摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-17页 |
第一部分:microRNA-326在桥本甲状腺炎患者中的变化研究 | 第17-51页 |
1 前言 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-38页 |
2.1 实验对象与分组 | 第19-20页 |
2.1.1 甲状腺组织 | 第19页 |
2.1.2 外周血 | 第19-20页 |
2.2 实验仪器与试剂 | 第20-22页 |
2.2.1 主要仪器 | 第20-21页 |
2.2.2 主要试剂 | 第21-22页 |
2.3 实验方法 | 第22-38页 |
2.3.1 标本的收集与处理 | 第22-23页 |
2.3.2 流式细胞染色 | 第23-25页 |
2.3.3 荧光定量PCR分析 | 第25-31页 |
2.3.4 Th17细胞极化培养 | 第31-32页 |
2.3.5 ELISA检测 | 第32-33页 |
2.3.6 Western Blot蛋白免疫印迹 | 第33-37页 |
2.3.7 miR-326 mimics转染 | 第37-38页 |
2.4 统计学处理 | 第38页 |
3 结果 | 第38-48页 |
3.1 甲状腺组织研究 | 第38-41页 |
3.1.1 甲状腺组织入组人群的一般情况 | 第38-39页 |
3.1.2 甲状腺组织中miR-326的水平 | 第39页 |
3.1.3 甲状腺组织中各T细胞亚群相关细胞因子和转录因子的mRNA水平 | 第39-41页 |
3.1.4 甲状腺组织中pSTAT3的水平 | 第41页 |
3.2 外周血研究 | 第41-48页 |
3.2.1 外周血入组人群的一般情况 | 第41-42页 |
3.2.2 PBMC中miR-326的水平 | 第42页 |
3.2.3 外周血中各T细胞亚群相关细胞因子和转录因子mRNA的水平 | 第42-43页 |
3.2.4 PBMC中各T细胞亚群的比例 | 第43-45页 |
3.2.5 血清/血浆细胞因子IFN-γ和IL-17A的水平 | 第45-46页 |
3.2.6 Western Blot检测PBMC中pSTAT3的水平 | 第46页 |
3.2.7 PBMC进行Th17细胞极化培养 | 第46-47页 |
3.2.8 PBMC中过表达miR-326的研究 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
第二部分:miR-326调节ADAM17参与桥本状腺炎发病的机制研究 | 第51-76页 |
1 前言 | 第51-53页 |
2 材料与方法 | 第53-61页 |
2.1 实验对象与分组 | 第53页 |
2.2 主要仪器和主要试剂 | 第53-56页 |
2.2.1 主要仪器 | 第53-54页 |
2.2.2 主要试剂 | 第54-56页 |
2.3 实验方法 | 第56-61页 |
2.3.1 PBMC的冻存和复苏 | 第56页 |
2.3.2 荧光定量PCR分析 | 第56-57页 |
2.3.3 Western Blot蛋白免疫印迹 | 第57页 |
2.3.4 IL-23刺激体外培养的PBMC | 第57页 |
2.3.5 CD3+T细胞中ADAM17抑制实验 | 第57-59页 |
2.3.6 流式细胞分析 | 第59-60页 |
2.3.7 miR-326 mimics和inhibitor转染 | 第60-61页 |
2.4 统计学处理 | 第61页 |
3 结果 | 第61-73页 |
3.1 miR-326负性调节ADAM17的表达 | 第61-66页 |
3.1.1 甲状腺组织中ADAM17的表达 | 第61-62页 |
3.1.2 外周血PBMC中ADAM17的表达 | 第62-65页 |
3.1.3 体外过表达miR-326下调ADAM17的表达 | 第65-66页 |
3.2 ADAM17调节细胞膜IL-23R的表达 | 第66-68页 |
3.2.1 甲状腺组织中IL-23R的表达 | 第66页 |
3.2.2 外周血中IL-23R的表达 | 第66-67页 |
3.2.3 血浆sIL-23R水平的检测 | 第67-68页 |
3.2.4 CD3+T细胞中ADAM17抑制实验 | 第68页 |
3.3 HT患者对IL-23的高反应性与mIL-23R水平相关 | 第68-73页 |
3.3.1 IL-23刺激前后CD4+/CD8+T细胞中pSTAT3的水平 | 第68-71页 |
3.3.2 体外干预miR-326对IL-23R和IL-17A的影响 | 第71-73页 |
4 讨论 | 第73-75页 |
5 结论 | 第75-76页 |
本研究创新性的自我评价 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
综述 | 第83-98页 |
参考文献 | 第91-98页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第98-100页 |
致谢 | 第100-101页 |
个人简历 | 第101页 |