| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-43页 |
| 1. 淀粉样纤维与疾病 | 第12-20页 |
| 1.1 蛋白质折叠 | 第12-13页 |
| 1.2 蛋白质错误折叠病 | 第13-17页 |
| 1.3 淀粉样纤维 | 第17-19页 |
| 1.4 淀粉样纤维与蛋白质错误折叠病的关系 | 第19-20页 |
| 2. 淀粉样纤维的检测手段 | 第20-26页 |
| 2.1. ThT/ANS荧光探针 | 第20-22页 |
| 2.2 圆二色光谱(CD)/傅里叶变换红外光谱(FTIR) | 第22-24页 |
| 2.3 透射电子显微镜(TEM)/原子力显微镜(AFM) | 第24-25页 |
| 2.4 Sarkosyl不溶SDS-PAGE | 第25页 |
| 2.5 X射线衍射 | 第25-26页 |
| 3. 纤维形成片段 | 第26-33页 |
| 3.1 计算机预测 | 第27-28页 |
| 3.2 片段分析 | 第28页 |
| 3.3 酶切 | 第28-29页 |
| 3.4 扫描脯氨酸突变 | 第29页 |
| 3.5 电子顺磁共振(EPR) | 第29-31页 |
| 3.6 氢氘交换 | 第31页 |
| 3.7 固体核磁共振(ssNMR) | 第31-33页 |
| 4. 纤维形成片段的应用 | 第33-36页 |
| 4.1 解析淀粉样纤维及寡聚体的结构 | 第33-35页 |
| 4.2 药物作用的靶点 | 第35-36页 |
| 4.3 蛋白质工程 | 第36页 |
| 5. Tau蛋白简介 | 第36-39页 |
| 6. Ataxin-3简介 | 第39-41页 |
| 7. 本课题的研究意义 | 第41-43页 |
| 第二章 纤维形成片段在Tau蛋白生长纤维中的作用 | 第43-72页 |
| 摘要 | 第43页 |
| 2.1 引言 | 第43-45页 |
| 2.2 材料与方法 | 第45-50页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第45页 |
| 2.2.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 2.2.3 缓冲液配制 | 第46页 |
| 2.2.4 实验中用到的质粒 | 第46页 |
| 2.2.5 K18突变体载体构建 | 第46-47页 |
| 2.2.6 K18及其突变体的表达与纯化 | 第47-48页 |
| 2.2.7 K18及其突变体的长纤维条件 | 第48页 |
| 2.2.8 纤维种子诱导实验 | 第48页 |
| 2.2.9 ThT荧光 | 第48页 |
| 2.2.10 透射电子显微镜 | 第48-49页 |
| 2.2.11 远紫外圆二色光谱 | 第49-50页 |
| 2.2.12 MTT细胞毒性 | 第50页 |
| 2.3 实验结果 | 第50-66页 |
| 2.3.1 研究方案 | 第50-52页 |
| 2.3.2 缺失纤维形成片段使K18丧失长纤维能力 | 第52-54页 |
| 2.3.3 插入阴性对照不能恢复K18长纤维能力 | 第54页 |
| 2.3.4 插入异源纤维形成片段恢复K18长纤维能力 | 第54-58页 |
| 2.3.5 无heparin诱导下异源纤维形成片段的驱动长纤维作用 | 第58-60页 |
| 2.3.6 不同长度纤维形成片段诱导长纤维能力比较 | 第60-62页 |
| 2.3.7 不同纤维形成片段间的交叉种子诱导能力 | 第62-66页 |
| 2.3.8 插入不同纤维形成片段的细胞毒性 | 第66页 |
| 2.4 讨论 | 第66-72页 |
| 2.4.1 纤维形成片段与蛋白质形成淀粉样纤维的关系 | 第66-69页 |
| 2.4.2 纤维形成片段与纤维多态性 | 第69-70页 |
| 2.4.3 纤维形成片段与种子诱导 | 第70-72页 |
| 第三章 Ataxin-3的纤维形成片段的定位 | 第72-109页 |
| 摘要 | 第72页 |
| 3.1 引言 | 第72-74页 |
| 3.2 材料与方法 | 第74-81页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第74-75页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第75页 |
| 3.2.3 缓冲液配制 | 第75页 |
| 3.2.4 实验中用到的质粒 | 第75页 |
| 3.2.5 实验中用到的引物 | 第75-77页 |
| 3.2.6 Ataxin-3突变体载体构建 | 第77-78页 |
| 3.2.7 Ataxin-3及其突变体的表达与纯化 | 第78-79页 |
| 3.2.8 Ataxin-3及其突变体的长纤维条件 | 第79页 |
| 3.2.9 ThT荧光 | 第79页 |
| 3.2.10 Sarkosyl不溶SDS-PAGE | 第79页 |
| 3.2.11 透射电子显微镜 | 第79-80页 |
| 3.2.12 远紫外圆二色光谱 | 第80页 |
| 3.2.13 红外光谱 | 第80-81页 |
| 3.3 实验结果 | 第81-104页 |
| 3.3.1 研究方案 | 第81页 |
| 3.3.2 不同长度polyQ的Ataxin-3_(221-361)的长纤维能力对比 | 第81-85页 |
| 3.3.3 3D-profile算法预测Ataxin-3的纤维形成片段 | 第85-87页 |
| 3.3.4 扫描脯氨酸突变定位Ataxin-3(22Q)纤维形成片段 | 第87-96页 |
| 3.3.5 丙氨酸突变和甘氨酸突变对Ataxin-3(22Q)形成淀粉样纤维的影响 | 第96-100页 |
| 3.3.6 脯氨酸突变对Ataxin-3(45Q)形成淀粉样纤维的影响 | 第100-104页 |
| 3.4 讨论 | 第104-109页 |
| 参考文献 | 第109-129页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第129-130页 |
| 致谢 | 第130页 |
