| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第12-27页 |
| 1 斑马鱼 | 第12-18页 |
| 1.1 斑马鱼 | 第12-13页 |
| 1.2 斑马鱼的内耳和侧线系统 | 第13-18页 |
| 1.2.1 斑马鱼的内耳 | 第13-15页 |
| 1.2.2 斑马鱼的侧线系统 | 第15-18页 |
| 1.3 斑马鱼在听力中的研究应用 | 第18页 |
| 2 线粒体 | 第18-22页 |
| 2.1 线粒体的形态结构 | 第18-19页 |
| 2.2 线粒体的功能 | 第19页 |
| 2.3 线粒体与疾病 | 第19-22页 |
| 3 耳聋 | 第22-25页 |
| 3.1 耳聋的定义和分类 | 第22-23页 |
| 3.2 感音神经性耳聋 | 第23页 |
| 3.3 耳毒性耳聋 | 第23-24页 |
| 3.4 耳毒性耳聋的发病机理 | 第24-25页 |
| 4 斑马鱼trmu | 第25-26页 |
| 5 本课题的研究思路 | 第26-27页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第27-44页 |
| 2.1 试剂和仪器 | 第27-30页 |
| 2.1.1 生化试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.2 抗体和染色液 | 第28-29页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2 试剂配制 | 第30-31页 |
| 2.2.1 egg water的配制 | 第30页 |
| 2.2.2 larve water的配制 | 第30-31页 |
| 2.2.3 E_3 medium的配制 | 第31页 |
| 2.2.4 斑马鱼鉴定裂解缓冲液的配制 | 第31页 |
| 2.2.5 固定剂、脱钙液、以及通透试剂的配制 | 第31页 |
| 2.3 其他试剂的配制 | 第31-32页 |
| 2.4 实验方法 | 第32-35页 |
| 2.4.1 斑马鱼的饲养、鉴定、交配以及受精卵的收集 | 第32-33页 |
| 2.4.2 丰年虾的孵化 | 第33页 |
| 2.4.3 斑马鱼鉴定裂解 | 第33-34页 |
| 2.4.4 斑马鱼交配和受精卵的收集 | 第34-35页 |
| 2.5 trmu敲除的斑马鱼的鉴定 | 第35页 |
| 2.5.1 斑马鱼PCR鉴定 | 第35页 |
| 2.6 斑马鱼Western blot检测 | 第35-37页 |
| 2.6.1 斑马鱼蛋白样品的制备 | 第35-36页 |
| 2.6.2 斑马鱼蛋白Western blot | 第36-37页 |
| 2.6.3 电泳 | 第37页 |
| 2.6.4 转膜 | 第37页 |
| 2.6.5 孵育一抗、二抗、显影与定量 | 第37页 |
| 2.7 斑马鱼内耳 | 第37-39页 |
| 2.7.1 斑马鱼内耳解剖 | 第37-38页 |
| 2.7.2 斑马鱼内耳毛细胞染色 | 第38页 |
| 2.7.3 斑马鱼内耳透射电镜样本制备 | 第38-39页 |
| 2.7.4 小鱼期斑马鱼内耳毛细胞透射电镜观察 | 第39页 |
| 2.8 斑马鱼内耳免疫荧光染色 | 第39-40页 |
| 2.8.1 冷冻切片 | 第39页 |
| 2.8.2 免疫荧光染色 | 第39-40页 |
| 2.9 斑马鱼全鱼原位杂交和切片原位杂交 | 第40-41页 |
| 2.10 小鱼期斑马鱼FM1-43FX染色 | 第41-43页 |
| 2.10.1 小鱼期斑马鱼FM1-43FX染色后统计神经丘数目 | 第42页 |
| 2.10.2 小鱼期斑马鱼FM1-43FX染色后毛细胞数目 | 第42-43页 |
| 2.11 小鱼期斑马鱼DASPEI染色 | 第43页 |
| 2.12 小鱼期斑马鱼ATP检测 | 第43页 |
| 2.13 斑马鱼ROS检测 | 第43-44页 |
| 第3章 实验结果 | 第44-65页 |
| 3.1 Trmu保守性分析 | 第44-46页 |
| 3.2 斑马鱼原位杂交 | 第46-48页 |
| 3.2.1 斑马鱼全鱼原位杂交(W-ISH) | 第46-47页 |
| 3.2.2 斑马鱼内耳切片原位杂交 | 第47-48页 |
| 3.3 trmu敲除的斑马鱼的鉴定 | 第48-50页 |
| 3.3.1 trmu基因敲除的斑马鱼的构建 | 第48页 |
| 3.3.2 trmu基因敲除的斑马鱼的鉴定 | 第48-50页 |
| 3.4 斑马鱼Trmu与内耳毛细胞共定位 | 第50页 |
| 3.5 Trmu敲除导致斑马鱼线粒体功能受损 | 第50-53页 |
| 3.5.1 Trmu敲除导致斑马鱼线粒体ATP下降 | 第50-51页 |
| 3.5.2 Trmu敲除导致斑马鱼ROS上升 | 第51-52页 |
| 3.5.3 Trmu敲除导致线粒体SDH和COX酶活下降 | 第52-53页 |
| 3.6 成年斑马鱼内耳毛细胞染色 | 第53-58页 |
| 3.6.1 斑马鱼球囊(Saccule)毛细胞数目统计 | 第53-54页 |
| 3.6.2 斑马鱼椭圆囊(Utricle)毛细胞数目统计 | 第54-56页 |
| 3.6.3 斑马鱼瓶状囊(Lagena)毛细胞数目统计 | 第56-58页 |
| 3.7 斑马鱼毛细胞透射电镜观察 | 第58-59页 |
| 3.8 小鱼期斑马鱼侧线神经丘数目统计 | 第59-60页 |
| 3.9 小鱼期斑马鱼侧线神经丘毛细胞数目统计 | 第60-62页 |
| 3.10 小鱼期斑马鱼神经丘毛细胞线粒体膜电势分析 | 第62-64页 |
| 3.11 小鱼期斑马鱼毛细胞线粒体电镜观察 | 第64-65页 |
| 第4章 小结和讨论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 作者简介 | 第74页 |
