| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-15页 |
| ·ADAM蛋白家族 | 第9-11页 |
| ·PH-30即受精素 | 第11页 |
| ·Fertilin的作用 | 第11-13页 |
| ·Fertilinα(Fα)在受精过程中的作用 | 第11-12页 |
| ·Fertilinβ(Fβ)在受精过程中的作用 | 第12-13页 |
| ·依赖受精素的精卵融合 | 第13页 |
| ·受精素的蛋白结构及在精子表面的分布位置 | 第13-14页 |
| ·免疫避孕 | 第14-15页 |
| 2 实验一 绒山羊PH-30 cDNA的克隆及序列分析 | 第15-23页 |
| ·材料与方法 | 第15-16页 |
| ·实验动物及其组织 | 第15页 |
| ·主要试剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15-16页 |
| ·载体 | 第16页 |
| ·菌株 | 第16页 |
| ·试验方法 | 第16-20页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第16页 |
| ·绒山羊睾丸组织总RNA的提取及检测 | 第16-17页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第17-18页 |
| ·PCR扩增产物的克隆及鉴定 | 第18页 |
| ·PCR产物的胶回收 | 第18-19页 |
| ·PCR 产物和 pGM-T Eeay 载体的连接 | 第19页 |
| ·转化感受态细胞TOP10 | 第19-20页 |
| ·质粒的小量提取 | 第20页 |
| ·质粒DNA酶切和PCR鉴定 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-23页 |
| ·睾丸组织总RNA的检测结果 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第21页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-23页 |
| 3 实验二 绒山羊PH-30基因全长cDNA序列的扩增 | 第23-36页 |
| ·材料 | 第23-24页 |
| ·实验动物及其组织 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·引物的设计及合成 | 第24页 |
| ·绒山羊睾丸组织总RNA的提取 | 第24页 |
| ·3′端未知序列的扩增 | 第24-28页 |
| ·5′端未知序列的扩增 | 第28-30页 |
| ·5′及3′RACE 序列验证 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-35页 |
| ·睾丸组织总RNA的检测 | 第30页 |
| ·3′端未知序列的扩增结果 | 第30-32页 |
| ·5′端未知序列的扩增结果 | 第32-33页 |
| ·5′RACE及3′RACE序列的验证结果 | 第33-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 4 实验三绒山羊PH-30的组织表达 | 第36-44页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·实验动物及其组织 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·实验仪器 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-42页 |
| ·RT-PCR法检测绒山羊PH-30 mRMA的组织表达 | 第37-38页 |
| ·PCR引物的设计及合成 | 第37页 |
| ·绒山羊睾丸及附睾组织总RNA的提取 | 第37页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第37-38页 |
| ·Northern 杂交法检测绒山羊PH-30 mRMA的组织表达 | 第38-39页 |
| ·Northern杂交 | 第39-42页 |
| ·结果 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR扩增结果 | 第42-43页 |
| ·探针标记效率检测 | 第43页 |
| ·杂交信号检测结果 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录 | 第51-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
