| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 种子特异性启动子研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1.1 启动子的基本概念及基本结构 | 第10-11页 |
| 1.1.2 种子特异性启动子驱动基因表达模式 | 第11-14页 |
| 1.1.2.1 与淀粉合成有关的种子特异启动子 | 第11-12页 |
| 1.1.2.2 种子贮藏蛋白合成相关的特异启动子 | 第12-13页 |
| 1.1.2.3 与脂肪合成有关的种子特异启动子 | 第13页 |
| 1.1.2.4 未知基因功能的种子特异启动子 | 第13-14页 |
| 1.1.3 种子特异性启动子相关元件的结构特点 | 第14-16页 |
| 1.2 基因功能生物信息学分析技术 | 第16页 |
| 1.3 RNA干扰技术 | 第16-17页 |
| 1.4 PYR/PYL/RCAR蛋白介导植物ABA的信号转导 | 第17-18页 |
| 1.5 本课题研究的目的和内容 | 第18-19页 |
| 第2章 OsLatex启动子克隆及胚乳特异性表达分析 | 第19-24页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 启动子克隆 | 第19页 |
| 2.2.2 pCXGUS-pN载体构建 | 第19-20页 |
| 2.2.3 转基因植株抗性筛选 | 第20页 |
| 2.2.4 转基因植株组织化学染色 | 第20页 |
| 2.2.5 转基因植株Gus酶活测定 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.3.1 OsLatex-1和OsLatex-2启动子克隆 | 第21页 |
| 2.3.2 pOsLatex-gus载体构建及转化水稻 | 第21页 |
| 2.3.3 pOsLatex-gus转基因水稻的检查及分析 | 第21-24页 |
| 第3章 OsLatex启动子转录起始位点及功能元件分析 | 第24-32页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第24页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第24页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 OsLatex启动子转录起始位点 | 第24-25页 |
| 3.2.1.1 水稻RNA的提取 | 第24页 |
| 3.2.1.2 5'-RACE PCR产物扩增 | 第24-25页 |
| 3.2.1.3 5'-RACE产物克隆及测序 | 第25页 |
| 3.2.2 OsLatex功能原件分析 | 第25-26页 |
| 3.2.2.1 启动子序列特征分析 | 第25页 |
| 3.2.2.2 pCXGUS-pOsLatex-1缺失载体构建和转化 | 第25页 |
| 3.2.2.3 转基因植株组织化学染色和Gus酶活测定 | 第25-26页 |
| 3.3 结果与分析 | 第26-31页 |
| 3.3.1 OsLatex启动子转录起始位点确定 | 第26-27页 |
| 3.3.2 pOsLatex-1启动子功能元件的初步分析 | 第27-31页 |
| 小结 | 第31-32页 |
| 第4章 OsLatex-1、OsLatex-2功能初步分析 | 第32-37页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第32页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第32页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 4.2.1 OsLatex-1、OsLatex-2生物信息学分析 | 第32页 |
| 4.2.2 OsLatex-1、OsLatex-2cDNA克隆以及pCXUN过表达载体构建 | 第32页 |
| 4.2.3 HpRNA克隆和pCXUN-HpRNA干扰载体构建 | 第32-33页 |
| 4.2.4 ABA处理转基因植株T1代种子 | 第33页 |
| 4.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 4.3.1 生物信息学分析 | 第33-35页 |
| 4.3.2 HpRNA以及过表达实验分析 | 第35-37页 |
| 第5章 讨论 | 第37-39页 |
| 5.1 胚乳特异性启动子的功能分析 | 第37-38页 |
| 5.2 OsLatex-1、OsLatex-2基因功能研究 | 第38-39页 |
| 后续工作 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录1 PCR扩增引物信息 | 第45-47页 |
| 附录2 OsLatex-1和OsLatex-2CDS序列和编码蛋白序列比较 | 第47-48页 |
| 附录3 pOsLatex-1和pOsLatex-2序列及胚乳特异元件分布 | 第48-50页 |
| 附录4 pCXUN和pCXGUS-P载体图 | 第50-51页 |
| 附录5 实验常用仪器 | 第51-53页 |
| 附录6 常见实验方法 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
