致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
主要缩略词 | 第10-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-31页 |
1.1 耐辐射奇球菌的概况 | 第14-18页 |
1.1.1 耐辐射奇球菌 | 第14页 |
1.1.2 耐辐射奇球菌的形态结构 | 第14-15页 |
1.1.3 耐辐射奇球菌的基因组 | 第15-17页 |
1.1.4 耐辐射奇球菌的极端抗性 | 第17-18页 |
1.2 耐辐射奇球菌氧化损伤防御机制的研究进展 | 第18-25页 |
1.2.1 酶促防御系统 | 第18-19页 |
1.2.2 非酶促防御系统 | 第19-22页 |
1.2.3 细胞净化系统 | 第22-23页 |
1.2.4 氧化防御系统的调控因子 | 第23-25页 |
1.3 Feo系统的研究进展 | 第25-30页 |
1.3.1 Feo系统的组成和功能 | 第26-29页 |
1.3.2 大肠杆菌Feo系统的作用机制 | 第29-30页 |
1.4 选题依据及研究意义 | 第30-31页 |
第二章 耐辐射奇球菌Feo系统的生物信息学分析 | 第31-40页 |
2.1 引言 | 第31页 |
2.2 主要软件与方法 | 第31-32页 |
2.2.1 同源序列比对与分析 | 第31-32页 |
2.2.2 蛋白结构预测 | 第32页 |
2.3 结果与讨论 | 第32-39页 |
2.3.1 耐辐射奇球菌基因组中Feo系统同源基因的预测 | 第32-34页 |
2.3.2 DR1220、DR1219、DR1218的跨膜结构域分析 | 第34-35页 |
2.3.3 DR1220、DR1219、DR1218的同源序列比对 | 第35-38页 |
2.3.4 DR1220、DR1219、DR1218的同源建模 | 第38-39页 |
2.4 小结 | 第39-40页 |
第三章 耐辐射奇球菌中Feo系统的特性研究 | 第40-58页 |
3.1 引言 | 第40页 |
3.2 主要材料与仪器 | 第40-41页 |
3.2.1 菌种与培养条件 | 第40-41页 |
3.2.2 试剂和材料 | 第41页 |
3.2.3 主要仪器设备 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-49页 |
3.3.1 feo操纵子的鉴定 | 第41-43页 |
3.3.2 Feo系统基因缺失突变株及补偿株的构建 | 第43-46页 |
3.3.3 生长曲线的测定 | 第46-47页 |
3.3.4 DR1220和DR1219的细胞定位(膜蛋白的荧光标记分析) | 第47页 |
3.3.5 金属离子敏感性实验 | 第47-48页 |
3.3.6 感应耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定胞内金属离子浓度 | 第48页 |
3.3.7 Feo系统缺失后其他金属离子通道和调控因子的表达变化分析 | 第48-49页 |
3.4 结果与讨论 | 第49-57页 |
3.4.1 耐辐射奇球菌中Feo的共转录 | 第49-50页 |
3.4.2 Feo蛋白的荧光标记定位分析 | 第50-52页 |
3.4.3 耐辐射奇球菌中Feo系统基因缺失突变株及补偿株的验证 | 第52-53页 |
3.4.4 基因突变对生长曲线的影响 | 第53-54页 |
3.4.5 突变株Mt-Feo与野生型R1对不同金属离子的敏感性 | 第54-55页 |
3.4.6 突变株Mt-Feo与野生型R1细胞内金属离子浓度水平 | 第55-56页 |
3.4.7 Feo系统缺失对其他金属离子通道和调控因子表达变化的影响 | 第56-57页 |
3.5 小结 | 第57-58页 |
第四章 Feo系统在耐辐射奇球菌氧化防御中作用的初步研究 | 第58-69页 |
4.1 引言 | 第58页 |
4.2 主要材料与仪器 | 第58-59页 |
4.2.1 菌种与培养条件 | 第58页 |
4.2.2 试剂和材料 | 第58-59页 |
4.2.3 主要仪器设备 | 第59页 |
4.3 实验方法 | 第59-62页 |
4.3.1 Feo系统基因缺失突变株及补偿株的生存表型分析 | 第59-60页 |
4.3.2 不同条件处理下的生存曲线 | 第60-61页 |
4.3.3 过氧化氢胁迫下Feo系统基因的表达分析 | 第61页 |
4.3.4 细胞内ROS积累测定 | 第61页 |
4.3.5 过氧化氢酶(KAT)活性分析 | 第61-62页 |
4.3.6 超氧化物歧化酶(SOD)活性分析 | 第62页 |
4.4 结果与讨论 | 第62-68页 |
4.4.1 Feo系统基因缺失突变株表型分析结果 | 第62-65页 |
4.4.2 突变体Mt-Feo和野生型R1菌株的生存曲线 | 第65-67页 |
4.4.3 过氧化氢胁迫下Feo系统基因的表达 | 第67页 |
4.4.4 Feo的缺失导致细胞内ROS积累和SOD酶活性下降 | 第67-68页 |
4.5 小结 | 第68-69页 |
第五章 总结与展望 | 第69-71页 |
一、总结 | 第69页 |
二、展望 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-77页 |
附录1 本论文所用的引物序列 | 第77-79页 |
硕士期间发表的论文 | 第79页 |