摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
符号说明 | 第18-19页 |
第一章 绪论 | 第19-29页 |
1.1 引言 | 第19页 |
1.2 酶的研究进展 | 第19-23页 |
1.2.1 碱性蛋白酶 | 第19-20页 |
1.2.1.1 碱性蛋白酶简介 | 第19-20页 |
1.2.1.2 碱性蛋白酶的应用 | 第20页 |
1.2.2 葡萄糖氧化酶 | 第20-22页 |
1.2.2.1 葡萄糖氧化酶简介 | 第20-21页 |
1.2.2.2 葡萄糖氧化酶应用 | 第21-22页 |
1.2.3 辣根过氧化物酶 | 第22-23页 |
1.2.3.1 辣根过氧化物酶简介 | 第22-23页 |
1.2.3.2 辣根过氧化物酶应用 | 第23页 |
1.3 酶的固定化 | 第23-26页 |
1.3.1 酶-无机杂化纳米材料 | 第24页 |
1.3.2 磁性纳米复合材料 | 第24-25页 |
1.3.3 金属-有机杂化纳米材料 | 第25-26页 |
1.4 本课题研究的意义及主要内容 | 第26-29页 |
1.4.1 本课题研究的意义 | 第26页 |
1.4.2 本课题研究内容 | 第26-29页 |
第二章 酶-无机杂化纳米材料固定碱性蛋白酶 | 第29-49页 |
2.1 实验材料与方法 | 第30-31页 |
2.1.1 实验材料 | 第30页 |
2.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-35页 |
2.2.1 固定化酶的制备 | 第31页 |
2.2.2 酶固载率测定 | 第31-32页 |
2.2.3 水解活性测定 | 第32页 |
2.2.4 透射电镜和扫描电镜测定 | 第32页 |
2.2.5 红外光谱分析测定 | 第32-33页 |
2.2.6 二级结构测定 | 第33页 |
2.2.7 X射线衍射测定 | 第33页 |
2.2.8 碱性蛋白酶稳定性测试 | 第33页 |
2.2.9 碱性蛋白酶重复使用次数 | 第33页 |
2.2.10 碱性蛋白酶动力学参数 | 第33-34页 |
2.2.11 酶水解物分子量分布 | 第34页 |
2.2.12 抗氧化能力的测定 | 第34页 |
2.2.13 钙离子螯合能力的测定 | 第34-35页 |
2.2.14 溶解度的测定 | 第35页 |
2.3 结果讨论 | 第35-47页 |
2.3.1 透射电镜和扫描电镜表征分析 | 第35-36页 |
2.3.2 红外光谱分析 | 第36-37页 |
2.3.3 二级结构分析 | 第37页 |
2.3.4 X射线衍射分析 | 第37-38页 |
2.3.5 牛血清蛋白标准曲线 | 第38-39页 |
2.3.6 碱性蛋白酶固定化条件优化 | 第39-41页 |
2.3.6.1 加酶量对固定率的影响 | 第39页 |
2.3.6.2 溶液pH对固定率的影响 | 第39-40页 |
2.3.6.3 离子强度对固载率的影响 | 第40-41页 |
2.3.6.4 最佳固定化参数 | 第41页 |
2.3.7 水解活性分析 | 第41-42页 |
2.3.8 碱性蛋白酶动力学参数 | 第42-43页 |
2.3.9 大豆水解物分析 | 第43页 |
2.3.10 稳定性分析 | 第43-45页 |
2.3.11 重复使用次数 | 第45页 |
2.3.12 固定化酶和游离酶水解物的性质 | 第45-47页 |
2.4 本章小结 | 第47-49页 |
第三章 磁性纳米复合材料共固定葡萄糖氧化酶&辣根过氧化物酶 | 第49-65页 |
3.1 实验材料和仪器 | 第50-51页 |
3.1.1 实验材料 | 第50-51页 |
3.1.2 实验仪器 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-55页 |
3.2.1 固定化酶的制备 | 第51-52页 |
3.2.1.1 固定化单酶的制备 | 第51-52页 |
3.2.1.2 固定化双酶的制备 | 第52页 |
3.2.2 固载率测定 | 第52页 |
3.2.3 酶活测定 | 第52-53页 |
3.2.3.1 葡萄糖氧化酶活性测定 | 第52-53页 |
3.2.3.2 辣根过氧化物酶活性测定 | 第53页 |
3.2.3.3 脂肪酶活性测定 | 第53页 |
3.2.3.4 双酶活性测定 | 第53页 |
3.2.4 磁响应实验 | 第53页 |
3.2.5 表征实验 | 第53-54页 |
3.2.6 动力学参数 | 第54页 |
3.2.7 稳定性实验 | 第54页 |
3.2.8 重复使用次数 | 第54页 |
3.2.9 葡萄糖检测 | 第54-55页 |
3.3 结果与分析 | 第55-63页 |
3.3.1 透射电镜分析 | 第55页 |
3.3.2 红外光谱分析 | 第55-56页 |
3.3.3 X射线衍射分析 | 第56-57页 |
3.3.4 固载率分析 | 第57-58页 |
3.3.5 单酶酶活分析 | 第58页 |
3.3.6 双酶活性分析 | 第58-60页 |
3.3.6.1 双酶比例不同对酶活性的影响 | 第59页 |
3.3.6.2 酶的加入顺序对酶活性的影响 | 第59-60页 |
3.3.7 动力学参数 | 第60-61页 |
3.3.8 稳定性 | 第61-62页 |
3.3.9 重复使用次数 | 第62页 |
3.3.10 葡萄糖检测 | 第62-63页 |
3.4 本章小结 | 第63-65页 |
第四章 金属-有机杂化材料共固定葡萄糖氧化酶&辣根过氧化物酶 | 第65-79页 |
4.1 实验材料和仪器 | 第66-67页 |
4.1.1 实验材料 | 第66-67页 |
4.1.2 实验仪器 | 第67页 |
4.2 实验方法 | 第67-70页 |
4.2.1 固定化酶的制备 | 第67-68页 |
4.2.2 固载率测定 | 第68页 |
4.2.3 酶活测定 | 第68页 |
4.2.3.1 葡萄糖氧化酶活性测定 | 第68页 |
4.2.3.2 辣根过氧化物酶活性测定 | 第68页 |
4.2.3.3 脂肪酶活性测定 | 第68页 |
4.2.3.4 双酶活性测定 | 第68页 |
4.2.4 表征实验 | 第68-69页 |
4.2.5 稳定性实验 | 第69页 |
4.2.6 重复使用次数 | 第69页 |
4.2.7 葡萄糖检测 | 第69-70页 |
4.3 结果与分析 | 第70-76页 |
4.3.1 透射电镜和扫描电镜表征 | 第70页 |
4.3.2 红外光谱分析 | 第70-71页 |
4.3.3 固定化酶制备条件优化 | 第71-72页 |
4.3.4 酶活分析 | 第72-73页 |
4.3.5 酶稳定性分析 | 第73-75页 |
4.3.6 重复使用次数 | 第75页 |
4.3.7 葡萄糖检测 | 第75-76页 |
4.4 本章小结 | 第76-79页 |
第五章 结论与展望 | 第79-81页 |
5.1 结论 | 第79-80页 |
5.2 展望 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
致谢 | 第87-89页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第89-91页 |
作者及导师简介 | 第91-92页 |
附表 | 第92-93页 |