·亲和组合小麦叶肉细胞中钙调素的免疫金标记 | 第27-29页 |
| ·不亲和组合小麦叶肉细胞中钙调素的免疫金标记 | 第29-32页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM4-1 基因的PCR 扩增与表达载体的构建 | 第32-36页 |
| ·总RNA 完整性鉴定和RNA 浓度及纯度测定 | 第32-33页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM4-1 基因的PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·表达载体构建 | 第34-36页 |
| ·TaCaM2-3、TaCaM4-1 的原核表达 | 第36-40页 |
| ·TaCaM2-3 在大肠杆菌BL21 中的诱导表达 | 第36-39页 |
| ·TaCaM4-1 在大肠杆菌BL21 中的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·Western blotting 检测TaCaM2-3、4-1 表达的蛋白质 | 第40页 |
| ·小麦钙调素抗血清的制备及鉴定 | 第40-43页 |
| ·TaCaM2-3 表达蛋白质的纯化 | 第40-41页 |
| ·小麦钙调素抗血清的制备 | 第41-42页 |
| ·小麦钙调素抗血清的鉴定 | 第42-43页 |
| ·小麦钙调素抗血清对不同组合中钙调素亚细胞分布的标记 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-52页 |
| ·叶锈菌侵染过程中小麦叶肉细胞内钙调素的亚细胞分布特征 | 第45-46页 |
| ·开展TaCaM 不同亚型研究的必要性 | 第46-48页 |
| ·TaCaM 基因扩增中出现的问题 | 第48页 |
| ·对小麦CaM 亚型特异抗体制备的思考 | 第48-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录 pET28a+载体构建图（Novagen） | 第56-57页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 作者简历 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
