| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 自噬简介 | 第13-15页 |
| 1.2.1 自噬发生的过程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 自噬的诱导 | 第14页 |
| 1.2.3 自噬体泡的核的形成 | 第14页 |
| 1.2.4 自噬泡的延伸与扩张 | 第14-15页 |
| 1.2.5 自噬体的回收重利用 | 第15页 |
| 1.3 自噬在植物中的作用 | 第15-20页 |
| 1.3.1 自噬与植物发育的关系 | 第15-16页 |
| 1.3.2 自噬在植物营养回收利用中的作用 | 第16页 |
| 1.3.3 自噬在响应非生物逆境中的作用 | 第16-17页 |
| 1.3.4 自噬在植物免疫应答中的作用 | 第17-20页 |
| 1.3.5 自噬在活性氧应答中的作用 | 第20页 |
| 1.4 植物中选择性自噬的功能 | 第20-23页 |
| 1.4.1 叶绿体自噬 | 第20-21页 |
| 1.4.2 过氧化物酶体自噬 | 第21页 |
| 1.4.3 线粒体自噬 | 第21-22页 |
| 1.4.4 内质网自噬 | 第22页 |
| 1.4.5 核糖体自噬 | 第22页 |
| 1.4.6 蛋白酶体自噬 | 第22-23页 |
| 1.5 检测自噬的方法 | 第23-24页 |
| 1.5.1 透射电镜方法(TEM) | 第23页 |
| 1.5.2 自噬体膜标志性蛋白质ATG8的检测 | 第23-24页 |
| 1.5.3 MDC染色法 | 第24页 |
| 1.6 本研究的目的、意义及技术路线 | 第24-25页 |
| 第二章 苹果自噬相关基因MdATG18a的克隆与表达分析 | 第25-38页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.1.1 植物材料与处理 | 第25-26页 |
| 2.1.2 质粒载体与菌株及主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 常规核酸处理方法 | 第26-28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28-35页 |
| 2.2.1 苹果自噬基因MdATG18a的克隆与序列分析 | 第28-31页 |
| 2.2.2 苹果自噬基因MdATG18a的启动子克隆与顺式作用元件分析 | 第31-32页 |
| 2.2.3 苹果自噬基因MdATG18a的亚细胞定位 | 第32-33页 |
| 2.2.4 苹果自噬基因MdATG18a在不同组织、果实发育和叶片衰老中的表达分析 | 第33页 |
| 2.2.5 苹果自噬基因MdATG18a在不同逆境下的表达分析 | 第33页 |
| 2.2.6 苹果自噬基因MdATG18a在氮饥饿和内质网胁迫下的表达分析 | 第33-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-37页 |
| 2.4 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 苹果自噬相关基因MdATG18a在干旱胁迫下的功能 | 第38-55页 |
| 3.1 材料与方法 | 第38-42页 |
| 3.1.1 植物材料与处理 | 第38-39页 |
| 3.1.2 质粒载体与菌株 | 第39页 |
| 3.1.3 常规核酸处理方法 | 第39页 |
| 3.1.4 农杆菌介导的遗传转化方法 | 第39页 |
| 3.1.5 SouthernBlot试验 | 第39-40页 |
| 3.1.6 基因组DNA、RNA提取和qRT-PCR | 第40页 |
| 3.1.7 光合作用参数的测定 | 第40页 |
| 3.1.8 生理指标的测定 | 第40-41页 |
| 3.1.9 活性氧化学组织染色 | 第41页 |
| 3.1.10 抗氧化酶活测定 | 第41页 |
| 3.1.11 抗氧化物质提取和测定 | 第41页 |
| 3.1.12 不溶性蛋白含量和氧化蛋白的检测 | 第41页 |
| 3.1.13 透射电镜分析 | 第41-42页 |
| 3.1.14 数据分析 | 第42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-52页 |
| 3.2.1 过表达MdATG18a番茄植株抗旱性分析 | 第42页 |
| 3.2.2 过表达MdATG18a苹果植株抗旱性分析 | 第42-46页 |
| 3.2.3 过表达MdATG18a苹果植株光合作用能力分析 | 第46-47页 |
| 3.2.4 过表达MdATG18a对苹果植株过氧化氢含量及清除酶活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.2.5 过表达MdATG18a苹果植株不溶性蛋白和氧化蛋白含量分析 | 第48-49页 |
| 3.2.6 过表达MdATG18a苹果植株自噬系统活性分析 | 第49-52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-53页 |
| 3.4 小结 | 第53-55页 |
| 第四章 苹果自噬相关基因MdATG18a在氮饥饿胁迫下的功能 | 第55-66页 |
| 4.1 材料与方法 | 第55-57页 |
| 4.1.1 植物材料与处理 | 第55-56页 |
| 4.1.2 载体构建和DNA、RNA提取和qRT-PCR | 第56页 |
| 4.1.3 花青苷的测定 | 第56页 |
| 4.1.4 可溶性糖含量的测定 | 第56页 |
| 4.1.5 淀粉染色和含量测定 | 第56页 |
| 4.1.6 氮含量测定 | 第56-57页 |
| 4.1.7 透射电镜分析 | 第57页 |
| 4.1.8 数据分析 | 第57页 |
| 4.2 结果与分析 | 第57-64页 |
| 4.2.1 过表达MdATG18a拟南芥植株对氮饥饿胁迫的抗性分析 | 第57-58页 |
| 4.2.2 过表达MdATG18a苹果植株对氮饥饿胁迫的抗性分析 | 第58-59页 |
| 4.2.3 过表达MdATG18a苹果植株类黄酮合成和调控基因的表达分析 | 第59页 |
| 4.2.4 过表达MdATG18a苹果植株可溶性糖的合成和淀粉降解 | 第59-61页 |
| 4.2.5 过表达MdATG18a苹果植株对硝酸根的吸收与同化能力的影响 | 第61-62页 |
| 4.2.6 过表达MdATG18a苹果植株自噬系统活性分析 | 第62-64页 |
| 4.3 讨论 | 第64-65页 |
| 4.4 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 苹果自噬相关基因MdATG18a对褐斑病的抗性功能 | 第66-76页 |
| 5.1 材料与方法 | 第66-67页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第66页 |
| 5.1.2 苹果褐斑病菌的分离、侵染、评价 | 第66页 |
| 5.1.3 RNA提取和qRT-PCR | 第66-67页 |
| 5.1.4 H2O2提取和抗氧化物测定 | 第67页 |
| 5.1.5 几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶提取和活性测定 | 第67页 |
| 5.1.6 SA的测定 | 第67页 |
| 5.1.7 数据分析 | 第67页 |
| 5.2 结果与分析 | 第67-73页 |
| 5.2.1 褐斑病菌侵染下MdATG18a表达分析 | 第67-68页 |
| 5.2.2 过表达MdATG18a苹果植株对褐斑病菌侵染的抗性 | 第68-69页 |
| 5.2.3 过表达MdATG18a苹果植株H2O2含量及抗氧化能力 | 第69-70页 |
| 5.2.4 过表达MdATG18a对SA合成的影响 | 第70-71页 |
| 5.2.5 过表达MdATG18a苹果植株对病程相关酶活性及SA响应基因表达的影响 | 第71-72页 |
| 5.2.6 过表达MdATG18a植株核心自噬相关基因的表达分析 | 第72-73页 |
| 5.3 讨论 | 第73-75页 |
| 5.4 小结 | 第75-76页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第76-77页 |
| 6.1 结论 | 第76页 |
| 6.2 创新点 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-88页 |
| 附录 | 第88-92页 |
| 缩略词 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简介 | 第94-95页 |
