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敬钊缨毛蛛毒素-V与Kv4.3钾通道相互作用机制研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 电压门控钾通道KV4.3及其毒素研究第11-26页
   ·瞬时外向钾通道研究进展第11-13页
     ·瞬时外向钾通道概述第11-12页
     ·瞬时外向钾通道失活机制第12页
     ·瞬时外向钾通道与疾病的关系第12-13页
   ·Kv4.3钾离子通道研究进展第13-22页
     ·Kv4.3钾离子通道的主要研究方法第13-14页
     ·Kv4.3钾离子通道结构第14-20页
     ·Kv4.3钾离子通道相互作用毒素第20-22页
   ·动物离子通道毒素与药物开发第22-23页
     ·直接作为治疗药物第22页
     ·发现新的药物作用靶点第22-23页
   ·本课题研究的背景和意义第23-26页
第二章 敬钊毒素-Ⅴ及其突变体对钾离子通道KV4.3的活性分析第26-58页
   ·前言第26-28页
   ·材料、试剂和仪器第28-29页
     ·动物和毒素第28页
     ·试剂与仪器第28-29页
   ·实验方法第29-45页
     ·多肽的化学合成第29-32页
     ·钾离子通道亚型Kv4.3质粒的扩增和提取第32-37页
     ·离子通道mRNA的获得第37-41页
     ·卵母细胞的分离第41-42页
     ·mRNA的显微注射第42-43页
     ·双电极杆电压钳实验第43-45页
   ·实验结果第45-55页
     ·突变体的合成效果(以T8A-JZTX-Ⅴ和S11A-JZTX-Ⅴ为例)第45-49页
     ·JZTX-Ⅴ及其突变体对Kv4.3的作用研究第49-55页
   ·讨论第55-58页
第三章 JZTX-Ⅴ对KV4.3钾离子通道突变体的活性分析第58-75页
   ·前言第58-60页
   ·材料、试剂和仪器第60-61页
     ·细胞和毒素第60页
     ·试剂与仪器第60-61页
   ·实验方法第61-71页
     ·Kv4.3通道突变体的构建第61-64页
     ·将突变产物转化到DH5α~(TM)-T1R E.Coli细胞第64-67页
     ·质粒的提取第67-68页
     ·用脂质体转染法将K4v.3通道突变体质粒转染HEK239T细胞 (人胚肾细胞)第68-70页
     ·用膜片钳检测ZJTX一V对Kv4.3通道突变体的作用(这部分实验 将由徐德宏完成)第70-71页
   ·实验结果第71-74页
     ·预测的Kv4.3钾离子通道上与JZTX-Ⅴ相互作用的关键残基第71-72页
     ·Kv4.3通道突变体的构建第72-73页
     ·JZTX-Ⅴ对Kv4.3钾通道突变体的作用第73-74页
   ·讨论第74-75页
参考文献第75-87页
附录1第87-88页
附录2第88-89页
致谢第89-91页

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