摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-34页 |
1.1 线粒体动态分子机制研究进展 | 第16-21页 |
1.1.1 线粒体融合蛋白及其调控机制 | 第16-17页 |
1.1.2 线粒体分裂蛋白及其调控机制 | 第17-21页 |
1.2 线粒体自噬研究进展 | 第21-26页 |
1.2.1 酵母细胞中的线粒体自噬 | 第21-22页 |
1.2.2 哺乳动物细胞中的线粒体自噬 | 第22-26页 |
1.3 线粒体与病毒感染 | 第26-30页 |
1.3.1 线粒体与天然免疫 | 第26-27页 |
1.3.2 线粒体稳态与病毒感染 | 第27-29页 |
1.3.3 线粒体DNA与病毒感染 | 第29-30页 |
1.4 线粒体在调控PRRSV感染中的研究进展 | 第30-31页 |
1.5 猪抗病遗传育种研究进展 | 第31-34页 |
第二章 研究的目的与意义 | 第34-35页 |
第三章 研究材料与方法 | 第35-52页 |
3.1 试验材料 | 第35-38页 |
3.1.1 细胞系及病毒来源 | 第35页 |
3.1.2 主要分子生物学试剂、引物合成与测序 | 第35页 |
3.1.3 细胞培养主要试剂和耗材 | 第35页 |
3.1.4 抗体 | 第35-36页 |
3.1.5 用于细胞培养的试剂制备 | 第36页 |
3.1.6 其他临时配用试剂 | 第36-38页 |
3.2 主要仪器设备 | 第38-39页 |
3.3 研究方法 | 第39-52页 |
3.3.1 表达质粒的构建 | 第39-42页 |
3.3.2 Marc145细胞总RNA提取 | 第42页 |
3.3.3 逆转录反应 | 第42-43页 |
3.3.4 线粒体拷贝数的检测 | 第43-44页 |
3.3.5 PRRSV感染后相关基因表达分析 | 第44-46页 |
3.3.6 相关基因蛋白水平的分析 | 第46-47页 |
3.3.7 siRNA及质粒转染 | 第47-48页 |
3.3.8 PRRSV感染后线粒体自噬分析 | 第48-49页 |
3.3.9 透射电镜试验 | 第49-50页 |
3.3.10 细胞线粒体的分离 | 第50页 |
3.3.11 台盼蓝染色试验 | 第50-51页 |
3.3.12 流式细胞仪分析细胞凋亡 | 第51页 |
3.3.13 Caspase3活性检测 | 第51-52页 |
第四章 研究结果及讨论 | 第52-77页 |
4.1 线粒体分裂关键蛋白在抗PRRSV感染中的作用及机理研究 | 第52-62页 |
4.1.1 PRRSV感染引起宿主细胞线粒体发生分裂 | 第52-53页 |
4.1.2 线粒体的拷贝数在PRRSV感染后降低 | 第53-55页 |
4.1.3 线粒体分裂因子Drp1在PRRSV感染后其Ser616位点发生磷酸化 | 第55-57页 |
4.1.4 p-Drp1(Ser616)在PRRSV感染后发生线粒体转位 | 第57-58页 |
4.1.5 干扰Drp1能够抑制PRRSV感染 | 第58-59页 |
4.1.6 干扰Drp1能够加强PRRSV引起的细胞凋亡 | 第59-62页 |
4.2 讨论 | 第62-65页 |
4.2.1 PRRSV感染引起宿主细胞发生线粒体分裂 | 第63-64页 |
4.2.2 线粒体发生分裂抑制细胞凋亡促进PRRSV感染 | 第64-65页 |
4.3 线粒体自噬关键蛋白在抗PRRSV感染中的作用及机理研究 | 第65-73页 |
4.3.1 PRRSV感染能够引起宿主细胞发生线粒体自噬 | 第65-69页 |
4.3.2 PRRSV感染引起宿主细胞线粒体自噬体与溶酶体的融合 | 第69-70页 |
4.3.3 干扰Parkin增加线粒体拷贝数并抑制PRRSV感染 | 第70-72页 |
4.3.4 干扰Parkin能够加强PRRSV诱导的细胞凋亡 | 第72-73页 |
4.4 讨论 | 第73-77页 |
4.4.1 PRRSV感染能够引起宿主细胞发生线粒体自噬 | 第75-76页 |
4.4.2 线粒体自噬抑制PRRSV诱导的细胞凋亡 | 第76-77页 |
第五章 结论 | 第77-79页 |
5.1 创新 | 第78页 |
5.2 不足之处及下一步研究计划 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
附录 :在校期间发表的文章 | 第99-100页 |