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Shewanella oneidensis鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰及FlaA和FlaB功能差异研究

致谢第6-9页
摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 绪论第13-25页
    1.1 细菌的鞭毛第13-18页
        1.1.1 鞭毛的结构及组装第13-17页
        1.1.2 鞭毛的表达调控第17-18页
    1.2 鞭毛丝亚基蛋白O-linked的糖基化修饰第18-21页
        1.2.1 鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰第18-19页
        1.2.2 鞭毛丝亚基蛋白O-linked的糖基修饰的位点、糖基的作用及糖基的成分第19-21页
    1.3 鞭毛的分泌系统第21页
    1.4 鞭毛与外界环境的互作第21-22页
    1.5 质谱分析第22-23页
    1.6 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰第23页
    1.7 本论文的主要内容和研究意义第23-25页
2 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白的翻译后修饰第25-53页
    2.1 材料和方法第27-30页
        2.1.1 菌株,质粒,PCR引物和培养条件第27页
        2.1.2 构建和回补框内缺失的突变株第27-28页
        2.1.3 构建定点突变的突变株第28页
        2.1.4 突变株生理学特性的检测第28页
        2.1.5 电子显微镜观察第28页
        2.1.6 提取和纯化鞭毛丝亚基蛋白第28-29页
        2.1.7 SDS-PAGE和免疫印迹分析第29页
        2.1.8 质谱分析第29-30页
    2.2 结果与分析第30-51页
        2.2.1 质谱分析鞭毛丝亚基蛋白的胰蛋白酶消化产物第30-44页
        2.2.2 半胱氨酸扫描分析鞭毛丝亚基蛋白潜在的糖基化位点第44-48页
        2.2.3 甲基化不影响鞭毛的运动性和组装第48-51页
    2.3 讨论第51-53页
3 S.oneidensis鞭毛丝亚基蛋白FlaA与FlaB的功能差异第53-79页
    3.1 材料和方法第56-59页
        3.1.1 β-半乳糖苷酶活性检测第56-57页
        3.1.2 用flaB的启动子替换flaA的启动子第57页
        3.1.3 Yersinia enterocolitica中YplA融合蛋白分泌分析第57-58页
        3.1.4 FlaA与FlaB差异位点的互换第58-59页
        3.1.5 FlaB的功能分析第59页
    3.2 结果与分析第59-76页
        3.2.0 flaA的启动子是由rpoN(σ~(54))转录调控第59-60页
        3.2.1 用flaB的启动子替换flaA的启动子没有改变其运动性第60-62页
        3.2.2 FlaA与FlaB分泌及组装过程相似第62-65页
        3.2.3 125-141区的差异影响着FlaA与FlaB的功能差异第65-73页
        3.2.4 FlaB中L4环的重要性第73-75页
        3.2.5 FlaB中179位点的重要性第75-76页
    3.3 讨论第76-79页
4 结论第79-83页
    4.1 主要研究成果第79-80页
    4.2 创新点第80-81页
    4.3 不足与展望第81-83页
参考文献第83-95页
附表1第95-97页
附表2第97-103页
附图1第103-104页
附录第104页

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