| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| 1.1 棉花概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 驯化与起源 | 第9页 |
| 1.1.2 棉花纤维的发育过程 | 第9-10页 |
| 1.1.3 棉花胚珠的发育过程 | 第10页 |
| 1.2 SmallRNA简述 | 第10-15页 |
| 1.2.1 SmallRNA的形成及作用机理 | 第10-12页 |
| 1.2.2 SmallRNA在植物中的研究进展 | 第12-15页 |
| 1.3 miR160研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 模拟靶标的原理及应用 | 第16-18页 |
| 1.5 miRN A反转录原理 | 第18页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 实验材料与方法： | 第19-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.0 载体的构建与转化 | 第19-21页 |
| 2.2.1 农杆菌介导棉花遗传转化 | 第21页 |
| 2.2.2 Southern blot检测基因拷贝数 | 第21-23页 |
| 2.2.3 RNA的粗提、纯化 | 第23-24页 |
| 2.2.4 反转录 | 第24-26页 |
| 2.2.5 RT-PCR | 第26页 |
| 2.2.6 qRT-PCR | 第26-27页 |
| 2.2.7 石蜡切片观察胚珠横截面 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-46页 |
| 3.1 陆地棉TM-1 中miR160家族成员预测及其表达模式分析 | 第29-31页 |
| 3.2 陆地棉TM-1 中靶标ARF的预测及其组织表达模式分析 | 第31-35页 |
| 3.3 miR160转基因株系目的基因插入拷贝数和表达量检测 | 第35-38页 |
| 3.4 转基因株系表型观察和考种统计 | 第38-42页 |
| 3.4.1 FBP7::Mimicry160转基因株系棉铃、胚珠变小 | 第38-39页 |
| 3.4.2 FBP7::Mimicry160转基因株系种子变小，短绒变少 | 第39-40页 |
| 3.4.3 FBP7::Mimicry160转基因株系籽指、衣指变小，纤维长度变短，整齐度、断裂比强度降低 | 第40-41页 |
| 3.4.4 FBP7::AtmiR160转基因株系无明显表型 | 第41-42页 |
| 3.5 FBP7::Mimicry160株系胚珠石蜡切片结果 | 第42-44页 |
| 3.6 ARF在FBP7::Mimicry160转基因株系中表达量分析 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 miR160在棉花胚珠和纤维发育中的功能探究 | 第46-47页 |
| 4.2 本实验存在的不足与后续计划 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-57页 |
| 附录1 引物序列 | 第53-55页 |
| 附录2 RNA裂解液和DNA抽提液配方 | 第55-56页 |
| 附录3 已获得转基因材料统计 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
