中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
Abbreviations | 第14-19页 |
CHAPTER 1 Introduction and review of literature | 第19-41页 |
1.1. Black Cutworm | 第19-20页 |
1.2. Distribution of Black cutworm | 第20-21页 |
1.3. Life History and Developmental Stages of BCW | 第21-24页 |
1.3.1. Life History of BCW | 第21页 |
1.3.2. Egg Stage | 第21-22页 |
1.3.3. Larval Stage | 第22页 |
1.3.4. Pupal Stage | 第22页 |
1.3.5. Adult Stage | 第22-24页 |
1.4. Factors and Damages by BCW | 第24-26页 |
1.5. Significance and Migration of BCW | 第26-28页 |
1.6. Economic Importance | 第28-29页 |
1.7. Management of BCW | 第29-30页 |
1.7.1. Survey and Trapping | 第29页 |
1.7.2. Chemical Control | 第29页 |
1.7.3. Cultural and Mechanical Control | 第29-30页 |
1.8. Molecular Techniques used the present study | 第30-40页 |
1.8.1. Rapid Amplification of cDNA Ends (RACE) | 第31-33页 |
1.8.2. Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) | 第33页 |
1.8.3. Quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) | 第33-34页 |
1.8.4. Basic Principals of Real Time PCR | 第34-35页 |
1.8.5. Chemistries of Real Time PCR | 第35页 |
1.8.6. DNA Binding Dye Chemistry | 第35-37页 |
1.8.7. Probe Based Chemistry | 第37-38页 |
1.8.8. Primer and Probe designing for qRT-PCR | 第38页 |
1.8.9. The qRT-PCR Reaction Performance | 第38-39页 |
1.8.10. PCR Reaction Efficiency | 第39页 |
1.8.11. PCR Reaction Precision | 第39页 |
1.8.12. PCR Reaction Sensitivity | 第39-40页 |
1.9. Objectives | 第40-41页 |
CHAPTER 2 Molecular Cloning, differential expression and mating interruption of Pheromone Biosynthesis Activating Neuropeptide Receptor, a sex pheromone gene in blackcutworm, Agrotis ipsilon (Hufnagel) (Lepidoptera:Noctuidae) adults | 第41-71页 |
2.1. Introduction | 第41-43页 |
2.2. Materials and methods | 第43-52页 |
2.2.1. Ethics Statement | 第43页 |
2.2.2. Insect Material and Rearing Method | 第43页 |
2.2.3. Pheromone Gland Dissection Method | 第43-44页 |
2.2.4. Total RNA Extraction | 第44-45页 |
2.2.5. Synthesis of cDNA | 第45-46页 |
2.2.6. Tissue distribution, different time rythms and mating effect studies | 第46页 |
2.2.7. Molecular Cloning and sequencing of A. ipsilon PBANR | 第46-47页 |
2.2.8. Full length PBANR acquired by Rapid amplification of cDNA ends(RACE) | 第47-48页 |
2.2.9. Basic Bioinformatic Analysis | 第48-49页 |
2.2.10. Aips-PBANR Expression by Reverse transcription PCR (RT-PCR) | 第49页 |
2.2.11. Expression of Aips-PBANR by Quantitative Real-Time PCR | 第49-50页 |
2.2.12. Statistical Analysis | 第50-52页 |
2.3. Results | 第52-68页 |
2.3.1. Cloning and Sequencing of Aips-PBANR | 第52-55页 |
2.3.2. Phylogenetic Relationship of Aips-PBANR | 第55-56页 |
2.3.3. RT-PCR analysis of Aips-PBANR expression | 第56页 |
2.3.4. Quantitative RT-PCR (qRT-PCR) Analysis of Aips-PBANR | 第56-68页 |
2.4. DISCUSSION | 第68-71页 |
CHAPTER 3 Knockdown of pheromone biosynthesis-activating neuropeptide receptor (PBANR) in black cutworm, Agrotis ipsilon (Hufnagel) (Lepidoptera:Noctuidae) adults by RNAinterference | 第71-92页 |
3.1. Introduction | 第71-79页 |
3.1.1. Sex Pheromone | 第71-72页 |
3.1.2. RNA interference (RNAi) | 第72-75页 |
3.1.3. Need for RNAi | 第75-76页 |
3.1.4. RNA interference by siRNA | 第76-77页 |
3.1.5. RNA interference by dsRNA | 第77-78页 |
3.1.6. Different dsRNA Uptake methods used in RNAi | 第78页 |
3.1.7. Advantages and disadvantages of RNAi by dsRNA | 第78页 |
3.1.8. Important factors influencing RNAi through dsRNA | 第78-79页 |
3.1.8.1 Concentration of dsRNA | 第78-79页 |
3.1.8.2 Nucleotide sequence | 第79页 |
3.1.8.3 Length of dsRNA fragment | 第79页 |
3.1.8.4 Persistence of the silencing effect | 第79页 |
3.1.8.5 Life stage of the target organism | 第79页 |
3.2. Materials and methods | 第79-87页 |
3.2.1. Insect Culture and Rearing Methods | 第79-80页 |
3.2.2. Tissue Collection | 第80页 |
3.2.3. RNA extraction and cDNA synthesis | 第80-82页 |
3.2.4. Molecular cloning | 第82-83页 |
3.2.5. Synthesis and Injection of siRNA and dsRNA | 第83-85页 |
3.2.6. Quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) analysis | 第85-86页 |
3.2.7. Data Analysis | 第86-87页 |
3.3. Results | 第87-89页 |
3.3.1. Cloning and Sequencing of Aips-PBANR | 第87页 |
3.3.2. Quantitative RT-PCR (q RT-PCR) Analysis of Aips-PBANR expression | 第87页 |
3.3.3. Effect of si RNA treatment on Aips-PBANR transcript level | 第87-88页 |
3.3.4. Effect of dsRNA treatment on Aips-PBANR transcript level | 第88-89页 |
3.4. Discussion | 第89-92页 |
CHAPTER 4 The influence of different temperatures on mating traits, oviposition andlogivity of black cutworm, Agrotis ipsilon (Hufnagel) (Lepidoptera:Noctuidae) | 第92-105页 |
4.1. Introduction | 第92-95页 |
4.2. Materials and methods | 第95-97页 |
4.2.1. Study Organism | 第95页 |
4.2.2. Insect Colony Rearing | 第95页 |
4.2.3. Temperature and Mating Conditions | 第95-96页 |
4.2.4. Mating Observations | 第96页 |
4.2.5. Oviposition, Fecundity and Adult Longivity | 第96页 |
4.2.6. Statistical Data analysis | 第96-97页 |
4.3. Results | 第97-102页 |
4.3.1. Mating Activity | 第97-100页 |
4.3.2. Oviposition Traits | 第100-101页 |
4.3.3. Adult Longivity | 第101-102页 |
4.4. Discussion | 第102-105页 |
CHAPTER 5 Conclusions and Recommendations | 第105-107页 |
References | 第107-126页 |
Acknowledgements | 第126-129页 |
Author biography | 第129-138页 |