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耐辐射奇球菌Feo系统参与锰铁转运和氧化压力抗性的研究

致谢第7-8页
摘要第8-9页
Abstract第9页
主要缩略词第10-14页
第一章 文献综述第14-31页
    1.1 耐辐射奇球菌的概况第14-18页
        1.1.1 耐辐射奇球菌第14页
        1.1.2 耐辐射奇球菌的形态结构第14-15页
        1.1.3 耐辐射奇球菌的基因组第15-17页
        1.1.4 耐辐射奇球菌的极端抗性第17-18页
    1.2 耐辐射奇球菌氧化损伤防御机制的研究进展第18-25页
        1.2.1 酶促防御系统第18-19页
        1.2.2 非酶促防御系统第19-22页
        1.2.3 细胞净化系统第22-23页
        1.2.4 氧化防御系统的调控因子第23-25页
    1.3 Feo系统的研究进展第25-30页
        1.3.1 Feo系统的组成和功能第26-29页
        1.3.2 大肠杆菌Feo系统的作用机制第29-30页
    1.4 选题依据及研究意义第30-31页
第二章 耐辐射奇球菌Feo系统的生物信息学分析第31-40页
    2.1 引言第31页
    2.2 主要软件与方法第31-32页
        2.2.1 同源序列比对与分析第31-32页
        2.2.2 蛋白结构预测第32页
    2.3 结果与讨论第32-39页
        2.3.1 耐辐射奇球菌基因组中Feo系统同源基因的预测第32-34页
        2.3.2 DR1220、DR1219、DR1218的跨膜结构域分析第34-35页
        2.3.3 DR1220、DR1219、DR1218的同源序列比对第35-38页
        2.3.4 DR1220、DR1219、DR1218的同源建模第38-39页
    2.4 小结第39-40页
第三章 耐辐射奇球菌中Feo系统的特性研究第40-58页
    3.1 引言第40页
    3.2 主要材料与仪器第40-41页
        3.2.1 菌种与培养条件第40-41页
        3.2.2 试剂和材料第41页
        3.2.3 主要仪器设备第41页
    3.3 实验方法第41-49页
        3.3.1 feo操纵子的鉴定第41-43页
        3.3.2 Feo系统基因缺失突变株及补偿株的构建第43-46页
        3.3.3 生长曲线的测定第46-47页
        3.3.4 DR1220和DR1219的细胞定位(膜蛋白的荧光标记分析)第47页
        3.3.5 金属离子敏感性实验第47-48页
        3.3.6 感应耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定胞内金属离子浓度第48页
        3.3.7 Feo系统缺失后其他金属离子通道和调控因子的表达变化分析第48-49页
    3.4 结果与讨论第49-57页
        3.4.1 耐辐射奇球菌中Feo的共转录第49-50页
        3.4.2 Feo蛋白的荧光标记定位分析第50-52页
        3.4.3 耐辐射奇球菌中Feo系统基因缺失突变株及补偿株的验证第52-53页
        3.4.4 基因突变对生长曲线的影响第53-54页
        3.4.5 突变株Mt-Feo与野生型R1对不同金属离子的敏感性第54-55页
        3.4.6 突变株Mt-Feo与野生型R1细胞内金属离子浓度水平第55-56页
        3.4.7 Feo系统缺失对其他金属离子通道和调控因子表达变化的影响第56-57页
    3.5 小结第57-58页
第四章 Feo系统在耐辐射奇球菌氧化防御中作用的初步研究第58-69页
    4.1 引言第58页
    4.2 主要材料与仪器第58-59页
        4.2.1 菌种与培养条件第58页
        4.2.2 试剂和材料第58-59页
        4.2.3 主要仪器设备第59页
    4.3 实验方法第59-62页
        4.3.1 Feo系统基因缺失突变株及补偿株的生存表型分析第59-60页
        4.3.2 不同条件处理下的生存曲线第60-61页
        4.3.3 过氧化氢胁迫下Feo系统基因的表达分析第61页
        4.3.4 细胞内ROS积累测定第61页
        4.3.5 过氧化氢酶(KAT)活性分析第61-62页
        4.3.6 超氧化物歧化酶(SOD)活性分析第62页
    4.4 结果与讨论第62-68页
        4.4.1 Feo系统基因缺失突变株表型分析结果第62-65页
        4.4.2 突变体Mt-Feo和野生型R1菌株的生存曲线第65-67页
        4.4.3 过氧化氢胁迫下Feo系统基因的表达第67页
        4.4.4 Feo的缺失导致细胞内ROS积累和SOD酶活性下降第67-68页
    4.5 小结第68-69页
第五章 总结与展望第69-71页
    一、总结第69页
    二、展望第69-71页
参考文献第71-77页
附录1 本论文所用的引物序列第77-79页
硕士期间发表的论文第79页

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