| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 聚γ-谷氨酸的研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1.1 聚γ-谷氨酸简介 | 第11页 |
| 1.1.2 聚γ-谷氨酸合成的微生物 | 第11-12页 |
| 1.1.3 聚γ-谷氨酸合成途径及调控 | 第12-13页 |
| 1.1.4 聚γ-谷氨酸合成的影响因素 | 第13-17页 |
| 1.2 芽胞杆菌利用甘油的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.2.1 芽胞杆菌甘油代谢途径及调控 | 第17-19页 |
| 1.2.3 芽胞杆菌利用甘油发酵的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-30页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第22-24页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第24-28页 |
| 2.1.3 培养基、培养温度及抗生素使用浓度 | 第28-29页 |
| 2.1.4 工具酶和试剂 | 第29页 |
| 2.1.5 抽提液和缓冲液 | 第29-30页 |
| 2.1.6 主要实验仪器 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-39页 |
| 2.2.1 分子水平操作 | 第30-32页 |
| 2.2.2 重组载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.2.3 大肠杆菌重组质粒转化 | 第33-34页 |
| 2.2.4 地衣芽胞杆菌重组质粒转化 | 第34-35页 |
| 2.2.5 地衣芽胞杆菌双交换突变体的获得 | 第35页 |
| 2.2.6 摇瓶发酵培养条件 | 第35-36页 |
| 2.2.7 发酵培养基优化 | 第36-37页 |
| 2.2.8 预处理方法 | 第37页 |
| 2.2.9 分析方法 | 第37-39页 |
| 3 结果与讨论 | 第39-78页 |
| 3.1 HPLC分析甘油方法的建立 | 第39-43页 |
| 3.1.1 不同流动相配比对甘油检测的影响 | 第39-40页 |
| 3.1.2 不同流速对甘油检测的影响 | 第40-41页 |
| 3.1.3 不同柱温对甘油检测的影响 | 第41页 |
| 3.1.4 蒸发光散射检测器条件优化 | 第41-42页 |
| 3.1.5 甘油标准曲线绘制及检出限测定 | 第42页 |
| 3.1.6 精密度试验 | 第42页 |
| 3.1.7 发酵液中甘油含量的检测 | 第42-43页 |
| 3.2 地衣芽胞杆菌利用甘油高产聚γ-谷氨酸摇瓶发酵条件优化 | 第43-53页 |
| 3.2.1 不同甘油浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第43-44页 |
| 3.2.2 不同谷氨酸钠浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.3 不同氯化铵浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第45页 |
| 3.2.5 不同硝酸钠浓度对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第45-47页 |
| 3.2.6 种龄对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.7 接种量对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第48页 |
| 3.2.8 主要成分正交设计 | 第48-50页 |
| 3.2.9 摇瓶发酵过程曲线 | 第50页 |
| 3.2.10 粗甘油为原料发酵聚γ-谷氨酸 | 第50-53页 |
| 3.3 地衣芽胞杆菌甘油代谢途径解析 | 第53-64页 |
| 3.3.1 甘油代谢途径基因敲除质粒的构建 | 第53-59页 |
| 3.3.2 地衣芽胞杆菌系列基因缺失工程菌株的获得 | 第59-62页 |
| 3.3.3 甘油代谢途径基因缺失对甘油代谢的影响 | 第62-64页 |
| 3.4 地衣芽胞杆菌甘油代谢途径改造对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第64-78页 |
| 3.4.1 甘油呼吸途径单基因强化对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第64-69页 |
| 3.4.2 glpFK启动子替换对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第69-74页 |
| 3.4.3 GlpK定点改造对聚γ-谷氨酸发酵的影响 | 第74-78页 |
| 4 结论与展望 | 第78-81页 |
| 4.1 结论 | 第78-79页 |
| 4.2 展望 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
