摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
第一部分 :GPR30在小鼠成骨细胞MC3T3-E1中表达的研究 | 第15-28页 |
1 前言 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-24页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第16-17页 |
2.1.1 细胞 | 第16页 |
2.1.2 主要试剂 | 第16-17页 |
2.2 实验方法 | 第17-24页 |
2.2.1 主要试剂的配制 | 第17-20页 |
2.2.2 细胞培养 | 第20-21页 |
2.2.3 Westernblot测定MC3T3-E1细胞中GPR30表达 | 第21-22页 |
2.2.4 实时定量PCR测定MC3T3-E1细胞中GPR30表达 | 第22-23页 |
2.2.5 免疫荧光测定MC3T3-E1细胞中GPR30表达 | 第23-24页 |
2.2.6 统计学分析 | 第24页 |
3 实验结果 | 第24-26页 |
3.1 雌二醇剂量依赖性上调MC3T3-E1细胞中GPR30的表达 | 第24-25页 |
3.2 MC3T3-E1细胞中GPR30在最适雌二醇浓度下的表达 | 第25-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
5 结论 | 第27-28页 |
第二部分 :雌二醇通过活化GPPR30对MC3T3-E1细胞线粒体自噬的影响 | 第28-43页 |
6 前言 | 第28-29页 |
7 材料与方法 | 第29-37页 |
7.1 材料与试剂 | 第29-31页 |
7.1.1 细胞 | 第29页 |
7.1.2 主要试剂 | 第29-31页 |
7.2 实验方法 | 第31-37页 |
7.2.1 主要试剂的配制 | 第31-33页 |
7.2.2 细胞培养 | 第33-34页 |
7.2.3 透射电镜 | 第34-35页 |
7.2.4 免疫荧光测定MC3T3-E1细胞中蛋白共定位的表达 | 第35-36页 |
7.2.5 Westernblot测定MC3T3-E1细胞中线粒体自嗜表达 | 第36-37页 |
7.2.6 统计学分析 | 第37页 |
8 实验结果 | 第37-41页 |
8.1 雌二醇及GPR30与线粒体自噬体形成的关系 | 第37-38页 |
8.2 雌二醇及GPR30对线粒体蛋白及溶酶体蛋白共定位的影响 | 第38-39页 |
8.3 雌二醇及GPR30对线粒体自噬相关蛋白表达的影响 | 第39-41页 |
9 讨论 | 第41-42页 |
10 结论 | 第42-43页 |
第三部分 :ERK1/2信号通路在雌二醇调节线粒体自噬中的作用 | 第43-58页 |
11 前言 | 第43-44页 |
12 实验材料与方法 | 第44-51页 |
12.1 材料与试剂 | 第44-46页 |
12.1.1 细胞 | 第44页 |
12.1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
12.1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
12.2 实验方法 | 第46-51页 |
12.2.1 主要试剂的配制 | 第46-48页 |
12.2.2 细胞培养 | 第48-49页 |
12.2.3 Westernblot测定MC3T3-E1细胞中线粒体自嗜的表达 | 第49-50页 |
12.2.4 CCK-8法检测细胞增殖 | 第50-51页 |
12.2.5 统计学分析 | 第51页 |
13 实验结果 | 第51-55页 |
13.1 雌二醇活化MC3T3-E1细胞中GPR30调节ERK1/2信号通路 | 第51-52页 |
13.2 雌二醇及GPR30对线粒体蛋白及溶酶体蛋白共定位的影响 | 第52-53页 |
13.3 雌二醇活化MC3T3-E1细胞中GPR30后调节ERK1/2信号途径参与线粒体自噬 | 第53-54页 |
13.4 雌二醇通过GPR30-ERK1/2信号通路促进MC3T3-E1细胞增殖 | 第54-55页 |
14 讨论 | 第55-57页 |
15 结论 | 第57-58页 |
本研究创新性自我评价 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
综述 | 第68-84页 |
参考文献 | 第76-84页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简介 | 第86页 |