致谢 | 第6-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 绪论 | 第13-25页 |
1.1 细菌的鞭毛 | 第13-18页 |
1.1.1 鞭毛的结构及组装 | 第13-17页 |
1.1.2 鞭毛的表达调控 | 第17-18页 |
1.2 鞭毛丝亚基蛋白O-linked的糖基化修饰 | 第18-21页 |
1.2.1 鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰 | 第18-19页 |
1.2.2 鞭毛丝亚基蛋白O-linked的糖基修饰的位点、糖基的作用及糖基的成分 | 第19-21页 |
1.3 鞭毛的分泌系统 | 第21页 |
1.4 鞭毛与外界环境的互作 | 第21-22页 |
1.5 质谱分析 | 第22-23页 |
1.6 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰 | 第23页 |
1.7 本论文的主要内容和研究意义 | 第23-25页 |
2 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰 | 第25-53页 |
2.1 材料和方法 | 第27-30页 |
2.1.1 菌株,质粒,PCR引物和培养条件 | 第27页 |
2.1.2 构建和回补框内缺失的突变株 | 第27-28页 |
2.1.3 构建定点突变的突变株 | 第28页 |
2.1.4 突变株生理学特性的检测 | 第28页 |
2.1.5 电子显微镜观察 | 第28页 |
2.1.6 提取和纯化鞭毛丝亚基蛋白 | 第28-29页 |
2.1.7 SDS-PAGE和免疫印迹分析 | 第29页 |
2.1.8 质谱分析 | 第29-30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-51页 |
2.2.1 质谱分析鞭毛丝亚基蛋白的胰蛋白酶消化产物 | 第30-44页 |
2.2.2 半胱氨酸扫描分析鞭毛丝亚基蛋白潜在的糖基化位点 | 第44-48页 |
2.2.3 甲基化不影响鞭毛的运动性和组装 | 第48-51页 |
2.3 讨论 | 第51-53页 |
3 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白FlaA与FlaB的功能差异 | 第53-79页 |
3.1 材料和方法 | 第56-59页 |
3.1.1 β-半乳糖苷酶活性检测 | 第56-57页 |
3.1.2 用flaB的启动子替换flaA的启动子 | 第57页 |
3.1.3 Yersinia enterocolitica中YplA融合蛋白分泌分析 | 第57-58页 |
3.1.4 FlaA与FlaB差异位点的互换 | 第58-59页 |
3.1.5 FlaB的功能分析 | 第59页 |
3.2 结果与分析 | 第59-76页 |
3.2.0 flaA的启动子是由rpoN(σ~(54))转录调控 | 第59-60页 |
3.2.1 用flaB的启动子替换flaA的启动子没有改变其运动性 | 第60-62页 |
3.2.2 FlaA与FlaB分泌及组装过程相似 | 第62-65页 |
3.2.3 125-141区的差异影响着FlaA与FlaB的功能差异 | 第65-73页 |
3.2.4 FlaB中L4环的重要性 | 第73-75页 |
3.2.5 FlaB中179位点的重要性 | 第75-76页 |
3.3 讨论 | 第76-79页 |
4 结论 | 第79-83页 |
4.1 主要研究成果 | 第79-80页 |
4.2 创新点 | 第80-81页 |
4.3 不足与展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-95页 |
附表1 | 第95-97页 |
附表2 | 第97-103页 |
附图1 | 第103-104页 |
附录 | 第104页 |