摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 综述 | 第11-29页 |
1 解脂耶氏酵母 | 第11-14页 |
1.1 解脂耶氏酵母的简介 | 第11-12页 |
1.2 解脂耶氏酵母的基本分子生物学特性 | 第12页 |
1.3 解脂耶氏酵母的研究现状 | 第12-14页 |
1.4 解脂耶氏酵母的优点与局限 | 第14页 |
2 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 | 第14-18页 |
2.1 磷酸戊糖途径 | 第14-15页 |
2.2 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的简介 | 第15页 |
2.3 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的聚合状态和空间结构 | 第15-17页 |
2.4 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生化性质 | 第17页 |
2.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的研究现状 | 第17-18页 |
2.6 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变的研究进展 | 第18页 |
2.7 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生物学及医学功能 | 第18页 |
3 苹果酸酶 | 第18-22页 |
3.1 苹果酸酶简介 | 第18-19页 |
3.2 苹果酸酶的生化特性 | 第19页 |
3.3 苹果酸酶的聚合形式和空间结构 | 第19-21页 |
3.4 苹果酸酶的生物学功能及应用 | 第21-22页 |
4 研究的目的和意义 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-29页 |
第二章 解脂耶氏酵母葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的生化特性及功能鉴定 | 第29-57页 |
1 实验材料和方法 | 第29-42页 |
1.1 实验材料 | 第29-32页 |
1.2 实验方法 | 第32-42页 |
2 野生型YlG6PD实验结果与分析 | 第42-47页 |
2.1 基因的克隆和鉴定 | 第42-43页 |
2.2 SDS-PAGE和Westernblot分析 | 第43-44页 |
2.3 YlG6PD的分子量测定 | 第44-45页 |
2.4 YlG6PD的酶学性质 | 第45-47页 |
3 YlG6PD的辅酶特异性改造 | 第47-51页 |
3.1 G6PD突变位点的选择 | 第47-48页 |
3.2 PCR扩增突变基因片段 | 第48-49页 |
3.3 融合PCR获得全长突变基因 | 第49页 |
3.4 zwf1基因突变体重组质粒的构建及鉴定 | 第49页 |
3.5 YlG6PD突变体酶的表达与纯化 | 第49-50页 |
3.6 YlG6PD突变体酶的动力学参数分析 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-55页 |
4.1 野生型YlG6PD的酶学性质分析与讨论 | 第51-52页 |
4.2 YlG6PD突变体酶的实验结果分析与讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-57页 |
第三章 解脂耶氏酵母苹果酸酶的生化特性及功能鉴定 | 第57-74页 |
1 实验材料和方法 | 第57-61页 |
1.1 实验材料 | 第57-58页 |
1.2 实验方法 | 第58-61页 |
2 野生型YlME实验结果 | 第61-65页 |
2.1 YlME基因的克隆和鉴定 | 第61页 |
2.2 YlME的SDS-PAGE和Westernblot分析 | 第61-62页 |
2.3 YlME的分子量测定 | 第62-63页 |
2.4 YlME的酶学性质 | 第63-65页 |
3 YlME的辅酶特异性改造 | 第65-68页 |
3.1 YlME突变位点的选择 | 第65-66页 |
3.2 PCR扩增YlME突变基因片段 | 第66页 |
3.3 融合PCR获得全长YlME突变基因 | 第66-67页 |
3.4 突变体酶重组表达质粒的构建及鉴定 | 第67页 |
3.5 突变体酶M388V/P391K的表达与纯化 | 第67-68页 |
3.6 突变体酶M388V/P391K的动力学参数 | 第68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
4.1 野生型YlME的酶学性质分析 | 第69-70页 |
4.2 YlME突变体酶M388V/P391K的结果分析与讨论 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附 | 第75页 |