| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 酵母菌 | 第9页 |
| 1.1.1 酵母菌概述 | 第9页 |
| 1.2 酵母蛋白质及其糖基化 | 第9-12页 |
| 1.2.1 酵母菌的蛋白质 | 第9-11页 |
| 1.2.2 酵母菌蛋白质N-糖基化过程 | 第11页 |
| 1.2.3 酵母蛋白质糖基化的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.3 酵母蛋白质的糖基化分析 | 第12-16页 |
| 1.3.1 蛋白质糖基化的结构复杂性 | 第12-13页 |
| 1.3.2 蛋白质糖基化的分析策略 | 第13页 |
| 1.3.3 糖肽的富集方法 | 第13-15页 |
| 1.3.4 蛋白质的分离纯化方法 | 第15-16页 |
| 1.4 选题思想和研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 酵母糖蛋白质分离提纯 | 第17-25页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 实验部分 | 第17-20页 |
| 2.2.1 材料和试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.2 酵母菌的接种与培养 | 第18-19页 |
| 2.2.2.1 YPD培养基 | 第18页 |
| 2.2.2.2 菌种的活化 | 第18页 |
| 2.2.2.3 菌种的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.3 酵母蛋白的提取 | 第19页 |
| 2.2.4 菊芋酶蛋白的SDS-PAGE纯化 | 第19页 |
| 2.2.5 菊芋酶蛋白的胶内酶解 | 第19-20页 |
| 2.2.6 色谱分离条件 | 第20页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第20-24页 |
| 2.3.1 反相色谱条件的优化 | 第20-22页 |
| 2.3.1.1 标准蛋白在C8MHA柱上的保留情况 | 第20-21页 |
| 2.3.1.2 酿酒酵母蛋白质在C8MHA柱上的保留情况 | 第21-22页 |
| 2.3.2 菊芋酶蛋白的分离提纯 | 第22-24页 |
| 2.3.2.1 菊芋酶蛋白的SDS-PAGE纯化 | 第22-23页 |
| 2.3.2.2 菊芋酶蛋白的反相色谱分离 | 第23-24页 |
| 2.4 本章小结 | 第24-25页 |
| 第三章 亲水色谱材料XAmide的糖肽富集方法发展 | 第25-47页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 实验部分 | 第25-27页 |
| 3.2.1 材料和试剂 | 第25-26页 |
| 3.2.2 糖蛋白的酶解 | 第26页 |
| 3.2.3 糖蛋白酶解液的脱盐 | 第26页 |
| 3.2.4 C8去除IgG高质量数的非糖肽 | 第26页 |
| 3.2.5 XAmide材料富集糖肽的SPE条件优化 | 第26-27页 |
| 3.2.6 液相色谱-质谱表征 | 第27页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第27-46页 |
| 3.3.1 XAmide材料富集IgG糖肽的SPE条件优化 | 第27-42页 |
| 3.3.1.1 XAmide材料富集IgG糖肽的第一步SPE条件优化 | 第28-30页 |
| 3.3.1.2 XAmide材料富集IgG糖肽的第二步SPE条件优化 | 第30-32页 |
| 3.3.1.3 XAmide材料富集IgG糖肽的第三步SPE条件优化 | 第32-33页 |
| 3.3.1.4 XAmide材料富集IgG糖肽的第四步SPE条件优化 | 第33-35页 |
| 3.3.1.5 XAmide材料富集IgG糖肽的第五步SPE条件优化 | 第35-36页 |
| 3.3.1.6 XAmide材料富集IgG糖肽的第六步SPE条件优化 | 第36-38页 |
| 3.3.1.7 XAmide材料富集IgG糖肽的第七步SPE条件优化 | 第38页 |
| 3.3.1.8 XAmide材料富集IgG糖肽的第八步SPE条件优化 | 第38-40页 |
| 3.3.1.9 XAmide材料富集IgG糖肽的第九步SPE条件优化 | 第40-42页 |
| 3.3.2 XAmide材料富集RB糖肽的SPE条件优化 | 第42-43页 |
| 3.3.3 XAmide材料富集AGP的糖基化分析 | 第43-46页 |
| 3.3.3.1 XAmide材料富集AGP糖肽理论值表的建立 | 第43-44页 |
| 3.3.3.2 XAmide材料富集AGP糖肽一级质谱图分析 | 第44-45页 |
| 3.3.3.3 XAmide材料富集AGP糖肽二级质谱分析 | 第45-46页 |
| 3.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 菊芋酶的糖基化分析 | 第47-55页 |
| 4.1 引言 | 第47-48页 |
| 4.2 实验部分 | 第48-50页 |
| 4.2.1 材料和试剂 | 第48-49页 |
| 4.2.2 糖蛋白的酶解 | 第49页 |
| 4.2.3 糖蛋白酶解液的脱盐 | 第49页 |
| 4.2.4 XAmide材料富集糖肽 | 第49页 |
| 4.2.5 液相色谱-质谱表征 | 第49-50页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第50-54页 |
| 4.3.1 菊芋酶酶解液的RPLC-MSE分析 | 第50-54页 |
| 4.3.1.1 糖基化肽的位置的确定 | 第50页 |
| 4.3.1.2 一级质谱图分析 | 第50-51页 |
| 4.3.1.3 二级质谱图分析 | 第51-54页 |
| 4.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
