| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-28页 |
| 第一章 海洋中卤化物的研究 | 第14-19页 |
| 1.1 海洋中的含卤化合物的种类及其重要作用 | 第14页 |
| 1.2 褐藻中的卤素化合物 | 第14-19页 |
| 1.2.1 卤代烃类 | 第15-16页 |
| 1.2.2 卤代酪氨酸 | 第16页 |
| 1.2.3 卤代酚类 | 第16-18页 |
| 1.2.4 卤代脂肪酸 | 第18页 |
| 1.2.5 卤代萜类 | 第18-19页 |
| 第二章 卤代酶的研究 | 第19-28页 |
| 2.1 卤代酶的分类 | 第19-24页 |
| 2.1.1 黄素依赖型卤代酶 | 第19-20页 |
| 2.1.2 卤代过氧化物酶 | 第20-24页 |
| 2.2 海带的碘代谢及其环境影响 | 第24-27页 |
| 2.2.1 海带 | 第24-25页 |
| 2.2.2 海洋中的碘代谢 | 第25-26页 |
| 2.2.3 碘代谢的环境影响 | 第26-27页 |
| 2.3 酶活性检测的方法及现状 | 第27-28页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第28-50页 |
| 第三章 海带转录组库的构建和海带 vHPO 基因的分子系统学分析 | 第28-34页 |
| 3.1.实验材料 | 第28-29页 |
| 3.1.1 海带样品 | 第28页 |
| 3.1.2 试剂、试剂盒及主要仪器 | 第28-29页 |
| 3.1.3 常用试剂的配制 | 第29页 |
| 3.2.海带配子体 RNA 的提取及总 RNA 反转录 | 第29-30页 |
| 3.2.1 RNA 提取步骤 | 第29-30页 |
| 3.2.2 海带 cDNA 第一链的合成 | 第30页 |
| 3.3 转录组测序注释及碘氧化酶基因分析 | 第30-34页 |
| 3.3.1 海带 cDNA 转录组测序注释 | 第30-31页 |
| 3.3.2 海带卤素氧化酶基因分析 | 第31-33页 |
| 3.3.3 蛋白结构分析 | 第33页 |
| 3.3.4 vHPO 基因同源性分析 | 第33-34页 |
| 第四章 海带 vHPO 基因的原核表达 | 第34-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第34-37页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第34页 |
| 4.1.2 主要试剂及仪器 | 第34-35页 |
| 4.1.3 主要试剂配制 | 第35-37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-43页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第37页 |
| 4.2.2 蛋白纯化 | 第37-43页 |
| 第五章 海带 vHPO 蛋白的酶活性检测 | 第43-50页 |
| 5.1 MCD 方法检测海带卤素过氧化物酶的蛋白活性 | 第43-47页 |
| 5.1.1 实验仪器和试剂配制 | 第44页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第44-47页 |
| 5.1.2.1 MCD 浓度与紫外吸收峰面积标准曲线的建立 | 第44-45页 |
| 5.1.2.2 蛋白酶活力的测算 | 第45-46页 |
| 5.1.2.3 不同反应温度对酶活性的影响 | 第46页 |
| 5.1.2.4 不同 pH 对酶活性的影响 | 第46-47页 |
| 5.1.2.5 底物亲和力检测 | 第47页 |
| 5.2 海带卤素过氧化物酶对小分子化合物的加卤作用 | 第47-50页 |
| 5.2.1 实验试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 5.2.2 试验方法 | 第49-50页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第50-76页 |
| 第六章 vHPO 分子系统学分析结果与讨论 | 第50-60页 |
| 6.1 分子系统学研究实验结果 | 第50-58页 |
| 6.1.1 总 RNA 提取结果 | 第50页 |
| 6.1.2 转录组调取序列结果 | 第50-52页 |
| 6.1.3 海带编码区基因结构、理化性质分析 | 第52-53页 |
| 6.1.4 二级结构和三维结构预测结果 | 第53-54页 |
| 6.1.5 保守性分析，同源比对结果 | 第54-55页 |
| 6.1.6 海带 vHPO 基因分子系统学分析 | 第55-58页 |
| 6.2 vHPO 基因分子系统学结果讨论 | 第58-60页 |
| 6.2.1 转录组调取序列情况分析 | 第58页 |
| 6.2.2 藻类 vHPO 基因系统进化结果分析 | 第58-60页 |
| 第七章 海带 vHPO 基因原核表达结果 | 第60-63页 |
| 7.1 海带 vBPO 基因原核表达实验结果 | 第60-63页 |
| 7.1.1 表达载体的转化 | 第60页 |
| 7.1.2 海带 vHPO 蛋白提取结果 | 第60-61页 |
| 7.1.3 海带 vHPO 蛋白 Western-Blot 检测结果 | 第61-63页 |
| 第八章 海带 vBPO 蛋白酶促反应动力学研究 | 第63-76页 |
| 8.1 标准曲线的绘制 | 第63页 |
| 8.2 温度对 vBPO1 蛋白酶活性的影响 | 第63-65页 |
| 8.3 pH 对海带 vHPO 蛋白酶活性的影响 | 第65-67页 |
| 8.4 Sja vBPO 蛋白对不同底物亲和力曲线的测定 | 第67-70页 |
| 8.4.1 Sja vBPO 蛋白对 MCD 的亲和力曲线 | 第67-68页 |
| 8.4.2 Sja vBPO 蛋白对 KBr 的亲和力曲线 | 第68-69页 |
| 8.4.3 Sja vBPO 蛋白对 KI 的亲和力 | 第69-70页 |
| 8.5 海带卤素过氧化物酶对小分子化合物的加卤作用 | 第70-74页 |
| 8.5.1 HD-ZWM-163 实验高效液相色谱检验结果 | 第70-71页 |
| 8.5.2 HD-ZWM-163 质谱检验结果 | 第71-74页 |
| 8.6 讨论 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 个人简历 | 第89-90页 |
