| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一部分 激烈火球菌蛋白 PFS(PF2046)的结构和功能研究 | 第9-42页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| ·嗜热菌的特性及在食品工业上的应用 | 第9-12页 |
| ·嗜热菌的研究情况 | 第9页 |
| ·嗜热菌的分类 | 第9-10页 |
| ·嗜热菌的耐热机制研究 | 第10-11页 |
| ·嗜热菌在食品工业上的应用 | 第11-12页 |
| ·激烈火球菌（Pyrococcus furiosus）的简介及开发应用 | 第12-13页 |
| ·嗜热菌蛋白 PF2046 信息简述 | 第13页 |
| ·结构生物学对生物技术研究的推进作用 | 第13-22页 |
| ·结构生物学的介绍 | 第13-14页 |
| ·结构生物学的研究方法 | 第14-16页 |
| ·蛋白质 X-射线结构测定的主要过程 | 第16-22页 |
| ·本课题的研究意义及主要内容 | 第22-23页 |
| 2 实验材料与方法 | 第23-31页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·质粒和菌种 | 第23页 |
| ·酶类和试剂 | 第23页 |
| ·仪器和设备 | 第23-24页 |
| ·培养基及缓冲液的配制 | 第24页 |
| ·其他试剂的配制 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-31页 |
| ·pMCSG7 | 第24-27页 |
| ·PF2046蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·Se-PF2046 蛋白的诱导表达 | 第28页 |
| ·蛋白的分离及纯化 | 第28-30页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第30页 |
| ·晶体生长条件筛选及优化 | 第30-31页 |
| ·数据收集 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·克隆鉴定及转化表达菌株 | 第31页 |
| ·PF2046 重组蛋白的分离纯化 | 第31-34页 |
| ·镍柱亲和层析纯化结果分析 | 第31-32页 |
| ·热激反应的结果分析 | 第32-33页 |
| ·酶切反应试验的结果分析 | 第33页 |
| ·离子交换的结果分析 | 第33页 |
| ·凝胶层析纯化的结果分析 | 第33-34页 |
| ·Se-PF2046 重组蛋白的诱导表达及分离纯化 | 第34-35页 |
| ·PF2046 和 Se-PF2046 蛋白的晶体条件筛选及优化 | 第35-36页 |
| ·数据收集及处理 | 第36-38页 |
| ·整体结构描述 | 第38-39页 |
| ·与其他同源物的比较 | 第39-40页 |
| ·PF2046 蛋白功能探讨 | 第40-41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 第二部分 糖合成蛋白 FKP 晶体学的初步研究 | 第42-50页 |
| 1 引言 | 第42-44页 |
| ·岩藻糖的来源及用途 | 第42页 |
| ·合成 GDP-L-fucose 的两种途径 | 第42-43页 |
| ·糖合成双功能酶 FKP 的发现 | 第43页 |
| ·FKP 酶的研究进展 | 第43页 |
| ·本课题研究主要内容和重要意义 | 第43-44页 |
| 2 试验材料与方法 | 第44-45页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-45页 |
| ·pMCSG7 | 第44页 |
| ·FKP 蛋白的诱导表达及可溶性鉴定 | 第44页 |
| ·肽质量指纹图谱（PMF）鉴定和蛋白分子量测定 | 第44-45页 |
| ·FKP 重组蛋白的分离纯化及晶体学初步研究 | 第45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-49页 |
| ·pMCSG7-FKP 构建及阳性克隆鉴定 | 第45页 |
| ·FKP 蛋白诱导表达及可溶性分析 | 第45-46页 |
| ·FKP 蛋白分离纯化 | 第46-47页 |
| ·镍柱亲和层析纯化 | 第46-47页 |
| ·离子交换和凝胶层析纯化 | 第47页 |
| ·肽质量指纹图谱(PMF)鉴定和 FKP 蛋白分子量 | 第47-48页 |
| ·FKP 蛋白结晶条件的初步研究 | 第48-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
