摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
第一章 引言 | 第12-21页 |
1.1 生物的性别决定 | 第12页 |
1.2 昆虫的性别决定 | 第12-16页 |
1.2.1 昆虫性别决定的多样性 | 第12-13页 |
1.2.2 昆虫性别决定的分类 | 第13-14页 |
1.2.3 昆虫遗传型性别决定的研究进展 | 第14-16页 |
1.3 DOUBLESEX基因概况 | 第16-18页 |
1.4 TRANSFORMER-2(TRA2)基因概况 | 第18-19页 |
1.5 烟粉虱综述 | 第19-21页 |
1.5.1 烟粉虱的研究概况 | 第19页 |
1.5.2 烟粉虱的生物学特征、危害及寄主范围 | 第19-21页 |
第二章 雌雄烟粉虱内参基因的筛选 | 第21-25页 |
2.1 供试材料 | 第21页 |
2.2 候选内参基因选择 | 第21页 |
2.3 实验方法 | 第21页 |
2.4 数据分析 | 第21-22页 |
2.5 结果分析 | 第22-23页 |
2.5.1 geNorm分析结果 | 第22-23页 |
2.5.2 RefFinder分析结果 | 第23页 |
2.6 结论与讨论 | 第23-25页 |
第三章 烟粉虱DOUBLESEX基因克隆、剪切体的分析及定量分析 | 第25-44页 |
3.1 材料与方法 | 第25页 |
3.2 实验方法与步骤 | 第25-26页 |
3.2.1 烟粉虱DOUBLESEX基因的克隆 | 第25-26页 |
3.2.1.1 doublesex片段克隆: | 第25-26页 |
3.2.1.2 Doublesex全长基因的克隆 | 第26页 |
3.2.1.3 Doublesex基因cDNA全长序列验证 | 第26页 |
3.2.2 烟粉虱DOUBLESEX基因在雌雄中的剪切形式分析 | 第26页 |
3.2.3 烟粉虱doublesex基因在不同龄期的定量分析 | 第26页 |
3.3 结果与分析 | 第26-43页 |
3.3.1 Btdsx基因的核酸序列分析 | 第26-30页 |
3.3.2 Btdsx基因的蛋白序列分析 | 第30页 |
3.3.3 烟粉虱Btdsx基因剪接形式的鉴定 | 第30-36页 |
3.3.4 烟粉虱Btdsx基因外显子/内含子分析 | 第36-38页 |
3.3.5 烟粉虱Btdsx其他保守结构域预测 | 第38-41页 |
3.3.6 烟粉虱Btdsx不同龄期表达量的分析 | 第41-43页 |
3.4 小结与讨论 | 第43-44页 |
第四章 烟粉虱TRANSFORMER 2 基因克隆、剪切体的分析及定量分析 | 第44-58页 |
4.1 供试材料 | 第44-45页 |
4.2 实验方法 | 第45-46页 |
4.2.1 烟粉虱BTTRA2基因的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
4.2.1.1 Bttra2片段获取 | 第45页 |
4.2.1.2 Bttra2全长基因的获取 | 第45-46页 |
4.2.1.3 Bttra2基因cDNA全长序列验证 | 第46页 |
4.2.2 Bttra2基因在烟粉虱雌雄中的差异表达鉴定 | 第46页 |
4.2.3 Bttra2基因在烟粉虱在不同龄期的定量表达分析 | 第46页 |
4.3 结果 | 第46-56页 |
4.3.1 Bttra2基因的核酸序列分析 | 第46-49页 |
4.3.2 Bttra2基因的内含子/外显子分析 | 第49-51页 |
4.3.3 Bttra2基因的蛋白结构分析 | 第51-54页 |
4.3.4 Bttra2基因在烟粉虱雌雄表达分析 | 第54页 |
4.3.5 Bttra2基因在烟粉虱不同龄期的定量表达分析 | 第54-56页 |
4.4 小结与讨论 | 第56-58页 |
第五章 RNAI技术揭示BTDSX在烟粉虱性别决定中的作用 | 第58-65页 |
5.1 材料方法 | 第58-60页 |
5.1.1 实验昆虫 | 第58页 |
5.1.2 Btdsx基因的T7启动子引物设计 | 第58-59页 |
5.1.3 dsRNA的合成 | 第59页 |
5.1.4 饲喂dsRNA | 第59页 |
5.1.5 RT-qPCR检测沉默效率 | 第59页 |
5.1.6 饲喂干扰后烟粉虱形态观察 | 第59-60页 |
5.2 结果与分析 | 第60-65页 |
5.2.1 烟粉虱dsBtdsx引物筛选 | 第60页 |
5.2.2 干扰后烟粉虱的Btdsx表达量的变化 | 第60-63页 |
5.2.3 饲喂dsBtdsx后烟粉虱的形态变化 | 第63-65页 |
第六章 RNAI技术揭示BTTRA2在烟粉虱性别决定中的作用 | 第65-71页 |
6.1 材料方法 | 第65-66页 |
6.1.1 实验昆虫 | 第65页 |
6.1.2 Bttra2基因的T7启动子引物设计 | 第65-66页 |
6.1.3 dsRNA的合成 | 第66页 |
6.1.4 饲喂dsRNA | 第66页 |
6.1.5 RT-qPCR检测沉默效率 | 第66页 |
6.1.6 饲喂干扰后烟粉虱形态观察 | 第66页 |
6.2 结果与分析 | 第66-71页 |
6.2.1 烟粉虱dsBttra2引物筛选 | 第66-67页 |
6.2.2 饲喂dsBttra2烟粉虱在不同时间内表达量的变化 | 第67-70页 |
6.2.3 饲喂dsBttra2后烟粉虱的形态变化 | 第70-71页 |
第七章 RNAI技术揭示BTTRA2基因与BTDSX基因的相互作用 | 第71-73页 |
7.1 材料方法 | 第71页 |
7.1.1 实验昆虫 | 第71页 |
7.1.2 T7启动子引物设计 | 第71页 |
7.1.3 dsRNA的合成 | 第71页 |
7.1.4 饲喂dsRNA | 第71页 |
7.2 结果与分析 | 第71-73页 |
7.2.1 饲喂dsRNA烟粉虱Btdsx和Bttra2基因表达量的变化 | 第71-73页 |
第八章 全文结论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-85页 |
附录 | 第85-90页 |
致谢 | 第90-91页 |
作者简历 | 第91-92页 |