| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 引言 | 第11页 |
| 1 氯过氧化物酶的稳定性 | 第11-17页 |
| ·氯过氧化物酶的结构稳定性 | 第11-14页 |
| ·氯过氧化物酶的发酵稳定性 | 第14-17页 |
| 2 氯过氧化物酶分离纯化 | 第17-20页 |
| ·酶蛋白提纯准备 | 第17页 |
| ·蛋白质分离纯化特点 | 第17-18页 |
| ·CPO的分离纯化 | 第18页 |
| ·CPO提纯过程稳定性措施 | 第18-19页 |
| ·CPO发酵液脱色处理 | 第19页 |
| ·CPO的提取 | 第19页 |
| ·CPO层析纯化 | 第19页 |
| ·双水相萃取 | 第19-20页 |
| 3 CPO的使用稳定性 | 第20-21页 |
| ·固定化 | 第20-21页 |
| ·表面修饰 | 第21页 |
| ·共价修饰 | 第21页 |
| ·蛋白质工程 | 第21页 |
| 4 本课题研究目的及意义 | 第21-26页 |
| ·研究目的 | 第21-22页 |
| ·研究的内容 | 第22-23页 |
| ·研究目标 | 第23页 |
| ·拟解决的关键问题 | 第23-24页 |
| ·研究方法和技术路线 | 第24页 |
| ·特色与创新 | 第24-26页 |
| 第二章 氯过氧化物酶发酵产酶稳定性条件研究 | 第26-45页 |
| 引言 | 第26页 |
| 1 主要材料 | 第26-29页 |
| ·主要试剂及菌株 | 第26-29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| 2 实验方法 | 第29-34页 |
| ·发酵变量测定 | 第29-31页 |
| ·发酵实验 | 第31页 |
| ·基础发酵产酶曲线分析 | 第31-32页 |
| ·产酶稳定化实验 | 第32-33页 |
| ·培养条件在线控制实验 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-43页 |
| ·影响产酶稳定性的因素分析 | 第34-40页 |
| ·发酵产酶稳定化条件控制 | 第40-43页 |
| 4 小结 | 第43-45页 |
| 第三章 氯过氧化物酶的分离纯化 | 第45-59页 |
| 引言 | 第45页 |
| 1 主要材料 | 第45-47页 |
| ·主要试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46-47页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第47-54页 |
| ·粗酶液的制备 | 第47-48页 |
| ·蛋白质纯化层析 | 第48-52页 |
| ·蛋白质浓度及酶活力检测方法 | 第52-53页 |
| ·样品的浓缩 | 第53页 |
| ·分离样品纯度检测:SDS-PAGE蛋白质电泳 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-57页 |
| ·DEAE-Cellulose 52离子交换柱层析结果 | 第54-55页 |
| ·样品浓缩 | 第55页 |
| ·Sephadex G-75凝胶过滤层析结果 | 第55-56页 |
| ·纯化效果检验结果图 | 第56-57页 |
| 4 小结 | 第57-59页 |
| 第四章 氯过氧化物酶双水相萃取法 | 第59-70页 |
| 1 引言 | 第59页 |
| 2 主要材料 | 第59-61页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-61页 |
| 3 实验方法 | 第61-63页 |
| ·CPO发酵及发酵液的预处理 | 第61页 |
| ·CPO清液的超滤浓缩 | 第61页 |
| ·CPO与PEG的共沉淀 | 第61页 |
| ·共沉淀物的复溶解 | 第61-62页 |
| ·CPO凝胶层析纯化 | 第62页 |
| ·酶活力的定义及测定 | 第62页 |
| ·蛋白含量测定方法 | 第62-63页 |
| 4 结果与分析 | 第63-69页 |
| ·PEG的聚合度对共沉淀CPO回收率的影响 | 第63页 |
| ·PEG添加量对CPO回收率的影响 | 第63-64页 |
| ·硫酸铵饱和度对PEG共沉淀CPO得率的影响 | 第64-65页 |
| ·共沉淀物的复溶程度对CPO分配系数的影响 | 第65-67页 |
| ·CPO的凝胶层析纯化 | 第67-68页 |
| ·共沉复溶法与常规盐析法提纯CPO过程指标的比较 | 第68-69页 |
| 5 小结 | 第69-70页 |
| 第五章 氯过氧化物酶的固定化及其反应性能的稳定化 | 第70-78页 |
| 引言 | 第70页 |
| 1 主要材料 | 第70-71页 |
| ·主要试剂 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70-71页 |
| 2 实验方法 | 第71-73页 |
| ·CPO的固定化方法 | 第71-72页 |
| ·载体组成对固定化颗粒外形和强度影响 | 第72页 |
| ·不同载体制备的固定化酶的活力回收试验 | 第72页 |
| ·固定化CPO的稳定性试验 | 第72页 |
| ·固定化初始酶浓度对反应性能的影响 | 第72-73页 |
| 3 结果与分析 | 第73-76页 |
| ·载体组成对固定化颗粒外形和强度影响 | 第73页 |
| ·不同载体制备的固定化酶的活力回收试验 | 第73-74页 |
| ·固定化CPO的稳定性试验 | 第74-75页 |
| ·固定化初始酶浓度对反应性能的影响 | 第75页 |
| ·固定化酶反应条件优化 | 第75-76页 |
| 4 小结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第85-87页 |