| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 第一节 二苯醚类化合物概述 | 第12页 |
| 1 二苯醚 | 第12页 |
| 2 二苯醚类化合物 | 第12页 |
| 第二节 二苯醚类化合物的应用范围 | 第12-15页 |
| 1 卤代二苯醚 | 第13页 |
| 2 拟除虫菊酯类杀虫剂及二苯醚类除草剂 | 第13-15页 |
| 第三节 二苯醚类化合物的毒理学危害 | 第15-17页 |
| 1 卤代二苯醚的危害 | 第15-16页 |
| 2 拟除虫菊酯类杀虫剂及二苯醚类除草剂的危害 | 第16-17页 |
| 第四节 二苯醚类化合物的微生物降解研究现状 | 第17-18页 |
| 第五节 农药水解酶的研究现状 | 第18-20页 |
| 1 有机磷农药水解酶研究现状 | 第19页 |
| 2 拟除虫菊酯水解酶研究现状 | 第19-20页 |
| 3 联苯及多氯联苯水解酶研究现状 | 第20页 |
| 第六节 本论文的研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 二苯醚降解菌株的分离与分类地位研究 | 第22-30页 |
| 1 材料与方法 | 第22-25页 |
| 1.1 培养基与试剂 | 第22页 |
| 1.2 降解菌株的富集、分离和纯化 | 第22-23页 |
| 1.3 菌株的形态特征及生理生化鉴定 | 第23页 |
| 1.4 菌株的16S rRNA基因序列分析 | 第23-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.1 二苯醚高效降解富集液的获得 | 第25页 |
| 2.2 二苯醚降解菌株的获得 | 第25-26页 |
| 2.3 菌株XY_1的初步鉴定 | 第26-28页 |
| 2.4 菌株XY_1对二苯醚的降解情况 | 第28-29页 |
| 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 菌株XY_1的降解特性及其降解途径研究 | 第30-42页 |
| 第一节 菌株XY_1的降解特性研究 | 第30-36页 |
| 1 材料和方法 | 第30-32页 |
| 1.1 菌株与培养基 | 第30页 |
| 1.2 菌株XY_1的降解特性研究 | 第30-31页 |
| 1.3 菌株XY_1对PBA及其他苯环类物质的降解 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-36页 |
| 2.1 菌株XY_1对二苯醚的降解及菌株的生长情况 | 第32页 |
| 2.2 温度对XY_1降解二苯醚的影响 | 第32-33页 |
| 2.3 pH对XY_1降解二苯醚的影响 | 第33-34页 |
| 2.4 接种量对XY_1降解二苯醚的影响 | 第34页 |
| 2.5 二苯醚的初始浓度对XY_1降解二苯醚的影响 | 第34-35页 |
| 2.6 菌株XY_1对PBA和其他苯环类物质的降解 | 第35-36页 |
| 第二节 菌株XY_1对二苯醚降解代谢产物鉴定 | 第36-41页 |
| 1 材料与方法 | 第36-37页 |
| 1.1 培养基、试剂与菌株 | 第36页 |
| 1.2 细胞静息液的制备 | 第36页 |
| 1.3 菌株XY_1降解二苯醚的代谢产物制备 | 第36页 |
| 1.4 代谢产物HPLC检测 | 第36-37页 |
| 1.5 代谢产物的LC-MS鉴定分析 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-41页 |
| 2.1 代谢产物的HPLC分析 | 第37-38页 |
| 2.2 代谢产物的LC-MS鉴定 | 第38-41页 |
| 本章小结 | 第41-42页 |
| 第四章 2,4-己二烯酸苯酚酯水解酶基因的克隆表达 | 第42-60页 |
| 第一节 菌株XY_1的基因组框架图测序 | 第42-46页 |
| 1 材料与方法 | 第42-43页 |
| 1.1 试剂与培养基 | 第42页 |
| 1.2 菌株XY_1基因组DNA的提取 | 第42-43页 |
| 1.3 全基因组测序 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| 2.1 菌株XY_1基因组DNA的提取 | 第43-44页 |
| 2.2 基因组测序及其分析情况 | 第44-45页 |
| 2.3 基因预测与功能分析结果 | 第45-46页 |
| 第二节 水解酶基因dpeD的克隆与表达载体的构建 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 1.1 试剂与培养基 | 第46页 |
| 1.2 所用菌株与质粒 | 第46页 |
| 1.3 菌株XY_1基因组DNA的提取 | 第46-47页 |
| 1.4 水解酶dpeD基因片段的PCR扩增 | 第47页 |
| 1.5 水解酶dpeD基因片段连T载体和转化 | 第47-48页 |
| 1.6 表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-52页 |
| 2.1 水解酶dpeD基因片段的PCR扩增 | 第49-50页 |
| 2.2 水解酶dpeD基因片段连T载体和转化 | 第50-51页 |
| 2.3 T1-dpeD质粒和pET-28a质粒的提取及双酶切 | 第51页 |
| 2.4 T1-dpeD质粒双酶切片段酶连表达载体pET-28a与转化 | 第51-52页 |
| 第三节 水解酶基因dpeD的表达纯化及功能验证 | 第52-58页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 1.1 试剂与培养基 | 第52页 |
| 1.2 重组菌的诱导表达与纯化 | 第52-54页 |
| 1.3 DpeD水解酶对2,4-己二烯酸苯酚酯的降解活性测定 | 第54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-58页 |
| 2.1 重组菌的诱导表达与纯化 | 第54-55页 |
| 2.2 DpeD水解酶对2,4-己二烯酸苯酚酯的降解活性测定 | 第55-58页 |
| 本章小结 | 第58-60页 |
| 第五章 全文结论与展望 | 第60-64页 |
| 第一节 全文结论 | 第60-61页 |
| 1 二苯醚降解菌株的筛选 | 第60页 |
| 2 菌株XY_1的分类地位研究 | 第60-61页 |
| 3 菌株XY_1对二苯醚的代谢途径研究 | 第61页 |
| 4 水解酶基因dpeD的克隆 | 第61页 |
| 第二节 创新点 | 第61-62页 |
| 第三节 今后展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 附录一 16S rRNA基因登陆号及序列 | 第70-71页 |
| 附录二 dpeD核酸序列 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
