| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪言 | 第10-19页 |
| 1.1 肝脏脂代谢调节 | 第10-12页 |
| 1.2 血脂代谢调节 | 第12-14页 |
| 1.3 肾素(原)受体及其在脂代谢中的新功能 | 第14-17页 |
| 1.4 miRNA调节脂代谢 | 第17-18页 |
| 1.5 MiR-148a是否能够通过(P)RR调节肝脏脂代谢？ | 第18-19页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第19-41页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.1 实验动物、细胞株、质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞培养实验试剂(名称,品牌,货号) | 第19页 |
| 2.1.3 细胞转染试剂(名称,品牌,货号) | 第19-20页 |
| 2.1.4 蛋白免疫印迹(WesternBlotting)试剂(名称,品牌,货号) | 第20页 |
| 2.1.5 PCR相关试剂(名称,品牌,货号) | 第20-21页 |
| 2.1.6 动物生理指标测定 | 第21页 |
| 2.2 实验仪器 | 第21-23页 |
| 2.2.1 细胞培养仪器 | 第21页 |
| 2.2.2 PCR仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 蛋白质检测相关仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.4 试剂样本保存相关仪器 | 第22页 |
| 2.2.5 离心机 | 第22页 |
| 2.2.6 荧光素酶等荧光类检测仪器 | 第22页 |
| 2.2.7 其他仪器 | 第22-23页 |
| 2.3 细胞培养 | 第23-25页 |
| 2.3.1 细胞培养试剂的准备 | 第23-24页 |
| 2.3.2 细胞培养操作步骤 | 第24-25页 |
| 2.4 细胞转染 | 第25-26页 |
| 2.4.1 siRNA转染 | 第25页 |
| 2.4.2 质粒转染 | 第25-26页 |
| 2.4.3 miR-148a转染 | 第26页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹 | 第26-29页 |
| 2.5.1 实验试剂的准备 | 第26-27页 |
| 2.5.2 实验操作 | 第27-29页 |
| 2.6 逆转录与RT-PCR | 第29-31页 |
| 2.6.1 提取RNA | 第29页 |
| 2.6.2 逆转录与实时荧光定量PCR | 第29-31页 |
| 2.7 载体构建 | 第31-37页 |
| 2.7.1 含目的基因3’-UTR区荧光素酶载体构建 | 第31-36页 |
| 2.7.2 (P)RR过表达载体构建 | 第36-37页 |
| 2.8 荧光素酶实验 | 第37-38页 |
| 2.9 LDL摄取实验 | 第38页 |
| 2.10 动物实验 | 第38页 |
| 2.11 快速蛋白液相色谱(FPLC)测定 | 第38-39页 |
| 2.11.1 实验前准备 | 第38-39页 |
| 2.11.2 实验注意事项 | 第39页 |
| 2.12 苏木精-伊红染色和油红O染色 | 第39-40页 |
| 2.13 数据处理 | 第40-41页 |
| 第3章 结果 | 第41-49页 |
| 3.1 (P)RR在肝脏脂代谢调节中的作用 | 第41-46页 |
| 3.1.1 G-(P)RR特异性抑制肝脏(P)RR的表达 | 第41-42页 |
| 3.1.2 抑制肝脏(P)RR同时降低肝脏VLDL分泌和LDL清除 | 第42-43页 |
| 3.1.3 抑制肝脏(P)RR阻断高脂饮食诱导的肥胖和脂肪肝 | 第43-44页 |
| 3.1.4 (P)RR抑制降低ACC和PDH的蛋白水平 | 第44-46页 |
| 3.2 MiR-148a调节(P)RR表达及功能 | 第46-49页 |
| 3.2.1 MiR-148a调节(P)RR的表达与细胞内LDL的摄取 | 第46-47页 |
| 3.2.2 MiR-148a通过(P)RR调节LDLR的表达 | 第47-49页 |
| 第4章 讨论 | 第49-52页 |
| 第5章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第61页 |
