| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 芒果过敏研究综述 | 第10-15页 |
| 1.1 引言 | 第10-11页 |
| 1.2 芒果过敏反应类型 | 第11-12页 |
| 1.2.1 速发型过敏反应 | 第11页 |
| 1.2.2 迟发型过敏反应 | 第11-12页 |
| 1.3 过敏原类型 | 第12-13页 |
| 1.3.1 非蛋白质类过敏原 | 第12页 |
| 1.3.2 蛋白质类过敏原 | 第12-13页 |
| 1.4 交叉反应 | 第13页 |
| 1.5 讨论 | 第13-15页 |
| 第2章 芒果致敏Balb/c小鼠过敏性气道炎症模型的建立 | 第15-31页 |
| 2.1 引言 | 第15-16页 |
| 2.2 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.2.1 主要试剂及耗材 | 第16-17页 |
| 2.2.2 主要试验设备 | 第17页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第17-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-22页 |
| 2.3.1 BCA法定量蛋白 | 第19页 |
| 2.3.2 芒果果实粗提蛋白(MCEP)的制备及SDS-PAGE电泳 | 第19-20页 |
| 2.3.3 动物模型建立 | 第20页 |
| 2.3.4 间接ELISA测定血清中特异性IgE、IgG1、IgG2a | 第20页 |
| 2.3.5 WesternBlot分析血清中的MCEP特异性IgE、IgG1 | 第20-21页 |
| 2.3.6 小鼠脾细胞体外培养及细胞因子检测 | 第21页 |
| 2.3.7 肺泡灌洗液及细胞甩片 | 第21页 |
| 2.3.8 肺组织包埋及H&E、PAS染色 | 第21-22页 |
| 2.3.9 肺组织炎症评分及支气管粘液分泌评分 | 第22页 |
| 2.3.10 数据分析 | 第22页 |
| 2.4 实验结果 | 第22-28页 |
| 2.4.1 芒果果实总蛋白SDS-PAGE分析 | 第22-23页 |
| 2.4.2 血清中特异性抗体及mMCP- | 第23-24页 |
| 2.4.3 脾细胞培养上清中细胞因子的表达 | 第24页 |
| 2.4.4 肺泡灌洗液中细胞因子的表达 | 第24-26页 |
| 2.4.5 Westernblot分析血清中特异性抗体 | 第26页 |
| 2.4.6 肺泡灌洗液细胞分类、计数 | 第26-27页 |
| 2.4.7 H&E及PAS染色分析 | 第27-28页 |
| 2.5 讨论 | 第28-31页 |
| 第3章 芒果新主要过敏原几丁质酶的克隆表达及免疫学鉴定 | 第31-56页 |
| 3.1 引言 | 第31-32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-35页 |
| 3.2.1 主要试剂及耗材 | 第32页 |
| 3.2.2 主要试验设备 | 第32-33页 |
| 3.2.3 芒果过敏患者血清 | 第33页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第33-35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-39页 |
| 3.3.1 芒果果实粗提蛋白的制备及SDS-PAGE电泳 | 第35页 |
| 3.3.2 Dotblot及westernblot | 第35-36页 |
| 3.3.3 shotgun质谱鉴定 | 第36页 |
| 3.3.4 基因合成及质粒构建 | 第36页 |
| 3.3.5 感受态细胞制备 | 第36页 |
| 3.3.6 质粒转化 | 第36页 |
| 3.3.7 重组蛋白诱导表达 | 第36-37页 |
| 3.3.8 带His标签蛋白纯化 | 第37-38页 |
| 3.3.9 包涵体蛋白复性 | 第38页 |
| 3.3.10 DEAE弱阴离子柱纯化蛋白步骤 | 第38页 |
| 3.3.11 重组芒果几丁质酶免疫学鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.12 生物信息学分析 | 第39页 |
| 3.3.13 线性IgE结合表位预测及鉴定 | 第39页 |
| 3.4 结果分析 | 第39-53页 |
| 3.4.1 芒果果实粗提蛋白SDS-PAGE电泳及westernblot分析 | 第39-40页 |
| 3.4.2 shotgun结果 | 第40-42页 |
| 3.4.3 几丁质酶基因合成及质粒构建 | 第42-43页 |
| 3.4.4 重组蛋白诱导表达 | 第43-44页 |
| 3.4.5 蛋白纯化 | 第44-47页 |
| 3.4.6 重组芒果几丁质酶免疫学鉴定 | 第47-48页 |
| 3.4.7 芒果几丁质酶生物信息学分析及线性IgE结合表位鉴定 | 第48-53页 |
| 3.5 讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 英文缩略词表 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第63页 |
