| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 研究背景 | 第12-13页 |
| 1.2 葡萄白粉病研究概况 | 第13-15页 |
| 1.2.1 葡萄白粉病 | 第13-14页 |
| 1.2.2 葡萄抗白粉病机理研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 植物泛素/26S蛋白酶体降解途径研究进展 | 第15-20页 |
| 1.3.1 泛素化作用机理 | 第16页 |
| 1.3.2 植物泛素连接酶E3家族 | 第16-19页 |
| 1.3.3 植物F-box基因调控抗病的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1功能鉴定及其表达调控分析 | 第21-52页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试验试剂与仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.2.2 葡萄基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.3 葡萄总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.4 基因的克隆与载体的构建 | 第23页 |
| 2.2.5 实时定量PCR分析 | 第23-24页 |
| 2.2.6 农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化 | 第24页 |
| 2.2.7 葡萄原生质体的制备及转化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 葡萄和拟南芥白粉菌的接种及组织化学染色分析 | 第25页 |
| 2.2.9 葡萄叶片蛋白提取及westernblot检测 | 第25页 |
| 2.2.10 GUS染色及定量分析 | 第25页 |
| 2.2.11 农杆菌介导的葡萄转基因 | 第25-26页 |
| 2.3 结果与分析 | 第26-49页 |
| 2.3.1 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1的克隆及响应白粉菌的表达分析 | 第26-29页 |
| 2.3.2 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1的序列分析 | 第29-33页 |
| 2.3.3 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpUIFP1亚细胞定位分析 | 第33-35页 |
| 2.3.4 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1调控抗白粉病的功能分析 | 第35-45页 |
| 2.3.4.1 过量表达中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1的拟南芥抗白粉病鉴定 | 第35-38页 |
| 2.3.4.2 过量表达中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1的红地球抗白粉病鉴定 | 第38-45页 |
| 2.3.5 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1启动子的活性分析 | 第45-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-52页 |
| 第三章 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpUIFP1互作蛋白的筛选及验证 | 第52-68页 |
| 3.1 试验材料 | 第52页 |
| 3.2 试验方法 | 第52-54页 |
| 3.2.1 酵母双杂交诱饵载体的构建及检测分析 | 第52-53页 |
| 3.2.2 酵母双杂交筛选互作蛋白及验证 | 第53页 |
| 3.2.3 双分子荧光互补试验 | 第53-54页 |
| 3.2.4 葡萄叶片蛋白丰度检测 | 第54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-67页 |
| 3.3.1 中国野生华东葡萄泛素连接酶基因VpUIFP1诱饵载体的构建及分析 | 第54-56页 |
| 3.3.2 酵母双杂交筛选中国野生华东葡萄泛素连接酶VpUIFP1的互作蛋白 | 第56-58页 |
| 3.3.3 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpUIFP1互作蛋白的验证 | 第58-66页 |
| 3.3.4 中国野生华东葡萄泛素连接酶VpUIFP1介导硫氧还蛋白VpTrxz降解 | 第66-67页 |
| 3.4 讨论 | 第67-68页 |
| 第四章 中国野生华东葡萄硫氧还蛋白VpTrxz的功能分析 | 第68-78页 |
| 4.1 试验材料 | 第68页 |
| 4.2 试验方法 | 第68-69页 |
| 4.2.1 载体构建 | 第68页 |
| 4.2.2 生物信息学分析 | 第68页 |
| 4.2.3 实时定量PCR分析 | 第68页 |
| 4.2.4 亚细胞定位分析 | 第68-69页 |
| 4.2.5 葡萄白粉菌的接种及DAB染色 | 第69页 |
| 4.2.6 农杆菌介导的瞬时表达 | 第69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-76页 |
| 4.3.1 中国野生华东葡萄硫氧还蛋白基因VpTrxz序列分析 | 第69-70页 |
| 4.3.2 中国野生华东葡萄硫氧还蛋白基因VpTrxz响应白粉菌的表达分析 | 第70-72页 |
| 4.3.3 中国野生华东葡萄硫氧还蛋白VpTrxz亚细胞定位分析 | 第72-73页 |
| 4.3.4 中国野生华东葡萄硫氧还蛋白基因VpTrxz调控抗白粉病的功能分析 | 第73-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-78页 |
| 第五章 结论和创新点 | 第78-79页 |
| 5.1 结论 | 第78页 |
| 5.2 创新点 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 附录 | 第89-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简介 | 第94页 |
