| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-20页 |
| 前言 | 第21-30页 |
| 第一章 MERS DNA疫苗的构建与免疫原性评价 | 第30-48页 |
| 1.1 材料 | 第30-32页 |
| 1.1.1 细菌、质粒与细胞 | 第30-31页 |
| 1.1.2 蛋白 | 第31页 |
| 1.1.3 抗体 | 第31页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第31页 |
| 1.1.5 仪器设备 | 第31-32页 |
| 1.1.6 溶液配制 | 第32页 |
| 1.1.7 实验动物 | 第32页 |
| 1.2 方法 | 第32-40页 |
| 1.2.1 编码不同长度MERS-CoVS蛋白基因的重组质粒的构建与鉴定 | 第32-34页 |
| 1.2.2 DNA疫苗的大量制备与蛋白表达鉴定 | 第34-36页 |
| 1.2.3 小鼠免疫试验 | 第36-40页 |
| 1.2.4 攻毒保护试验 | 第40页 |
| 1.3 结果 | 第40-46页 |
| 1.3.1 MERS-CoVS、SΔCD和S1基因的扩增 | 第40-41页 |
| 1.3.2 重组质粒的鉴定 | 第41页 |
| 1.3.3 重组质粒转染哺乳动物细胞蛋白表达的Werstern Blot鉴定 | 第41-42页 |
| 1.3.4 小鼠免疫试验结果 | 第42-45页 |
| 1.3.5 小鼠攻毒试验结果 | 第45-46页 |
| 1.4 讨论 | 第46-47页 |
| 1.5 小结 | 第47-48页 |
| 第二章 表达MERS-CoV S1蛋白的重组狂犬病病毒的构建与鉴定 | 第48-65页 |
| 2.1 材料 | 第48-49页 |
| 2.1.1 细菌、质粒与细胞 | 第48页 |
| 2.1.2 抗体 | 第48-49页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第49页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第49页 |
| 2.1.5 仪器设备 | 第49页 |
| 2.1.6 溶液配制 | 第49页 |
| 2.2 方法 | 第49-57页 |
| 2.2.1 MERS-CoVS蛋白基因特征分析与基因合成 | 第49-50页 |
| 2.2.2 重组RABV感染性克隆的构建策略 | 第50页 |
| 2.2.3 引物的设计和合成 | 第50-51页 |
| 2.2.4 目的基因的扩增及回收 | 第51页 |
| 2.2.5 酶切、连接、转化和重组质粒的提取 | 第51页 |
| 2.2.6 重组病毒的拯救与鉴定 | 第51-56页 |
| 2.2.7 重组狂犬病病毒的特性研究 | 第56-57页 |
| 2.2.8 重组狂犬病病毒的神经毒性研究 | 第57页 |
| 2.3 结果 | 第57-63页 |
| 2.3.1 重组RABV感染性克隆的构建及鉴定 | 第57-58页 |
| 2.3.2 重组病毒的拯救与鉴定 | 第58-61页 |
| 2.3.3 重组狂犬病病毒的特性 | 第61-62页 |
| 2.3.4 重组狂犬病病毒的神经毒性 | 第62-63页 |
| 2.4 讨论 | 第63-64页 |
| 2.5 小结 | 第64-65页 |
| 第三章 MERS-CoV重组狂犬病病毒载体疫苗的实验免疫研究 | 第65-82页 |
| 3.1 材料 | 第65-66页 |
| 3.1.1 细菌、质粒与细胞 | 第65页 |
| 3.1.2 抗体 | 第65页 |
| 3.1.3 病毒和血清 | 第65-66页 |
| 3.1.4 多肽 | 第66页 |
| 3.1.5 主要试剂 | 第66页 |
| 3.1.6 仪器设备 | 第66页 |
| 3.1.7 溶液配制 | 第66页 |
| 3.1.8 实验动物 | 第66页 |
| 3.2 方法 | 第66-73页 |
| 3.2.1 疫苗免疫原性的初步评价及疫苗使用形式的确定 | 第66-67页 |
| 3.2.2 小鼠免疫试验 | 第67-71页 |
| 3.2.3 羊驼免疫试验 | 第71-72页 |
| 3.2.4 骆驼免疫试验 | 第72-73页 |
| 3.3 结果 | 第73-80页 |
| 3.3.1 疫苗免疫原性的初步评价及疫苗使用形式的确定 | 第73页 |
| 3.3.2 小鼠免疫试验结果 | 第73-77页 |
| 3.3.3 羊驼免疫试验结果 | 第77-79页 |
| 3.3.4 骆驼免疫试验结果 | 第79-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-81页 |
| 3.5 小结 | 第81-82页 |
| 第四章 联合免疫策略对MERS疫苗免疫效果的影响 | 第82-96页 |
| 4.1 材料 | 第82-83页 |
| 4.1.1 细菌、质粒与细胞 | 第82页 |
| 4.1.2 抗体 | 第82页 |
| 4.1.3 多肽 | 第82页 |
| 4.1.4 主要试剂 | 第82页 |
| 4.1.5 仪器设备 | 第82-83页 |
| 4.1.6 溶液配制 | 第83页 |
| 4.1.7 免疫原 | 第83页 |
| 4.2 方法 | 第83-85页 |
| 4.2.1 小鼠免疫 | 第83-84页 |
| 4.2.2 血清抗MERS-CoVIgG抗体效价的测定 | 第84页 |
| 4.2.3 MERS-CoV假病毒包装 | 第84页 |
| 4.2.4 MERS-CoV假病毒感染力的测定 | 第84页 |
| 4.2.5 抗MERS-CoV中和抗体效价的测定 | 第84页 |
| 4.2.6 小鼠脾细胞的分离 | 第84-85页 |
| 4.2.7 ELISpot检测 | 第85页 |
| 4.2.8 胞内细胞因子染色实验 | 第85页 |
| 4.2.9 IFN-γ、TNF-α和IL-2细胞因子ELISA检测 | 第85页 |
| 4.3 结果 | 第85-93页 |
| 4.3.1 小鼠异种疫苗prime-boost免疫试验结果 | 第85-89页 |
| 4.3.2 小鼠混合接种(coinoculation)试验结果 | 第89-93页 |
| 4.4 讨论 | 第93-95页 |
| 4.5 小结 | 第95-96页 |
| 第五章 结论与展望 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-112页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第112-113页 |
| 主要简历 | 第113-114页 |
| 致谢 | 第114-115页 |
