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cadR的叶绿体靶向表达及其对转基因拟南芥镉抗性的影响

摘要第3-6页
Abstract第6-11页
主要符号表第12-16页
1 引言第16-25页
    1.1 镉污染及危害第16-18页
    1.2 植物对镉的耐受机制第18-21页
        1.2.1 Cd的吸收和转运第18-19页
        1.2.3 Cd的螯合作用第19页
        1.2.4 Cd 的区隔化作用第19-21页
    1.3 基因工程技术在治理重金属Cd污染方面的应用第21-22页
    1.4 CadR-金属镉结合蛋白第22-23页
    1.5 本论文的研究内容及意义第23-25页
2 实验材料与方法第25-38页
    2.1 实验材料第25页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 菌株和质粒载体第25页
        2.1.3 酶、试剂和化学药品第25页
        2.1.4 相关软件和分析网站第25页
    2.2 常用溶液及培养基的配制第25-27页
        2.2.1 常用溶液配制第25-26页
        2.2.2 常用培养基的配制第26-27页
    2.3 实验方法第27-38页
        2.3.1 拟南芥植物的培养第27页
        2.3.2 PCR体系及反应程序第27-28页
        2.3.3 DNA的回收与纯化第28-29页
        2.3.4 DNA片段与载体的连接反应第29页
        2.3.5 大肠杆菌转化和鉴定第29-30页
        2.3.6 大肠杆菌质粒的提取第30页
        2.3.7 农杆菌感受态的制备与转化第30-31页
        2.3.8 拟南芥的稳定转化及转基因植株的筛选第31页
        2.3.9 拟南芥基因组DNA快速提取法 (Edwards法)第31页
        2.3.10 拟南芥总RNA提取第31-32页
        2.3.11 RT-PCR (reverse transcription PCR)第32-33页
        2.3.12 qPCR (quantitative real-time PCR)第33-34页
        2.3.13 激光共聚焦显微镜观察第34页
        2.3.14 根长和鲜重的统计第34页
        2.3.15 叶绿体的提取第34-35页
        2.3.16 元素含量的测定第35-36页
        2.3.17 蛋白样品的制备第36页
        2.3.18 聚丙烯酰氨凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis;PAGE)第36-37页
        2.3.19 Western blot第37页
        2.3.20 叶绿素的测定第37-38页
3 结果与分析第38-57页
    3.1 cadR叶绿体靶向载体的构建第38页
    3.2 cadR转基因植株的鉴定第38-40页
    3.3 cadR转基因植株的亚细胞定位观察第40-41页
    3.4 细胞质或质体靶向表达的cadR对转基因植株生长的影响第41-46页
        3.4.1 固体培养基上Cd处理的cadR转基因植株生长表型第41-43页
        3.4.2 液体培养基上Cd处理的cadR转基因植株生长表型第43-46页
    3.5 细胞质或质体靶向表达的cadR对转基因植株Cd积累的影响第46-50页
        3.5.1 cadR转基因植株整株的Cd积累第46-49页
        3.5.2 叶绿体中的Cd积累第49-50页
    3.6 Cd对其他金属积累的影响第50-52页
        3.6.1 整棵植株中其他金属积累第50-52页
        3.6.2 叶绿体中其他金属积累第52页
    3.7 对转运蛋白的影响第52-54页
    3.8 对叶绿素的影响第54-56页
    3.9 对其他重金属的抗性第56-57页
4 讨论第57-61页
5 结论第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-66页
个人简历、在学期间发表的学术论文以及科研成果第66页

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