摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 电压门控钾通道KV4.3及其毒素研究 | 第11-26页 |
·瞬时外向钾通道研究进展 | 第11-13页 |
·瞬时外向钾通道概述 | 第11-12页 |
·瞬时外向钾通道失活机制 | 第12页 |
·瞬时外向钾通道与疾病的关系 | 第12-13页 |
·Kv4.3钾离子通道研究进展 | 第13-22页 |
·Kv4.3钾离子通道的主要研究方法 | 第13-14页 |
·Kv4.3钾离子通道结构 | 第14-20页 |
·Kv4.3钾离子通道相互作用毒素 | 第20-22页 |
·动物离子通道毒素与药物开发 | 第22-23页 |
·直接作为治疗药物 | 第22页 |
·发现新的药物作用靶点 | 第22-23页 |
·本课题研究的背景和意义 | 第23-26页 |
第二章 敬钊毒素-Ⅴ及其突变体对钾离子通道KV4.3的活性分析 | 第26-58页 |
·前言 | 第26-28页 |
·材料、试剂和仪器 | 第28-29页 |
·动物和毒素 | 第28页 |
·试剂与仪器 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-45页 |
·多肽的化学合成 | 第29-32页 |
·钾离子通道亚型Kv4.3质粒的扩增和提取 | 第32-37页 |
·离子通道mRNA的获得 | 第37-41页 |
·卵母细胞的分离 | 第41-42页 |
·mRNA的显微注射 | 第42-43页 |
·双电极杆电压钳实验 | 第43-45页 |
·实验结果 | 第45-55页 |
·突变体的合成效果(以T8A-JZTX-Ⅴ和S11A-JZTX-Ⅴ为例) | 第45-49页 |
·JZTX-Ⅴ及其突变体对Kv4.3的作用研究 | 第49-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
第三章 JZTX-Ⅴ对KV4.3钾离子通道突变体的活性分析 | 第58-75页 |
·前言 | 第58-60页 |
·材料、试剂和仪器 | 第60-61页 |
·细胞和毒素 | 第60页 |
·试剂与仪器 | 第60-61页 |
·实验方法 | 第61-71页 |
·Kv4.3通道突变体的构建 | 第61-64页 |
·将突变产物转化到DH5α~(TM)-T1R E.Coli细胞 | 第64-67页 |
·质粒的提取 | 第67-68页 |
·用脂质体转染法将K4v.3通道突变体质粒转染HEK239T细胞 (人胚肾细胞) | 第68-70页 |
·用膜片钳检测ZJTX一V对Kv4.3通道突变体的作用(这部分实验 将由徐德宏完成) | 第70-71页 |
·实验结果 | 第71-74页 |
·预测的Kv4.3钾离子通道上与JZTX-Ⅴ相互作用的关键残基 | 第71-72页 |
·Kv4.3通道突变体的构建 | 第72-73页 |
·JZTX-Ⅴ对Kv4.3钾通道突变体的作用 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
附录1 | 第87-88页 |
附录2 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-91页 |