摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
1 文献综述 | 第9-14页 |
1.1 棉花目前的现状 | 第9页 |
1.2 需要解决的问题 | 第9页 |
1.3 棉酚的研究进展 | 第9-14页 |
1.3.1 棉酚的性质和应用 | 第9-10页 |
1.3.2 棉酚的合成路径 | 第10-11页 |
1.3.3 棉酚合成路径中关键的酶 | 第11-13页 |
1.3.3.1 与棉酚有关的植物信号传导 | 第12-13页 |
1.3.3.2 杜松烯合酶基因的转录调控 | 第13页 |
1.3.4 研究目的 | 第13-14页 |
2 材料和方法 | 第14-20页 |
2.1 转基因植物生长条件和遗传转化 | 第14-15页 |
2.2 基因克隆和载体构建 | 第15-16页 |
2.2.1 35s启动子的载体构建 | 第15页 |
2.2.2 种子特异启动子的载体构建 | 第15-16页 |
2.3 分子生物学分析 | 第16-18页 |
2.3.1 棉酚合成相关基因的组织表达模式 | 第16页 |
2.3.2 转基因棉花植株的阳性鉴定 | 第16-17页 |
2.3.3 RNA提取和q RT-PCR分析 | 第17-18页 |
2.4 转录组分析 | 第18-19页 |
2.4.1 RNA样品的准备和检测 | 第18-19页 |
2.4.2 RNA样品的建库 | 第19页 |
2.4.3 文库的质量控制和测序 | 第19页 |
2.5 棉酚含量检测 | 第19-20页 |
3 结果和分析 | 第20-40页 |
3.1 棉酚生物合成相关基因的表达模式 | 第20页 |
3.2 目标基因的进化分析 | 第20-21页 |
3.3 CAD1-a和CAD1-c基因的遗传转化和分子检测 | 第21-26页 |
3.3.1 CAD1-a和CAD1-c基因的植物表达载体的构建 | 第21-22页 |
3.3.2 表达载体的遗传转化和分子鉴定 | 第22-24页 |
3.3.3 棉酚合成相关基因在转基因后代根部表达水平分析 | 第24-26页 |
3.4 转录组数据分析 | 第26-34页 |
3.4.1 转录组数据的基本信息 | 第26-27页 |
3.4.2 数据的聚类分析 | 第27页 |
3.4.3 DEGSeq表达分析 | 第27-28页 |
3.4.4 差异基因参与的主要生物过程 | 第28-29页 |
3.4.5 DEGSeq的富集和KEGG通路分析 | 第29-31页 |
3.4.6 CAD1-c和CAD1-a差异基因的对比分析 | 第31-33页 |
3.4.7 ABA含量的测定 | 第33-34页 |
3.5 转基因材料的农艺性状表现 | 第34-38页 |
3.5.1 不同地点转基因材料的株高 | 第34-35页 |
3.5.2 光合速率的测定 | 第35-36页 |
3.5.3 叶绿素含量的测定 | 第36-37页 |
3.5.4 转基因材料棉籽中的棉酚含量的测定 | 第37-38页 |
3.6 种子特异启动子转基因材料的分析 | 第38-40页 |
3.6.1 转基因材料的阳性鉴定 | 第38-39页 |
3.6.2 转基因材料的southern检测 | 第39页 |
3.6.3 种子中棉酚含量检测 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录 | 第49-58页 |
致谢 | 第58-59页 |