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菊芋1-FEHs基因重组发酵产酒精的初步研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词第10-11页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 目前世界的能源问题第11页
    1.2 生产乙醇的原料和方法第11-12页
    1.3 果聚糖代谢概况第12-16页
        1.3.1 植物中果聚糖的合成、降解和功能第12-13页
        1.3.2 果聚糖水解酶基因的功能和基本性质第13-15页
        1.3.3 菊芋FEH基因的研究概况第15-16页
    1.4 酿酒酵母的背景介绍第16-17页
    1.5 国内外利用微生物来源的菊粉酶生产乙醇的研究进展第17-18页
    1.6 本论文的研究意义、内容及技术路线第18-21页
第二章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEHs)的理化性质分析第21-33页
    2.1 材料与方法第21-24页
        2.1.1 质粒及菌株第21页
        2.1.2 培养基与试剂第21-22页
        2.1.3 实验方法第22-24页
    2.2 结果与分析第24-31页
        2.2.1 菊芋1-FEH酶的生物信息学分析第24-26页
        2.2.2 菊芋1-FEH酶pH稳定性和热稳定性的测定第26-27页
        2.2.3 不同的金属化合物和蛋白抑制剂对重组的菊芋Ht1-FEHs活性的影响第27-29页
        2.2.4 重组的菊芋果聚糖外切水解酶1-FEHs的动力学曲线第29-31页
    2.3 讨论第31-33页
第三章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEHs)同源重组于酿酒酵母S.C6525中发酵产酒精并进行条件优化第33-59页
    3.1 材料与方法第34-39页
        3.1.1 质粒与菌株第34页
        3.1.2 培养基与试剂第34-35页
        3.1.3 实验方法第35-39页
    3.2 结果与分析第39-56页
        3.2.1 载体构建与测序结果分析第39-41页
        3.2.3 重组载体在酿酒酵母中表达的结果分析第41-42页
        3.2.4 酵母酿酒酵母(S. cerevisiae) 6525重组转化子酶活的测定第42页
        3.2.5 产酒精结果分析第42-44页
        3.2.6 发酵温度对产酒精量的影响第44-46页
        3.2.6 发酵pH对产酒精量的影响第46-50页
        3.2.7 发酵培养基中金属离子对产酒精量的影响第50-56页
    3.3 讨论第56-59页
第四章 菊芋果聚糖外切水解酶基因(Ht1-FEH Ⅲ)的克隆第59-71页
    4.1 材料与方法第59-64页
        4.1.1 实验材料第59页
        4.1.2 实验方法第59-64页
    4.2 结果与分析第64-69页
        4.2.1 基因克隆结果与测序分析第64-65页
        4.2.2 载体构建结果与测序分析第65-66页
        4.2.3 毕赤酵母同源重组结果与测序分析第66-67页
        4.2.4 蛋白表达结果分析第67页
        4.2.5 FEH Ⅲ基因的点突变结果分析第67-68页
        4.2.6 点突变后的重组蛋白表达结果分析第68页
        4.2.7 Ht1-FEH Ⅲ的序列分析第68-69页
    4.3 讨论第69-71页
全文总结第71-73页
创新点第73-75页
展望第75-77页
攻读硕士学位期间发表或待发表的论文第77-79页
参考文献:第79-89页
附录第89-91页
致谢第91页

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