| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-16页 |
| 1.1 癌症的病因及治疗方法 | 第9-10页 |
| 1.1.1 癌症的病因 | 第9页 |
| 1.1.2 癌症的主要治疗方法 | 第9-10页 |
| 1.2 IL-24 结构及生物学活性 | 第10-13页 |
| 1.2.1 IL-24 的来源和基本结构 | 第10-11页 |
| 1.2.2 IL-24 的免疫调节作用 | 第11页 |
| 1.2.3 IL-24 的抗肿瘤特性 | 第11页 |
| 1.2.4 IL-24 的抗肿瘤机制 | 第11-12页 |
| 1.2.5 IL-24 的临床试验 | 第12-13页 |
| 1.3 IL-24 的体外表达 | 第13-15页 |
| 1.4 本课题主要研究内容及意义 | 第15-16页 |
| 第二章 IL-24 蛋白的原核表达及纯化 | 第16-30页 |
| 2.1 实验试剂 | 第16页 |
| 2.2 实验材料 | 第16页 |
| 2.3 实验仪器 | 第16页 |
| 2.4 主要实验溶液 | 第16-17页 |
| 2.5 实验方法 | 第17-23页 |
| 2.5.1 重组质粒 PET-EI-IL-24 的构建 | 第17-21页 |
| 2.5.2 ELP-Intein-IL-24 融合蛋白的诱导表达及鉴定 | 第21-22页 |
| 2.5.3 ELP-Intein-IL-24 融合蛋白的纯化 | 第22页 |
| 2.5.4 ELP-Intein-IL-24 融合蛋白的自我切割反应 | 第22-23页 |
| 2.5.5 IL-24 蛋白 western blot 鉴定 | 第23页 |
| 2.6 实验结果与讨论 | 第23-29页 |
| 2.6.1 IL-24 基因 PCR 扩增与测序结果 | 第23-24页 |
| 2.6.2 重组质粒 PET-EI-IL-24 的构建及转化 | 第24-25页 |
| 2.6.3 EI-IL-24 融合蛋白表达产物检测 | 第25-26页 |
| 2.6.4 EI-IL-24 融合蛋白的纯化结果 | 第26-28页 |
| 2.6.5 EI-IL-24 融合蛋白自我切割结果 | 第28页 |
| 2.6.6 IL-24 蛋白 western blot 鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.7 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 IL-24 蛋白抗肿瘤生物学活性的鉴定 | 第30-34页 |
| 3.1 实验试剂 | 第30页 |
| 3.2 实验材料 | 第30页 |
| 3.3 实验仪器 | 第30页 |
| 3.4 试验方法 | 第30-32页 |
| 3.4.1 hepG2 细胞的复苏 | 第30-31页 |
| 3.4.2 hepG2 细胞的传代培养 | 第31页 |
| 3.4.3 IL-24 蛋白处理 hepG2 细胞 | 第31页 |
| 3.4.4 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 3.5 实验结果与讨论 | 第32-33页 |
| 3.6 小结 | 第33-34页 |
| 第四章 IL-24 互作蛋白的验证与定位 | 第34-48页 |
| 4.1 实验试剂 | 第34页 |
| 4.2 实验材料 | 第34页 |
| 4.3 实验仪器 | 第34页 |
| 4.4 实验方法 | 第34-41页 |
| 4.4.1 CO-IP 验证 IL-24 与 HLA-C、NDUFA13 的相互作用 | 第34-38页 |
| 4.4.2 IL-24、HLA-C、NDUFA13 三种蛋白的单定位 | 第38-40页 |
| 4.4.3 IL-24 与 HLA-C、DNUFA13 的共定位 | 第40页 |
| 4.4.4 荧光能量共振转移（FRET） | 第40-41页 |
| 4.5 实验结果与讨论 | 第41-47页 |
| 4.5.1 IL-24 与 HLA-C、NDUFA13 的 CO-IP 实验结果 | 第41页 |
| 4.5.2 IL-24、HLA-C、NDUFA13 三种蛋白单定位实验结果 | 第41-44页 |
| 4.5.3 IL-24 与 HLA-C、NDUFA13 的共定位 | 第44-45页 |
| 4.5.4 荧光能量共振转移实验 | 第45-47页 |
| 4.6 小结 | 第47-48页 |
| 第五章 结论与展望 | 第48-49页 |
| 5.1 结论 | 第48页 |
| 5.2 展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附录 攻读硕士期间已发表和待发表的论文 | 第55页 |
