Abstract | 第7-9页 |
摘要 | 第10-12页 |
Chapter 1. LITERATURE REVIEW | 第12-41页 |
1.1 Introduction | 第12-18页 |
1.1.1 Lepidopteran insect pests | 第12-14页 |
1.1.2 Common cutworm, Spodoptera litura Fabricius: Insect Pest | 第14页 |
1.1.3 Common Name | 第14-15页 |
1.1.4 Classification | 第15页 |
1.1.5 Economic importance | 第15页 |
1.1.6 Morphology | 第15页 |
1.1.7 Life cycle | 第15-16页 |
1.1.8 Insecticide Resistance in Spodoptera litura | 第16-17页 |
1.1.9 Plant-Insect Interactions | 第17-18页 |
1.2 Acetylcholinesterase | 第18-25页 |
1.2.1 Distribution of Acetylcholinesterase | 第18-19页 |
1.2.2 Insecticide Target Sites and Structural Biology of Acetylcholinesterase | 第19-21页 |
1.2.3 Acetylcholinesterase insecticide Resistance Mechanisms | 第21-24页 |
1.2.4 Gene encoding acetylcholinesterase in insects | 第24-25页 |
1.3 RNA interference | 第25-31页 |
1.3.1 RNA interference | 第25页 |
1.3.2 A short history of the innovation of RNAi | 第25-27页 |
1.3.3 RNAi Pathways and Mechanism | 第27-28页 |
1.3.4 Use of RNAi | 第28-31页 |
1.4 RNAi in insects | 第31-40页 |
1.4.1 Preliminary RNAi trials in insects | 第31-32页 |
1.4.2 Study on the function of insect genes using RNAi methods | 第32-35页 |
1.4.3 Techniques of dsRNA transfer to Insects | 第35-36页 |
1.4.4 Use of RNAi in insect pest control strategies | 第36-39页 |
1.4.5 Susceptibility to RNAi | 第39-40页 |
1.5 Objectives of the study | 第40-41页 |
Chapter 2. Cloning and expression of two Ace genes in Spodoptera litura | 第41-72页 |
2.1 Introduction | 第41-42页 |
2.2 Materials and Methods | 第42-45页 |
2.2.1 Laboratory Equipment: | 第42-43页 |
2.2.2 Reagents and Expression vectors | 第43-44页 |
2.2.3 Other Reagents | 第44-45页 |
2.3 Methods | 第45-56页 |
2.3.1 Cloning of cDNA fragments of two SlAce genes | 第45页 |
2.3.2 Insects | 第45页 |
2.3.3 RNA extraction | 第45-46页 |
2.3.4 First Strand cDNA Synthesis | 第46页 |
2.3.5 Polymerase Chain Reaction (PCR) | 第46-47页 |
2.3.6 Purification of DNA using DNA Gel Extraction Kit | 第47-49页 |
2.3.7 DNA ligation with pGEM-T Easy Vector | 第49页 |
2.3.8 Transformation of plasmid DNA into Bacteria host (E. coli) | 第49-51页 |
2.3.9 Bacteria PCR | 第51页 |
2.3.10 Phylogenetic analysis | 第51-53页 |
2.3.11 SlAce genes expression pattern in different developmental stages and tissues | 第53-56页 |
2.3.12 Statistical analysis | 第56页 |
2.4 Results | 第56-68页 |
2.4.1 Sequence analysis of Spodoptera litura AChE genes | 第56-66页 |
2.4.2 SlAce genes expression profiles in S. litura | 第66-68页 |
2.5 Discussion | 第68-70页 |
2.6 Conclusion | 第70-72页 |
Chapter 3. Functional analysis of two Ace genes in Spdoptera litura | 第72-83页 |
3.1 Introduction | 第72-73页 |
3.2 Methods | 第73-75页 |
3.2.1 dsRNA synthesis and application | 第73-74页 |
3.2.2 SlAce knockdown determination using qRT-PCR | 第74页 |
3.2.3 Statistical analysis | 第74-75页 |
3.3 Results | 第75-81页 |
3.3.1 Gene silencing through larvae injection of dsSlAce | 第75-76页 |
3.3.2 Injection with dsRNA delays pupation and emergence | 第76-77页 |
3.3.3 dsAce2 injection affects egg laying, egg hatching and progeny development | 第77-81页 |
3.4 Discussion | 第81-83页 |
References | 第83-102页 |
Appendix I | 第102-104页 |
Appendix II | 第104-105页 |
Scientific Publications | 第105-106页 |
Acknowledgements | 第106-108页 |