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解脂耶氏酵母葡萄糖-6-磷酸脱氢酶和苹果酸酶的酶学性质鉴定及功能改造

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 综述第11-29页
    1 解脂耶氏酵母第11-14页
        1.1 解脂耶氏酵母的简介第11-12页
        1.2 解脂耶氏酵母的基本分子生物学特性第12页
        1.3 解脂耶氏酵母的研究现状第12-14页
        1.4 解脂耶氏酵母的优点与局限第14页
    2 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶第14-18页
        2.1 磷酸戊糖途径第14-15页
        2.2 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的简介第15页
        2.3 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的聚合状态和空间结构第15-17页
        2.4 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生化性质第17页
        2.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的研究现状第17-18页
        2.6 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变的研究进展第18页
        2.7 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生物学及医学功能第18页
    3 苹果酸酶第18-22页
        3.1 苹果酸酶简介第18-19页
        3.2 苹果酸酶的生化特性第19页
        3.3 苹果酸酶的聚合形式和空间结构第19-21页
        3.4 苹果酸酶的生物学功能及应用第21-22页
    4 研究的目的和意义第22-23页
    参考文献第23-29页
第二章 解脂耶氏酵母葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生化特性及功能鉴定第29-57页
    1 实验材料和方法第29-42页
        1.1 实验材料第29-32页
        1.2 实验方法第32-42页
    2 野生型YlG6PD实验结果与分析第42-47页
        2.1 基因的克隆和鉴定第42-43页
        2.2 SDS-PAGE和Westernblot分析第43-44页
        2.3 YlG6PD的分子量测定第44-45页
        2.4 YlG6PD的酶学性质第45-47页
    3 YlG6PD的辅酶特异性改造第47-51页
        3.1 G6PD突变位点的选择第47-48页
        3.2 PCR扩增突变基因片段第48-49页
        3.3 融合PCR获得全长突变基因第49页
        3.4 zwf1基因突变体重组质粒的构建及鉴定第49页
        3.5 YlG6PD突变体酶的表达与纯化第49-50页
        3.6 YlG6PD突变体酶的动力学参数分析第50-51页
    4 讨论第51-55页
        4.1 野生型YlG6PD的酶学性质分析与讨论第51-52页
        4.2 YlG6PD突变体酶的实验结果分析与讨论第52-55页
    参考文献第55-57页
第三章 解脂耶氏酵母苹果酸酶的生化特性及功能鉴定第57-74页
    1 实验材料和方法第57-61页
        1.1 实验材料第57-58页
        1.2 实验方法第58-61页
    2 野生型YlME实验结果第61-65页
        2.1 YlME基因的克隆和鉴定第61页
        2.2 YlME的SDS-PAGE和Westernblot分析第61-62页
        2.3 YlME的分子量测定第62-63页
        2.4 YlME的酶学性质第63-65页
    3 YlME的辅酶特异性改造第65-68页
        3.1 YlME突变位点的选择第65-66页
        3.2 PCR扩增YlME突变基因片段第66页
        3.3 融合PCR获得全长YlME突变基因第66-67页
        3.4 突变体酶重组表达质粒的构建及鉴定第67页
        3.5 突变体酶M388V/P391K的表达与纯化第67-68页
        3.6 突变体酶M388V/P391K的动力学参数第68页
    4 讨论第68-71页
        4.1 野生型YlME的酶学性质分析第69-70页
        4.2 YlME突变体酶M388V/P391K的结果分析与讨论第70-71页
    参考文献第71-74页
致谢第74-75页
第75页

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