| 学位论文数据集 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 手性合成研究的意义 | 第13页 |
| 1.2 生物法制备手性化合物 | 第13-14页 |
| 1.3 微生物转化反应在药物合成中的应用 | 第14-16页 |
| 1.3.1 概述 | 第14页 |
| 1.3.2 微生物转化反应的特点 | 第14-16页 |
| 1.4 应用于选择性生物催化的微生物 | 第16-17页 |
| 1.4.1 面包酵母(Baker's yeast) | 第16页 |
| 1.4.2 其他微生物 | 第16-17页 |
| 1.5 微生物法还原羰基化合物制备手性药物中间体 | 第17-20页 |
| 1.5.1 微生物法还原羰基化合物的原理 | 第17-18页 |
| 1.5.2 控制反应立体选择性的方法 | 第18-20页 |
| 1.5.2.1 选择合适的微生物 | 第18-19页 |
| 1.5.2.2 添加辅助底物或抑制剂 | 第19-20页 |
| 1.6 应用于还原羰基化合物的脱氢酶简介 | 第20-24页 |
| 1.6.1 脱氢酶简介 | 第20-21页 |
| 1.6.2 脱氢酶的生物多样性 | 第21-22页 |
| 1.6.3 脱氢酶在手性化合物合成中研究进展 | 第22-24页 |
| 1.7 生物法催化不对称合成研究的新方向 | 第24-25页 |
| 1.8 制备手性1-苯乙醇研究意义及内容 | 第25-28页 |
| 1.8.1 手性药物的概述 | 第25-27页 |
| 1.8.2 课题研究的内容 | 第27-28页 |
| 第二章 产苯乙醇脱氢酶菌株的初筛 | 第28-36页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 筛选方案的确定 | 第28-29页 |
| 2.2.1 产苯乙醇脱氢酶菌株的筛选 | 第28页 |
| 2.2.2 筛选优化基本流程 | 第28-29页 |
| 2.3 材料与方法 | 第29-33页 |
| 2.3.1 主要试剂和药品 | 第29页 |
| 2.3.2 主要仪器 | 第29-30页 |
| 2.3.3 培养基 | 第30页 |
| 2.3.3.1 筛选培养基 | 第30页 |
| 2.3.3.2 菌株斜面保存培养基 | 第30页 |
| 2.3.3.3 液体产酶培养基 | 第30页 |
| 2.3.4 实验方法 | 第30-33页 |
| 2.3.4.1 土壤中菌株的筛选 | 第30-31页 |
| 2.3.4.2 菌株的液体培养及预处理 | 第31页 |
| 2.3.4.3 完整细胞转化DL-1-苯乙醇 | 第31页 |
| 2.3.4.4 2,4-二硝基苯肼检测法确定菌株苯乙醇脱氢酶的大致活性 | 第31-32页 |
| 2.3.4.5 初筛过程中转化率的确定 | 第32-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-35页 |
| 2.4.1 土壤中菌株的筛选 | 第33页 |
| 2.4.2 2,4-二硝基苯肼检测法检测波长的确定 | 第33页 |
| 2.4.3 苯乙酮标准曲线的绘制 | 第33-34页 |
| 2.4.4 菌株完整细胞转化苯乙酮的结果 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 产苯乙醇脱氢酶菌株的复筛 | 第36-47页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-41页 |
| 3.2.1 主要试剂和药品 | 第36-37页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2.3 培养基 | 第37-38页 |
| 3.2.3.1 菌株斜面保存培养基 | 第37页 |
| 3.2.3.2 液体产酶培养基 | 第37-38页 |
| 3.2.4 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.2.4.1 菌株的液体培养及预处理 | 第38页 |
| 3.2.4.2 完整细胞转化苯乙酮 | 第38页 |
| 3.2.4.3 复筛转化 | 第38页 |
| 3.2.4.4 检测波长的确定 | 第38-39页 |
| 3.2.4.5 HPLC法测定转化率 | 第39页 |
| 3.2.4.6 手性HPLC法测定产物1-苯乙醇的对映体过量值(ee值) | 第39-41页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第41-46页 |
| 3.3.1 菌株完整细胞转化苯乙酮重复验证初筛菌种活性 | 第41页 |
| 3.3.2 HPLC法测定转化率 | 第41-44页 |
| 3.3.3 手性HPLC法测定转化产物1-苯乙酮的ee值 | 第44-46页 |
| 3.4 小结 | 第46-47页 |
| 第四章 菌株XC35-8培养及转化条件的研究 | 第47-61页 |
| 4.1 引言 | 第47页 |
| 4.2 材料与方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 主要试剂和药品 | 第47-48页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第48页 |
| 4.2.3 培养基 | 第48-49页 |
| 4.2.3.1 菌株斜面保存培养基 | 第48页 |
| 4.2.3.2 液体产酶培养基 | 第48-49页 |
| 4.2.4 实验方法 | 第49-50页 |
| 4.2.4.1 研究培养条件时的培养基 | 第49页 |
| 4.2.4.2 菌株XC35-8的液体培养及预处理 | 第49页 |
| 4.2.4.3 菌株XC35-8完整细胞转化苯乙酮 | 第49页 |
| 4.2.4.4 HPLC法确定产率和产物的ee值 | 第49-50页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第50-60页 |
| 4.3.1 培养条件的影响 | 第50-57页 |
| 4.3.1.1 碳源对菌体XC35-8产苯乙醇脱氢酶的影响 | 第50页 |
| 4.3.1.2 氮源对菌体XC35-8产苯乙醇脱氢酶的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.1.3 碳源浓度的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.1.4 氮源浓度的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.1.5 发酵时间对生长的影响 | 第53页 |
| 4.3.1.6 温度对酶产量的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.1.7 初始pH值对产率和ee值的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.1.8 金属离子对酶形成的影晌 | 第55-56页 |
| 4.3.1.9 旋转摇床速度对酶形成的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.2 转化过程中的参数影 | 第57-60页 |
| 4.3.2.1 反应体系中底物浓度对转化的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.2.2 反应体系pH值对转化的影响 | 第58页 |
| 4.3.2.3 反应温度对转化的影响 | 第58-59页 |
| 4.3.2.4 反应时间对转化的影响 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-61页 |
| 第五章 辅助底物对酶促反应的影响 | 第61-68页 |
| 5.1 引言 | 第61-62页 |
| 5.2 材料与方法 | 第62-65页 |
| 5.2.1 主要试剂和药品 | 第62-63页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第63-64页 |
| 5.2.3 培养基 | 第64页 |
| 5.2.3.1 菌株斜面保存培养基 | 第64页 |
| 5.2.3.2 液体产酶培养基 | 第64页 |
| 5.2.4 实验方法 | 第64-65页 |
| 5.2.4.1 菌株的液体培养及预处理 | 第64页 |
| 5.2.4.2 辅助底物促进还原反应的研究 | 第64-65页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第65-67页 |
| 5.3.1. 不同辅助底物对酶促反应的影响 | 第65-66页 |
| 5.3.2 异丙醇作为辅助底物对酶促反应的影响 | 第66-67页 |
| 5.3.3 异丙醇作为辅助底物促进苯乙酮还原成1-苯乙醇的作用原理 | 第67页 |
| 5.4 小结 | 第67-68页 |
| 第六章 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77-78页 |
| 附件 | 第78-79页 |
