| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-24页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第14页 |
| 1.2 卵泡发育和排卵过程及其调控 | 第14-15页 |
| 1.3 卵巢颗粒细胞与卵泡发育 | 第15-16页 |
| 1.3.1 卵巢颗粒细胞增殖分化与卵泡发育 | 第15-16页 |
| 1.3.2 卵巢颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁 | 第16页 |
| 1.4 卵泡发育和排卵过程相关细胞信号通路研究进展 | 第16-20页 |
| 1.4.1 TGF-β | 第16-17页 |
| 1.4.2 ERK1/2 | 第17-18页 |
| 1.4.3 PI3K/PTEN/AKT | 第18-20页 |
| 1.5 排卵过程中关键基因 | 第20-21页 |
| 1.5.1 LHR | 第20页 |
| 1.5.2 CYP19A1 | 第20页 |
| 1.5.3 EGF | 第20-21页 |
| 1.6 IFITM1研究进展及功能 | 第21-23页 |
| 1.6.1 IFITM1基因概述 | 第21页 |
| 1.6.2 IFITM1主要功能 | 第21-23页 |
| 1.7 目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1 组织样品 | 第24页 |
| 2.2 实验动物 | 第24页 |
| 2.3 菌株、载体 | 第24页 |
| 2.4 主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| 2.5 实验试剂、试剂盒与耗材 | 第25-26页 |
| 2.6 常用试剂及配制 | 第26-27页 |
| 2.7 生物信息学网站及分析软件 | 第27-28页 |
| 3 试验方法 | 第28-42页 |
| 3.1 细胞的分离、复苏、培养与冻存 | 第28-29页 |
| 3.1.1 小鼠卵巢颗粒细胞的分离 | 第28页 |
| 3.1.2 细胞的复苏 | 第28页 |
| 3.1.3 细胞的培养 | 第28-29页 |
| 3.1.4 细胞的冻存 | 第29页 |
| 3.2 细胞的转染 | 第29-30页 |
| 3.2.1 siRNA的转染 | 第29页 |
| 3.2.3 质粒的转染 | 第29-30页 |
| 3.3 通路抑制剂处理 | 第30页 |
| 3.4 细胞总RNA提取 | 第30-31页 |
| 3.5 cDNA的制备 | 第31页 |
| 3.6 实时荧光定量PCR检测基因mRNA的表达水平 | 第31-33页 |
| 3.7 细胞总蛋白提取 | 第33页 |
| 3.8 蛋白浓度的测定 | 第33-34页 |
| 3.9 Western blot | 第34-35页 |
| 3.10 基因真核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 3.11 RNAi | 第37-38页 |
| 3.12 细胞增殖检测方法 | 第38-40页 |
| 3.12.1 MTT法检测细胞增殖 | 第38页 |
| 3.12.2 EDU法检测细胞增殖 | 第38-39页 |
| 3.12.3 CCK8法检测细胞增殖 | 第39-40页 |
| 3.13 流式细胞仪检测细胞周期 | 第40页 |
| 3.14 ELISA分析 | 第40-41页 |
| 3.15 数据分析 | 第41-42页 |
| 4 结果与分析 | 第42-55页 |
| 4.1 IFITM1基因在大白猪和太湖猪排卵前卵泡组织中差异表达 | 第42页 |
| 4.2 IFITM1基因对卵泡排卵的影响 | 第42-46页 |
| 4.2.1 卵巢颗粒细胞中超表达、抑制表达IFITM1基因 | 第42-45页 |
| 4.2.2 IFITM1基因对排卵标记基因的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 IFITM1基因影响排卵标记基因表达的机制 | 第46-48页 |
| 4.4 IFITM1基因对卵巢颗粒细胞分泌孕酮的影响 | 第48-50页 |
| 4.5 IFITM1基因对卵巢颗粒细胞生长的影响 | 第50-55页 |
| 4.5.1 IFITM1基因对卵巢颗粒细胞周期的影响 | 第50-53页 |
| 4.5.2 IFITM1基因对卵巢颗粒细胞增殖的影响 | 第53-55页 |
| 5 讨论 | 第55-58页 |
| 5.1 IFITM1基因与卵泡发育及排卵 | 第55-56页 |
| 5.2 IFITM1基因与卵巢颗粒细胞生长 | 第56-57页 |
| 5.3 IFITM1基因与PI3K/AKT信号通路 | 第57-58页 |
| 6 全文结论 | 第58页 |
| 7 创新与不足 | 第58-59页 |
| 7.1 创新之处 | 第58页 |
| 7.2 不足之处 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
