摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1.1 目前世界的能源问题 | 第11页 |
1.2 生产乙醇的原料和方法 | 第11-12页 |
1.3 果聚糖代谢概况 | 第12-16页 |
1.3.1 植物中果聚糖的合成、降解和功能 | 第12-13页 |
1.3.2 果聚糖水解酶基因的功能和基本性质 | 第13-15页 |
1.3.3 菊芋FEH基因的研究概况 | 第15-16页 |
1.4 酿酒酵母的背景介绍 | 第16-17页 |
1.5 国内外利用微生物来源的菊粉酶生产乙醇的研究进展 | 第17-18页 |
1.6 本论文的研究意义、内容及技术路线 | 第18-21页 |
第二章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEHs)的理化性质分析 | 第21-33页 |
2.1 材料与方法 | 第21-24页 |
2.1.1 质粒及菌株 | 第21页 |
2.1.2 培养基与试剂 | 第21-22页 |
2.1.3 实验方法 | 第22-24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-31页 |
2.2.1 菊芋1-FEH酶的生物信息学分析 | 第24-26页 |
2.2.2 菊芋1-FEH酶pH稳定性和热稳定性的测定 | 第26-27页 |
2.2.3 不同的金属化合物和蛋白抑制剂对重组的菊芋Ht1-FEHs活性的影响 | 第27-29页 |
2.2.4 重组的菊芋果聚糖外切水解酶1-FEHs的动力学曲线 | 第29-31页 |
2.3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEHs)同源重组于酿酒酵母S.C6525中发酵产酒精并进行条件优化 | 第33-59页 |
3.1 材料与方法 | 第34-39页 |
3.1.1 质粒与菌株 | 第34页 |
3.1.2 培养基与试剂 | 第34-35页 |
3.1.3 实验方法 | 第35-39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-56页 |
3.2.1 载体构建与测序结果分析 | 第39-41页 |
3.2.3 重组载体在酿酒酵母中表达的结果分析 | 第41-42页 |
3.2.4 酵母酿酒酵母(S. cerevisiae) 6525重组转化子酶活的测定 | 第42页 |
3.2.5 产酒精结果分析 | 第42-44页 |
3.2.6 发酵温度对产酒精量的影响 | 第44-46页 |
3.2.6 发酵pH对产酒精量的影响 | 第46-50页 |
3.2.7 发酵培养基中金属离子对产酒精量的影响 | 第50-56页 |
3.3 讨论 | 第56-59页 |
第四章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEH Ⅲ)的克隆 | 第59-71页 |
4.1 材料与方法 | 第59-64页 |
4.1.1 实验材料 | 第59页 |
4.1.2 实验方法 | 第59-64页 |
4.2 结果与分析 | 第64-69页 |
4.2.1 基因克隆结果与测序分析 | 第64-65页 |
4.2.2 载体构建结果与测序分析 | 第65-66页 |
4.2.3 毕赤酵母同源重组结果与测序分析 | 第66-67页 |
4.2.4 蛋白表达结果分析 | 第67页 |
4.2.5 FEH Ⅲ基因的点突变结果分析 | 第67-68页 |
4.2.6 点突变后的重组蛋白表达结果分析 | 第68页 |
4.2.7 Ht1-FEH Ⅲ的序列分析 | 第68-69页 |
4.3 讨论 | 第69-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
创新点 | 第73-75页 |
展望 | 第75-77页 |
攻读硕士学位期间发表或待发表的论文 | 第77-79页 |
参考文献: | 第79-89页 |
附录 | 第89-91页 |
致谢 | 第91页 |